Методы культивирования клеток - Вахтин Ю.Б.
Скачать (прямая ссылка):
Холодильники КЛГХ изготавливаются по ТУ 27-52-3727-85, код ОКП 51 5621. Система САПТ изготовляется по ТУ 27-72-115-86.
Культуральная посуда и способы ее обработки
М. И. Блинова, Л. Н. Лисенок
Институт цитологии АН СССР, Технологический институт им. Ленсовета,
Ленинград
Основная часть ассортимента специальной культуральной посуды предназначена для роста клеток в монослое, что определяет особые требования к свойствам поверхности и материала изделий, как из стекла, так и из пластика. Для культивирования клеток обычно используют флаконы Карреля, сосуды Колля, матрасы, чашки Петри, платы, роллерные сосуды, пробирки, пипетки, флаконы для питательных сред, растворов и воды.
Хотя в последние два десятилетия очень широко применяется пластиковая посуда одноразового использования, но посуда из стекла не потеряла своего значения. Она обладает рядом бесспорных преимуществ: хорошие адгезионные свойства поверхности, способствующие прикреплению и распластыванию клеток; многократность использования; биологическая инертность стекла ряда составов (группа алюмоборосиликатных стекол), термостойкость и др. По мнению некоторых исследователей [1], стеклянной посудой необходимо пользоваться в экспериментах с контролируемым уровнем кислорода, так как в пластике кислород способен растворяться. Кроме того, из пластика могут экстрагироваться водорастворимые органические соединения. ^
«Стекло — аморфный изотропный материал, получаемый переохлаждением расплавов неметаллических окислов и бескислородных соединений... Физико-химические свойства стекла зависят от его химического состава, условий варки, формования и последующей термической и химической обработки» ([2], с. 1027—1034).
Характеристика и свойства материала. Для стеклянной лабораторной и культуральной посуды на практике в основном применяются два типа составов — многощелочное и малощелочное боросиликатное стекло типа «Пирекс». Свойства стекла оцениваются обычно по следующим критериям:
1) коэффициент линейного теплового расширения, 1/град • 107;
2) термостойкость, °С; 3) плотность, г/см , 4) водостойкость, мг/г; 5) кислотостойкость, %; 6) щелочестойкость, мг/дм2.
Щелочесодержащие силикатные стекла готовятся из относительно недорогих сырьевых материалов: песок, кальцинированная сода, известняк. Для специального назначения иногда вводятся добавки небольших количеств других веществ (осветлителей, гомогенизаторов). Щелочесодержащее стекло имеет, как правило, высокий коэффициент линейного теплового расширения, хорошо плавится, формуется. Но оно имеет недостаточную термостойкость и химическую устойчивость к воде, кислотам и щелочам. В нем, как правило, содержится большое (до 15 %) количество одного из оксидов щелочных металлов. Из отечественных стекол к этой группе относятся такие широко распространенные марки медицинских тарных стекол, как НС-1, НС-2, НС-3, тарные стекла для пищевых продуктов, ряд химиколабораторных стекол [3—5] (табл. 1 и 2).
Боросиликатное стекло классифицируется как простое стекло с минимальным составом, куда входят оксиды кремнезема, бора, алюминия; по сравнению с группой щелочесодержащих стекол оно содержит гораздо меньше (до 3—5 %) оксидов щелочных металлов и полностью свободно от тяжелых металлов (табл. 3 и 4). Один из нашедших большое применение в биологических лабораториях составов группы алюмоборосиликатных стекол — «Пирекс» — был разработан в 1912 г. фирмой «Corning» [6]. К группе боросиликатных стекол относится не только «Пирекс», но и марки Corning 7740 (США), KG-33 OWENS (США), Sovirel (Франция), В-37 GTK (Англия), Chance Brothers (Англия), Schott (ГДР), Duran-50 (ГДР), Simax (ЧССР), Termosil (ПНР) [7—9].
Боросиликатные малощелочные стекла имеют относительно низкое содержание щелочи и потому являются высокоустойчивыми к воде, в то время как щелочные стекла, изменяют pH дистиллированной воды при автоклавировании на 2.5 единицы. «Пирекс» имеет в своем составе примерно 80 % кремнезема, что обеспечивает его устойчивость ко всем кислотам, за исключением плавиковой (фтористоводородной) и горячей фосфорной.
Щелочные растворы (0.1—4 н.) разрушают все силикатные стекла, однако алюмоборосиликатное стекло «Пирекс» может класси-
Составы отечественных медицинских и химико-лабораторных стекол, находящих применение в биологических и биохимических лабораториях [3—5]
Марка стекла Доля следующих оксидов, % от массы
Si02 В203 А1203 СаО MgO ВаО ZnO Na20 К20 другие добавки
Стекла медицинского назначения по ГОСТ
19808-74:
НС-1 73.0 4.0 4.5 7.0 1.0 --- --- 8.5 2.0' _
НС-2 73.0 2.5 3.5 7.0 1.0 --- --- 11.0 2.0 _
