Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Вахтин Ю.Б. -> "Методы культивирования клеток" -> 11

Методы культивирования клеток - Вахтин Ю.Б.

Вахтин Ю.Б., Соминина А.А. Методы культивирования клеток — Л.: Наука, 1988. — 313 c.
Скачать (прямая ссылка): metodikultivirovaniya1988.djvu
Предыдущая << 1 .. 5 6 7 8 9 10 < 11 > 12 13 14 15 16 17 .. 171 >> Следующая

Наибольшую сложность представляет измерение концентрации углекислого газа в камере инкубатора, так как в применяемых в большинстве моделей этих приборов тепловых резистивных датчиках выходные параметры концентрации меняются в зависимости от влажности анализируемой газовой смеси. В настоящее время ряд фирм («Joan», «Ikemoto Scientific», «Hewlett-Packard») использует лазерные датчики, ликвидировавшие необходимость учета и коррекции показаний в зависимости от влажности.
В некоторых моделях СОг-инкубаторов наружная дверь имеет принудительный подогрев, что исключает или сильно уменьшает отпотевание внутренней стеклянной двери и облегчает наблюдение за содержимым инкубатора.
Из приборов этого вида в СССР разработан и выпускается газопроточный С02-инкубатор типа ГПИ-1 со следующими параметрами: объем рабочей камеры — 150 дм3, диапазон задания избыточной концентрации СО2 до 20 %, погрешность поддержания заданной концентрации С02±0.2 %, диапазон рабочих температур 25—70 °С, погрешность поддержания заданной температуры ±0.15 °С при 37 °С, градиент температуры по рабочему объему ±0.3 °С при 37 °С.
Лабораторные встряхиватели. Как известно, принудительное
перемешивание питательных сред с помещенными в них клеточными культурами обеспечивает лучший газообмен и, следовательно, повышает эффективность культивирования. Во многих случаях этот эффект возрастает при сочетании перемешивания с содержанием в оптимальной для данной культуры температуре. Приборы, осуществляющие эту операцию, называются лабораторными встряхива-телями. Конструктивно они состоят из платформы, на которой крепятся сосуды, заполненные суспензией, и приводного механизма, придающего платформе вращательное или возвратно-поступательное движение. При необходимости платформа помещается в воздушный термостат или водяную баню. Невзирая на внешнюю принципиальную простоту эти приборы относятся к достаточно сложным и дорогим техническим устройствам, что вытекает из ряда специальных требований к их работе, главным из которых является строгое плоско-параллельное перемещение платформы без толчков и вибрации. Кроме того, при вращательном движении диаметр этого перемещения должен быть одинаков в любой точке платформы. Естественно, в процессе работы прибор не должен перемещаться. Заданные режимы встряхивания (перемешивания), например радиус вращения, должны быть стабильными во времени. Привод платформы осуществляется как от электродвигателя через систему кинематических передач, так и приложение к платформе магнитного поля, изменяющегося во времени и пространстве по заданному закону.
Большинство современных приборов этого вида имеет следующие характеристики: частота возвратно-поступательного движения
платформой otr 10 до 300 колебаний в 1 мин, частота вращательного движения платформы от 40 до 400 об/мин, радиус вращения 20— 25 мм, ход возвратно-поступательного движения от 10 до 40 мм, стабильность поддержания заданных параметров не хуже ±1 % от заданной величины.
Большинство моделей встряхивателей позволяет перемешивание в одном режиме — вращательном или возвратно-поступательном. Наиболее современные модели (фирмы «Infors») являются универсальными, т. е. могут работать в любом из приведенных режимов перемешивания.
Во многих случаях встряхиватели имеют комплект сменных платформ, обеспечивающих возможность работы с сосудами различных типов (колбами, пробирками, чашками Петри и т. п.). Сосуды на платформе могут крепиться и в наклонном положении, что способствует газообмену за счет увеличения площади контакта жидкость—воздух.
Ряд моделей этих приборов снабжен реле времени для задания длительности цикла встряхивания и сигнализацией как об окончании цикла перемешивания, так и об аварийных ситуациях (о внезапной остановке, резком изменении режима встряхивания и др.).
При подборе нужной модели прибора необходимо учитывать, что сосуды, размещаемые на платформе, заполняются не более чем на ‘/г своего объема. При работе в водяной бане дополнительно
обеспечиваются невозможность попадания воды в перемещаемые сосуды и сигнализация о снижении уровня жидкости в бане ниже заданного уровня. Как водяные бани, так и воздушные термостаты для встряхивателей имеют системы задания и автоматического поддержания температуры в них.
Импортные приборы этого класса изготавливаются фирмами «Infors», «В. Braun Melsungen», «GFL», «Luckham» и др.
Роллерные установки. Одним из общепринятых методов культивирования клеток является их выращивание в цилиндрических сосудах из боросиликатного стекла, наполненных небольшим количеством питательной среды и вращающихся в горизонтальном положении со скоростью до 8 об/мин, что обеспечивает постоянное перемещение прикрепившихся клеток из питательной среды в атмосферу и обратно и их интенсивный рост. Устройства, реализующие эту процедуру, называются роллерными аппаратами. В подобных аппаратах могут размещаться до 45 роллерных сосуд©* длиной в 470 мм. Для повышения эффективности массового культивирования установки снабжаются системой, дающей возможность заменять питательную среду и удалять супернатант без остановки вращения. При этом сосуды закупориваются специальными «перфузионными» пробками, у которых центральная часть вращается независимо от периферийной. В эту часть пробки вводятся трубки для смены питательной среды, удаления супернатанта и введения инокулята. В состав упомянутой системы входят также перистальтические насосы и блок автоматики, регулирующий работу насосов во времени.
Предыдущая << 1 .. 5 6 7 8 9 10 < 11 > 12 13 14 15 16 17 .. 171 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed