Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
когда тимидин удаляют во второй раз?
Б. Объясните, почему такая периодичность добавления и отмывания избытка
тимидина позволяет синхронизировать клеточную популяцию?
13-6 Чем определяется длительность фазы S? Возможно, она зависит от
количества содержащейся в ядре ДНК. Для проверки этого предположения вы
измеряете длительность фазы S у ящерицы, лягушки и тритона, у которых
содержание ДНК в клетках различно. Как показано в табл. 13-1,
длительность фазы S возрастает с увеличением содержания ДНК.
Эти организмы сходны в том, что они холоднокровные. Однако это
разные виды. Вы вспоминаете, что у лягушек можно
240 Глава 13
Рис. 13-3. Созревание ооцитов, индуцированное прогестероном и MPF (задача
13-7).
Таблица 13-1. Корреляция между продолжительностью фазы S и содержания ДНК
(задача 13-6)
Организм Количество ДНК в ядре, Продолжительность фазы
hi S, ч
Ящерица 3,2 15
Лягушка 15 26
Тритон 45 41
получать гаплоидные зародыши, и повторяете свои измерения
гаплоидных и диплоидных клетках. Оказывается, что по продолжительности S-
фазы гаплоидные клетки лягушки не отличаются я диплоидных. В литературе
вы находите аналогичные данные да растений: тетраплоидные линии фасоли и
овса имеют такую я продолжительность фазы S, что и их дальние диплоидные
рсдо вен ники.
Попробуйте объяснить эти на первый взгляд противоречат(r) один
другому результаты. Почему при сравнении разных вида продолжительность
фазы возрастает с увеличением содержант ДНК, а при увеличении содержания
ДНК в пределах одного i этот параметр не изменяется?
13-7 Ооциты лягушек созревают при инкубации с прогестероном. Эк
созревание сопровождается растворением ядра (так называемы! разрывом
зародышевого пузырька) и образованием мейотичеш го веретена. Такое же
действие, как и прогестерон, оказывая микроинъекция 50 нл цитоплазмы
зрелого яйца в свежий оощп (объемом 1000 нл), который после этого
нормально созревает (ри 13-3). В контрольном эксперименте с введением
цитоплазмы необработанных ооцитов в другие ооциты созревания, как и о"
далось, не наблюдается. Содержащийся в цитоплазме яйца фа* тор,
ответственный за созревание, носит название MPF (matura tion-or М-phase-
promoting factor); по-видимому, это белковьл комплекс.
Для созревания, индуцированного прогестероном, необходв синтез
белка, на что указывает чувствительность процесса к циш гексимиду, а в
случае созревания под действием MPF это не та* Помещая ооциты,
обработанные прогестероном, через разни промежутки времени после
стимуляции в раствор с циклогексим дом, можно обнаружить, что созревание
перестает зависеть oi циклогексимида (больше не ингибируется им) за
несколько час"
Зародышевый Мейотическое
пузырек метафазное
Прогестерон
Ооцит |
1000 нл
веретено /
Яйцо
Перенос 50 нл
Свежий ооцит
U-
Рост и деление клеток 241
до того, как ооциты превращаются в яйца. Кроме того, момент времени,
когда ооциты становятся нечувствительными к действию циклогексимида,
совпадает с моментом появления активности MPF.
Чувствителен ли сам синтез MPF к действию циклогексимида? Чтобы
проверить такую возможность, вы последовательно переносите MPF из яиц в
ооциты и проверяете, уменьшается ли его активность с разбавлением.
Сначала вы инъецируете 50 нл цитоплазмы йз активированного яйца в
незрелый ооцит; когда ооцит созревает в яйцо, вы переносите 50 нл его
цитоплазмы в другой незрелый ооцит и т.д. К своему удивлению, вы раз за
разом получаете эффект, повторяя эту процедуру по крайней мере 10 раз,
даже если ооциты-реципиенты купаются в циклогексимиде! Более того,
проявляемая активность MPF в последнем яйце точно такая же, что и в
первом.
A. Какой коэффициент разбавления вы получаете после 10 переносов по 50
нл в 1000 нл? Считаете ли вы, что биологическое действие соединения может
не снижаться при таком падении концентрации?
Б. Как может активность MPF, обусловленная отсутствующим в незрелых
ооцитах белком, появляться в активированных яйцах, если белковый синтез
блокирован циклогексимидом?
B. Предложите механизм, за счет которого активность MPF могла бы
сохраняться при повторных серийных переносах.
Г. Какую роль должен играть циклогексимид-чувствительный фактор,
необходимый для появления активности MPF в ооцитах, стимулированных
прогестероном?
Дрожжи как модельная система (МБК 13.2)
13-8 Заполните пропуски в следующих утверждениях.
А. Микроорганизм Saccharomyces cerevisiae относится к____________.
Б. Микроорганизм Schizosaccharomyces pombe относится к
В. Температурочувствительные мутанты не растут при________________
