Вирусология: В 3-х т. Том 1 - Филдс Б.Н.
ISBN 5-03-000283-9
Скачать (прямая ссылка):
Рис. 4.4. Микрофотография поверхности вируса Синдбис, полученная после мягкой обработки препарата детергентом [107]. Использован метод замораживания — травления. Справа — выявленный с помощью детергента бислой в увеличенном виде; видна гексагональная упаковка гликопротеинов. Их расположение в бислое сходно с таковым в самой вирусной мембране.
полагает наличие очень простого механизма почкования, в основе которого лежит ассоциация нуклеокапсидов с гликопротеинами в результате распознавания их трансмембранного цитоплазматического домена. На рис. 4.3 схематически изображена оболочка вируса Синдбис.
Постепенная детергентная солюбилизация вируса Синдбис (разд. «Выделение и гидрофобные свойства вирусных гликопротеинов») приводит к разделению вирусной оболочки на «лист^ ки». Эти листки, содержащие гликопротеины, могут соединяться и образовывать гексагональные структуры, в которых расположение гликопротеинов сходно с таковым в вирусной частице (рис. 4.4) [107]. Формирование структур, сходных с вирусными, свидетельствует о наличии сильных специфических гликопроте-ин-гликопротеиновых связей. Именно образование этих нековалентных связей наряду со специфическим распознаванием нук-леокапсидом участка заякоривания, вероятно, играет важную роль в регуляции процесса почкования.
Однородность популяции этих вирусов и регулярность их поверхностной структуры подтверждаются наблюдаемой иногда кристаллизацией SFV (рис. 4.5) [126]. Формирование трехмерных кристаллов предполагает наличие у вируса упорядоченной поверхностной структуры, способной к образованию повторяющихся специфических контактов, необходимых для кристаллизации.
Оболочка вируса Уукуниеми
Геном буньявируса Уукуниеми состоит из трех одноцепочечных сегментов РНК и ассоциирован с белком нуклеокапсида (мол. масса 25000). Мембрана содержит один гликопротеин. По данным электронной микроскопии вирус, по-видимому, созревает путем почкования в гладкие везикулы аппарата Голь-джи, хотя анализ вирусных липидов указывает на их сходство с липидами плазматической мембраны. При электронно-микроскопических исследованиях негативно контрастированных частиц и препаратов, полученных методом замораживания — травления, выявляются высокоупорядоченные поверхностные структуры {рис. 4.6).
Анализ взаимосвязи между морфологическими единицами на поверхности оболочки показывает, что эти единицы образуют поверхностную решетку с 7=12 (Р — 3) [108]. Разрушение этой решетки с помощью протеолитических ферментов приводит к появлению сильно деформированных, лишенных выступов частиц, что свидетельствует об участии поверхностных гликопротеинов в стабилизации вириона.
•TV*
ЮМШ0'
ШШ9ШГЩ0 0'
1штт w ш ШШш # ш\ И* *1Г|й|р im #
>• *« * «»*•**!
: • •**-#».# mm e ш ф
ж т Фтщ^тЖШмтт liaitl * -
1# * т т €Шф__
Шщ - - - шщщ
*1,
w^Z - О
*
. Г!«
•?
:i'‘
I
!
¦
.
Л € •'
'*• Ч»
Рис. 4.5. Электронная микрофотография тонкого среза, проходящего через кристалл SFV, вдоль оси 2-го порядка (100) [126]. А. Плоскость среза проходит через центр частиц. В. Наклонный срез через два последовательных слоя частиц, плотно упакованных в кубической решетке. Обратите внимание, что последующий слой сдвинут по отношению к предыдущему на >/2 периода решетки. В. Схематическое изображение кубической плотно упакованной структуры, на котором представлены плоскости (100) (вверху) и смещение последовательных слоев на '/г периода ячейки (сплошные и открытые кружки). Анализ кристаллов SFV показывает, что препараты содержат гомогенные частицы, окруженные липидными мембранами с регулярной поверхностной структурой,, обеспечивающей образование специфических контактов, необходимых для кристаллизации.
Оболочки вируса гриппа С
При электронно-микроскопическом исследовании оболочек вирусов, более крупных и сложных, чем вирус Синдбис, SFV и вирус Уукуниеми, в большинстве случаев не обнаруживается четко упорядоченной поверхностной структуры. Однако вирус гриппа С обладает правильной, открытой гексагональной структурой, образуемой поверхностными гликопротеинами [49, 119] (рис. 4.7). Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что этот вирус содержит только один гликопротеин — гемагглютинин, а
