Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
самок.
Действительно ли этот дефект обучаемости-результат отсутствия
фосфодиэстеразы сАМР или же просто соответствующие гены тесно связаны?
Дальнейшие эксперименты показали, что у dunce-мутантов уровень сАМР в 1,6
раза выше, чем у нормальных мух. Кроме того, при центрифугировании
гомогенатов нормальных мух и dunce-мутантов в градиенте сахарозы
оказалось, что фосфодиэстераза сАМР в норме дает два пика, один из
которых отсутствует у й?иисе-мутантов (рис.
12-11).
А. Почему у dunce-мутантов уровень сАМР выше, чем у нормальных мух?
Б. Объясните, почему гомозиготные (дефект в обеих хромосомах)
дупликации немутировавшего гена dunce вызывают увеличение содержания
фосфодиэстеразы сАМР в 1,5 раза и почему гомо-
232 Глава 12
зиготные делеции этого гена приводят к уменьшению активности
фермента наполовину по сравнению с нормой?
В. Предскажите действие кофеина, ингибитора фосфодиэстеразы, на
способность к обучению у нормальных мух.
Г. Доказывают ли эти эксперименты, что ген dunce являете структурным
геном фосфодиэстеразы сАМР? Если нет, то как еще можно их истолковать?
Адаптация клеток-мишеней (МБК 12.5)
12-26 Заполните пропуски в следующих утверждениях.
A. Клетки обратимо регулируют свою чувствительность к стимулу
за счет процесса, называемого .
Б. Опосредуемый рецепторами эндоцитоз лигандов часто сопряжен с
уменьшением общего числа рецепторов клеточной поверхности, что связано с
их ускоренной деградацией; этот механизм известен как_______________.
B. Когда рецепторы в присутствии лиганда интернализуются, но
не разрушаются, клетки становятся менее чувствительными к
добавленному лиганду; этот процесс называется____________
Г. У бактерий информация о присутствии во внешней среде ат-трактантов
и репеллентов передается через мембрану с помощью _______________четырех
типов.
12-27 Укажите, какие из следующих утверждений правильные, а какие-нет.
Если утверждение неверно, объясните почему.
___А. Большинство рецепторов, подвергшихся эндоцитозу, доставляют
свои лиганды в лизосомы, где те подвергаются деградации, а сами вновь
возвращаются в мембрану (рециклизуются).
___Б. Продолжительное действие на клетку какого-либо стимула
вызывает потерю чувствительности к данному стимулу.
___В. Продолжительная инкубация фибробластов с простагландином
Ej (PGE,) вызывает у них десенситизацию и к другим агентам,
действующим через Gj-белок. Это явление называется гомологичной
десенситизацией, поскольку оно имеет отношение к общему белку (Gs);
___Г. Наркоманам для обезболивания требуются более высокие дозы
морфина, чем обычным людям, потому что у них утрачены
функциональные Grбелки, а не в результате регуляции путем уменьшения
количества рецепторов.
___Д. Устройство жгутиков у Е. coli и S. typhimurium таково, что
клетки двигаются по прямой, когда их жгутики вращаются против
часовой стрелки, и начинают беспорядочно кувыркаться при вращении
жгутиков по часовой стрелке.
___Е. Если концентрация аттрактанта остается постоянной, бактерии
продолжают двигаться по прямой.
___Ж. Хемотаксические рецепторы, активированные связанными лигандами,
могут метилироваться, следствием чего будут их инактивация и увеличение
частоты кувырканий клеток.
12-28 После продолжительной инкубации с гормонами, которые связываются с
Р-адренергическими рецепторами, клетки становятся рефрактерными и
перестают реагировать на сигнал. Для изучения этого явления
десенситизации вы используете новое вещество-CGP-12177, представляющее
собой гидрофильную молекулу, специфически связывающуюся с p-
адренорецептора-
Межклеточная сигнализация 233
Время, мин
. 12-12. Активность аденилат-азы, связывание 3H-CGP-12177 связывание 3Н-
дигидроальпре-олола в разные моменты времени ле добавления к клеткам изо-
теренола (задача 12-28). Все личины выражены в процентах от ачения в
нулевой момент мени.
с. 12-13. Связывание лигандов .экстрактах обработанных и не-работанных
изопротеренолом ок по данным центрифугирова-в градиенте плотности саха-зы
(задача 12-28).
ми. В отличие от связывания гидрофобного соединения ди-
гидроальпренолола динамика связывания CGP-12177 в точности соответствует
уменьшению гормон-зависимой активности аденилатциклазы, наблюдаемому при
возрастании времени воздействия изопротеренола на клетки (рис. 12-12).
Чтобы понять различие в связывании рецепторов с молекулами этих двух
соединений, вы лизируете необработанные и обработанные изопротеренолом
клетки, фракционируете их, центрифугируя в градиенте плотности сахарозы,
и измеряете связывание диги-дроальпренолола и CGP-12177 (рис. 12-13).
Кроме связывания лигандов вы измеряете также активность маркера
плазматических мембран - 5'-нуклеотидазы.
А. Объясните различия в связывании дигидроальпренолола и CGP-12177.
Б. Как вы думаете, что может лежать в основе десенситизации,
