Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Аппельт Г. -> "Введение в методы микроскопического исследования" -> 51

Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.

Аппельт Г. Введение в методы микроскопического исследования — МЕДГИЗ, 1959. — 429 c.
Скачать (прямая ссылка): vvedenievmetodimikro1959.djv
Предыдущая << 1 .. 45 46 47 48 49 50 < 51 > 52 53 54 55 56 57 .. 120 >> Следующая

Теперь мы подходим к области, которая большинству моих читателей мало знакома и которая сегодня находится несколько в забвении.
Оптические фирмы больше не производят конденсоров для освещения контрастирующими цветами. Но тем не менее этот метод приносит любителям большое удовольствие.
Речь здесь идет о методе, который позволяет путем применения особого способа освещения представить неокрашенные препараты цветными, а именно на цветном фоне, цвет которого контрастирует с цветом препарата.
В литературе этот метод часто называется оптической окраской. Например, неокрашенные бактерии выглядят красными на голубом фоне.
Достоинства этого метода состоят :
1) в использовании способности нашего глаза лучше воспринимать цветовые различия, чем различия яркостей;
2) в том, что благодаря цветовому контрасту становятся видимыми такие мелкие детали объекта, которые прежде были плохо различимы.
Освещение по методу цветовых контрастов применимо и в падающем, и в проходящем свете.
Различают ряд разнообразных методов, при помощи которых можно провести оптическую окраску.
Прежде всего должны быть описаны методы для проходящего света.
10.2. МЕТОД ТЕМНОГО ПОЛЯ
Темное поле возникает тогда, когда область апертуры объектива заслоняется с помощью центральной диафрагмы в конденсоре.
Так как конденсор имеет более высокую апертуру, чем объектив, то объект освещается лишь боковыми (краевыми) лучами света, которые непосредственно в объектив не могут попасть.
Объект в препарате виден в этом случае яркосветя-щимся на черном фоне (см. главу 6, раздел 6.1).
Если вместо центральной диафрагмы конденсора применить цветной стеклянный или целлулоидный фильтр, то возникает не темное, а цветное поле.
Если при этом вместо белого краевого света, используемого при освещении по методу темного поля, употребляют цветной свет, который контрастирует с цветом цен-
il = з = у
Рис. 187. Расположение цветных фильтров в пбперечном сечении конденсора при освещении контрастирующими цветами (метод темного поля).
1 — периферийный фильтр;
2 — центральный фильтр;
3 — красный цвет; 4 — си-
ний цвет.
Рис. 1в8. Принцип освещения контрастирующими цветами по методу темного поля (схематически).
1 — объектив; 2 — объект;
3 — конус цветного света;
4 — красный фильтр; б — синий фильтр; 6 — лучи
света.
трального фильтра, то объект выявляется в цвете краевого фильтра в цветном поле центрального фильтра. Цвета должны отделяться друг от друга, однако они не обязательно должны быть дополнительными.
Комбинации цветов совершенно произвольны, однако для центрального фильтра необходимо выбирать более темные цвета, чем для периферийного фильтра.
Объект пронизывается лучами света, прошедшего центральный фильтр, и освещается с боков светом, прошедшим периферийный фильтр.
Однако площадь, занимаемая периферийным фильтром в плоскости конденсора, значительно больше, чем площадь центрального фильтра. Следовательно, объект получает от периферийного фильтра более интенсивное освещение, чем от центрального, и поэтому имеет окраску периферийного фильтра.
Рис. 186. Эритроциты (мазок крови), оптически окрашенные с помощью микрополихромара (по рисунку Народного предприятия Карл Цейсс в Йене).
л
Рис. 192. Устройство микрополихромара Народного предприятия Карл Цейсс в Йене. Наверху изображение оптически окрашенного микроскопического объекта.
Метод темного поля пригоден лишь для объективов небольшого увеличения с апертурой до 0,70.
Объективы более высокой апертуры должны быть за-диафрагмированы с помощью диафрагмы объектива до
Рис. 189. Темная зона в поперечном сечении конденсора.
1 — наружный край темной зоны; 2 — апертурная граница между периферийным и центральным фильтрами;
3 — внутренний край темной зоны.
Рис. 190. Многоцветный периферийный фильтр в поперечном сечении конденсора.!)
1—3 — красный цвет; 2—4 — синий цвет.
i
Рис. 191. Окраска решетчатых структур при применении многоцветного периферийного фильтра.
1 — естественный внд решетки; 2 — изображение, оптически окрашенное; 3 — синие линии; 4 — красные линии.
более низкой апертуры. Чем выше апертура употребляемого объектива, тем больше должна быть площадь, занимаемая центральным фильтром.
При апертуре выше 0,70 она становится так велика, что в поперечном сечении конденсора не остается необходимой площади для периферийного фильтра. Описанное выше соотношение интенсивностей света изменяется в пользу центрального фильтра. Объект виден частично также в его цвете, и эффекта контраста не получается.
При работе с объективами с апертурой 0,50 и выше нужно применять иммерсию конденсора. Тогда будут использованы краевые лучи осветительной апертуры выше 1,0. Апертурную диафрагму конденсора, осветительная апертура которого должна быть выше 1,0, при таких исследованиях полностью открывают. Конденсор употребляют всегда полностью. Фронтальную линзу нельзя отвинчивать, в противном случае осветительная апертура конденсора будет слишком мала. Между центральным и периферийным фильтрами должна быть затемненная зона. В противном случае нужна тщательная центрировка центрального фильтра, сходная с проводимой при кардиоид-конденсоре темного поля (см. главу 6, разделы 6.2 и 6.3), чтобы не смешать действие внутреннего края периферийного фильтра и наружного края центрального фильтра.
Предыдущая << 1 .. 45 46 47 48 49 50 < 51 > 52 53 54 55 56 57 .. 120 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed