Реакции и методы исследования органических соединений, Книга восемнадцатая - Титов Ю.А.
Скачать (прямая ссылка):
ТАБЛИЦА XXI
УФ-спектры стероидов в концентрированной серной кислоте136
Группировка
Положение максимумов в УФ-спектре (ммк)
Оксигруппа Кетогруппа
Изолированная двойная связь
а, ?-Непредельная кетогруппа
3 -Кето - Д1 <4 -группировка
3 -Кето- Д4 >" -группировка
17а-Окси-20-кетогруппировка
17<х,21-Днокси-20-кетогруппировка
220—278 н 300—600 220—278 и 300—325 400—449 279—302
247—267 и 295—318 343—346 400—499 450—549
Приведенные в табл. XXI полосы поглощения очень широки и сами по себе мало пригодны для целей идентификации. На практике для каждой группы хромофоров устанавливаются частные эмпи рические правила, связывающие их спектр и химическое строение. Примером могут служить сопряженные стероидные кетоны, спектры которых в концентрированной серной кислоте были разделены на три класса133» 137: Класс А: Хмакс. при 275—299 ммк
3-Кето-А4-стероиды с оксигруппами в положениях la, l?,
2а, 6а, 7а, 7?, 9а и 19. Класс В: Кизкс. при 247—267 и 295—318 ммк
3?Кето-Д1,4-стероиды. Класс С: Ямакс. при 336—365 ммк
3-Кето-А*-стероиды с оксигруппами в положениях 2?, 6?
и 7?, 3-кето-А4'6-и 7-кето-Д3,5-стероиды, а также 3?-0KCH-7-Ke-
то-А5-стероиды.
Единой теории, объясняющей характер УФ-спектров стероидов в концентрированных кислотах, в настоящее время еще не создано.
Ультрафиолетовые спектры поглощения стероидных соединений 69
Отдельные случаи объяснялись протонированием кислотами с образованием ионов, образованием новых хромофоров in situ и т. д.143' 146, 150~152, но все сложные эффекты времени экспозиции, разбавления и нагревания объяснить пока не удалось.
Цветные реакции разработаны практически для всех классов стероидных соединений (табл. XXII). Эти реакции применяются как для количественного анализа стероидов путем колориметри-рования образовавшихся окрашенных продуктов, так и для качественного их открытия в растворах и на хроматограммах. Появление цветной окраски в большинстве случаев связывается с образованием галохромных солей ненасыщенных углеводородов, образующихся при дегидратации и дегидрировании исходных стероидов153.
ТАБЛИЦА XXII
ОсИОВНЫе ЦВеТНЫе реаКЦИИ СТерОИДНЫХ СОеДИИеНИЙ !3,109,159—171
Применяемые реагенты и название реакции
макс могена (ммк)
хро-
Котостероиды
КОН, ж-динитробензол (17-кетостероиды, реакция Циммермана)
SbCl3, СНХООН, (CH3CO)2O (17-кетостероиды,
реакция Пинкуса) SnCl2, CH3OH, n-диметиламиноаннлин (непредельные
кетостероиды)
Кортикостероиды
H2SO4, фенилгидразин (реакция Портера-Зильбера) Тетразолийхлориды
3$-0кси- Аъ-стероиды
CHCl3, CH3COOH, H2SO4 (реакция Либермана-Бур харда)
CHCI3, CH3COCI1 ZnCI., (реакция Чугаева) FeCI3, CH3COOH, H2SO4 (реакция Келлера-Килиани) FeSO4. CH3COOH, H2SO4 (реакция Златкиса-Зака) H2SO4, антрон, тиомочевнна 70 % HClO1
Эстрогены 112SO4, гидрохинон (реакция Кобера)
520 610 415—485
410 480
620 528 566 490 600 410
515—520
Основным методом определения кортикостероидов является реакция Портера — Зильбера, хромофорная группировка в которой представляет собой протежированный 21-монофенилгидра-зон154' 155. Следует также упомянуть о реакциях селективного
70
Ю. А. Титов, И. С. Левина
расщепления боковой цепи кортикостероидов такими реагентами, как HIO4 или NaBiO3, при которых, в зависимости от строения боковой цепи, образуются формальдегид, ацетальдегид или 17-ке-тостероиды, определяемые спектрофотометрически с помощью различных производных156"158.
Некоторые цветные реакции применяются для определения нескольких групп стероидных соединений. Примером может служить реакция с тетразолиевыми солями, которая используется не только для анализа кортикостероидов172"174, но и для обнаружения некоторых производных андростана и эстрана175. Другим примером является реакция с AlCl3 и анисовым альдегидом, служащая для определения большинства классов стероидных соединений176"179. С другой стороны, разработаны также цветные реакции для отдельных представителей стероидов; так, смеси кортизола и кортизона анализируются с помощью реакции с дифениламином180 или 2,5-ди-шрет-бутил-п-крезолом181, 6-хлор-прегнадиен-4,6-ол-17а-дион-3,20 — с пикриновой кислотой182, тестостерон — с 2,4-динитрофенолом и H2SO4183 и т. д.
В разделе о цветных реакциях следует упомянуть также и о jt-комплексах стероидов с изолированной двойной связью с те-трацианэтиленом (Ямакс. 330—540 ммк)19, тетранитрометаном (А,макс> 450—580 ммк)18 и иодом (^макс. 295—330 ммк)20' 21. Появляющиеся при образовании этих комплексов спектры переноса заряда позволяют различать степень замещенности двойных связей.
Реакции, при которых происходит появление или исчезновение спектрофотометрически определяемых соединений, составляют последнюю группу методов, применяемых при анализе стероидов. Примером таких реакций может служить ферментативный анализ стероидов, основанный на использовании окси-стероиддегидрогеназ бактериального происхождения, нуждающихся в качестве кофермента в НАД (никотинамидадениндину-клеотид)184» 18а.
