Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Филдс Б.Н. -> "Вирусология: В 3-х т. Том 1 " -> 37

Вирусология: В 3-х т. Том 1 - Филдс Б.Н.

Филдс Б.Н., Найп Д.М., Мэрфи Ф.А., Харрисон С. Вирусология: В 3-х т. Том 1 — М.: Мир, 1989. — 492 c.
ISBN 5-03-000283-9
Скачать (прямая ссылка): virusologiyat11989.djvu
Предыдущая << 1 .. 31 32 33 34 35 36 < 37 > 38 39 40 41 42 43 .. 224 >> Следующая

Рис. 4.16. А. Схематическое изображение а-углеродного скелета гемагглютинина вируса гриппа Х31 (1968) и некоторые аминокислоты, расположенные в связывающем центре (кармане) рецептора сиаловой кислоты и вблизи него. Б. Детальное расположение остатков, представленных на рис. А, в проекции сверху. Leu-226 выступает в полость кармана вблизи центрального остатка Туг-98. Структура, представленная иа рисунке, связывает NeuAca2-6Gal, а замена Leu-226 на Glu приводит к специфическому связыванию NeuAca2-3Gal.
дикого типа (A/Aichi/68), у которого в положении 226 находился лейцин, связывался преимущественно с NeuAca2-6Gal, в то время как вариант с Glu-226 специфически связывался с последовательностью NeuAca2-3Gal. Вариант, содержащий в положении 226 метионин, обладал промежуточными свойствами.
Для детального выяснения структурной основы различий в связывании необходимо исследовать кристаллы, содержащие аналоги рецепторов.
Фузионная активность и проникновение вируса в клетку
Геном вируса с оболочкой отделен от цитоплазмы клетки-мишени двумя липидными мембранами — вирусной и клеточной. Для преодоления этих барьеров вирусы с оболочкой использую г мембранный гликопротеин, обладающий способностью вызывать слияние мембран.
Вирус Сендай
Белок F вируса Сендай, вызывающий слияние мембран, сна’ тезируется в виде неактивного предшественника F0, активирующегося в результате расщепления на два фрагмента — F1 и F2 [51, 84]. Расщепление сопровождается конформационными изменениями, приводящими к увеличению гидрофобности гликопротеина [53]. Необходимость протеолитической активации может ограничить круг хозяев вируса только такими тканями, в которых содержатся соответствующие протеазы [85]. Подавление слияния мембран с помощью синтетических пептидов, имеющих сходную с гидрофобным N-концом белка F1 последовательность аминокислот (см. ниже), свидетельствует об активности этого участка [78]. Белок вируса Сендай, вызывающий слияние мембран, отличается от соответствующих белков вирусов других :емейств тем, что он активен во внеклеточной среде; он вызывает слияние клеток, ведущее к образованию синцития.
Эндоцитоз и проникновение вирусов в клетку
Фузионная активность большинства вирусов с оболочкой осу-дествляется не на клеточной поверхности. После связывания с юверхностными рецепторами клетки вирус гриппа, VSV, SFV и другие вирусы захватываются с помощью рецепторного эндоци-гоза в эндосомные везикулы (эндосомы) [44, 66, 68, 69]. При >том нуклеиновая кислота вируса все еще остается отделенной >т цитоплазмы двумя мембранами — вирусной и эндосомной. ^ак показывают результаты исследования ряда вирусов, понижение pH эндосом инициирует вызываемое вирусом слияние мемб-
Рис. 4.17. Проникновение вируса в клетку [91]. Некоторые юирусы с оболочкой
проникают в клетку путем эндоцитоза в покрытых клат.рином везикулах. Затем везикулы теряют свою клатрииовую оболочку и сливаются с крупными везикулами — эидосомами. При низких pH в эидосомиых везикулах происходит слияние мембран, опосредованное вирусным глико-протеином; в результате вирусная и эндосомная мембраны сливаются и в цитоллазму высвобождается вирусный нуклеокапсид.
ран (вирусной и эндосомной), в результате чего вирусный геном оказывается в цитоплазме (рис. 4.17) {124]. Выделен компонент, который, возможно, выполняет функции эндосомного протонного насоса, снижающего pH [31, 98]. Слияние на клеточной поверхности можно вызвать in vitro путем искусственного снижения pH внеклеточной среды. Таким образом удалось определить оптимальное значение pH для слияния мембран целого ряда вирусов. Для SFV оно оказалось равным 6,0; для VSV — 6,1; для разных штаммов вируса гриппа — от 5,0 до 5,5 [64, 123, 125]. Определение оптимального pH слияния требует очень точного титрования.
Фузионная активность вируса гриппа
Представление о том, что гемагглютинин вируса гриппа это единственный белок, необходимый для слияния, получило окончательное подтверждение в опытах по молекулярному клонированию и экспрессии гена НА в культуре клеток почек обезьян [35]. Такие клетки, содержащие на поверхности НА вируса гриппа, при обработке буферным раствором с pH 5,0 сливались в поликарионы [121]. Для проявления фузионной активности НА, а следовательно, его способности обеспечивать инфекционность вируса необходимо, чтобы белок-предшественник НАО расщепился на НА1 и НА2 [53а, 55, 125]. N-концевая последователь-
\
ность НА2 (рис. 4.11), называемая фузионным пептидом или пептидом слияния, является самым длинным в этой молекуле сегментом, состоящим из консервативных остатков, а также наиболее гидрофобным после сигнального пептида и С-концевого якорного участка [93]. Первые предположения о роли этого участка в процессе слияния мембран были высказаны после обнаружения его гомологии с аналогичным участком молекулы белка F вируса Сендай [36]. На рис. 4.18 приведены аминокис-
1 2 3 4 5 * 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23
А/АКЯ1/2/68 O.Y LEU РНЕ GLY ALA ILE ALA GLY ERE ILE GLU ASN GLY TOP GLU GLY MET ILE ASP GLY TO TiR GLY
Предыдущая << 1 .. 31 32 33 34 35 36 < 37 > 38 39 40 41 42 43 .. 224 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed