Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Аппельт Г. -> "Введение в методы микроскопического исследования" -> 67

Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.

Аппельт Г. Введение в методы микроскопического исследования — МЕДГИЗ, 1959. — 429 c.
Скачать (прямая ссылка): vvedenievmetodimikro1959.djv
Предыдущая << 1 .. 61 62 63 64 65 66 < 67 > 68 69 70 71 72 73 .. 120 >> Следующая

Был сделан еще один шаг вперед. Если совместно со сдвигающим фазу слоем в плоскость фазовой пластинки в объективе поместить светопоглощающий материал, то в соответствующих препаратах контраст усилится.
Кроме этого, можно изменять толщину сдвигающего фазу слоя, ибо при прохождении света через объект наступает более или менее сильное смещение фазы световой волны, благодаря чему может быть изменен контрастный эффект в изображении. Если же изменить толщину фазовой пластинки, то это влияние, уменьшающее контраст препаратов, будет устранено.
В Финляндии над усилением контраста при исследовании неокрашенных препаратов трудился Вильска, нашед-
ший несложный метод применения обыкновенных объекта-вов микроскопа как фазовоконтрастных объективен. Он покрывал копотью свечи верхнюю поверхность линзы объ-"ектива до половины ее светопроницаемости и на часовом Тчжарном станке мягким материалом протирал кольцеобразную поверхность, свободную от копоти. Она была вдвое шире, чем обычно бывает кольцо у соответствующего фазового объектива. Он получал объект темным на светлом фоне без световых ореолов. Этот метод можно сравнить со способом позитивного фазового контраста.
Если коптят так сильно, что проходит лишь 8—9 % света и потом вытирают копоть для получения кольца, которое совпадает с изображением кольцевой диафрагмы конденсора, то получают светлые изображения объекта на фоне тона темной сепии. Эти изображения сходны с изображением, получаемым при негативном фазовом контраете.
Рис. 268 и 269. Кристаллы сахара, увеличение 20 : 1 с последующим увеличением 100 : 1 (снимки автора).
Рис. 268 Между скрещенными поляризационными фильтрами.
Рис. 269. При одновременном применении фазовоконтрастного микроскопа.
Прибор аноптрального контраста фирмы Рейхерт в Вене в виде особой формы фазовоконтрастного устройства является техническим воплощением метода Вильска.
12.5. ФАЗОВОКОНТРАСТНЫЙ МИКРОСКОП С ПОЛЯРИЗАЦИОННЫМ ФИЛЬТРОМ
Без особых изменений в конструкции фазовоконтрастного микроскопа, путем одновременного применения фазовоконтрастного микроскопа со скрещивающимися поляризационными фильтрами при соответствующих объектах можно видеть значительно больше, чем при применении в отдельности фазовоконтрастного микроскопа или поляризационного микроскопа (см. рис. 268 и 269).
Пайне создал фазовоконтрастный микроскоп, в котором благодаря поляризационным фильтрам может быть достигнуто значительное улучшение контраста.
Благодаря введению в конденсор, помимо обычной кольцевой диафрагмы, поляризатора и вместо фазовой пластинки
в кольцевой поверхности задней фокальной плоскости объектива — пластинки, сдвигающей фазу на 1/2Л со смещенными на 45° главными осями, прямые и отклоненные пучки света поляризуются различно. С помощью кварцевого компенсатора можно произвольно изменить разность фаз, а с помощью анализатора — разность амплитуд между прямым и отклоненным пучками света.
Это также позволяет уравнять различные смещения фаз, возникающие в исследуемых объектах, вследствие чего достигается наилучший фазовый контраст.
12.6. ФАЗОВЫЙ КОНТРАСТ С ИЗМЕНЕНИЕМ СТЕПЕНИ КОНТРАСТА
В народном предприятии Карл Цейсс в Йене было найдено, что контраст в значительной степени зависит от ширины фазового кольца. Чем уже фазовое кольцо, тем выше контраст. При зтом применяют способ позитивного фазового контраста. Объективы снабжаются двумя фазовыми кольцами различной ширины. Фазовые диафрагмы на пути осветительных лучей имеют два соответствующих кольца и связаны с ирисовой диафрагмой. Эта диафрагма позволяет последовательно исключать из светового потока краевые .цучи сначала до наружного широкого фазового кольца, а затем так, что остается действующим лишь узкое внутреннее фазовое кольцо.
При полностью открытой ирисовой диафрагме возникает очень светлое, бедное контрастами изображение.
После выключения периферийных лучей возникает картина, соответствующая нормальному изображению в фазовом контрасте, а после выключения периферического фазового кольца — довольно темное, но значительно более богатое контрастами изображение, чем при обычном способе фазового контраста.
Все зто применено в цейссовском микроскопе «"Люми-пан» с панкратическим конденсором. Благодаря этому можно подбирать необходимую степень контраста в зависимости от объекта.
12.7. ЦВЕТНОЙ ФАЗОВЫЙ КОНТРАСТ
Существует, понятно, настоятельное желание иметь возможность наблюдать неокрашенные микроскопические препараты цветными с помощью методов оптической окраски, и при зтом в фазовом контрасте, так как опыт показывает, что глаз человека воспринимает различия в цветах лучше, чем различия в яркостях.
i
Рис. 270. Клетки эпителия слизистой оболочки щеки в цветном фазовом контрасте. Увеличение 240 : 1 (по снимку фирмы Лейтц из Браунбека «Цветной фазовый контраст», обзор 54, в. 7, стр.
203—205).
Поэтому было сделано немало попыток скомбинировать оба метода. Вольтер описал сравнительно несложный путь получения цветных фазовоконтрастных изображений.
Предыдущая << 1 .. 61 62 63 64 65 66 < 67 > 68 69 70 71 72 73 .. 120 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed