Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.
Скачать (прямая ссылка):
Особой формой освещения контрастирующими цветами в проходящем свете является метод дополнительных цветов.
1. Метод с центральным и периферийным
фильтрами
В разделе 10.2 указывалось, что интенсивность света, идущего от периферийного фильтра, должна быть значительно больше, чем от центрального фильтра.
Если медленно закрывать ирисовую диафрагму конденсора, то будет уменьшаться количество периферийного света.
В конце концов можно добиться того, чтобы сила периферийного света уравнялась с центральным освещением.
Если для светофильтров употребляются дополнительные цвета, то при таком освещении препарата они смешиваются в белый цвет. Этот метод дает наилучшие результаты при применении красного и зеленого цветов. При других комбинациях дополнительных цветов он менее эффективен.
Частицы объекта поглощают и отражают различное количество света от обоих дополнительных цветов. Поэтому соотношение красного и зеленого в объектах не всегда будет равно 1:1. Контуры объектов при этом видны в различных комбинациях дополнительных цветов.
Отдельные различия структур становятся хорошо видимыми. Этот способ в противоположность освещению контрастирующими цветами по методу темного поля применим преимущественно лишь с сильными сухими системами (А 0,65).
Наблюдения с незначительными увеличениями нерациональны, так как объект столь мало увеличивается, что мелкие детали в препарате остаются невидимыми.
2. Метод цветных по л уд и сков
Этот метод проще, но хуже, так как переливы цветов в структурах препарата слабее, чем при первом методе.
В держатель диафрагмы кладут два цветных полудиска так, чтобы каждый покрыл лишь одну половину площади держателя диафрагмы. Это должны быть дополнительные Цвета, как, например, красный и зеленый, которые выглядят примерно одинаково яркими. Тогда препарат освещается наполовину красными, наполовину зелеными лучами. Фильтры могут быть изготовлены из оптического окрашенного стекла, а также и по вспомогательному методу, описанному в разделе 10.2.
Поскольку, однако, объекты имеют соотношения преломления и поглощения света иные, чем окружающая среда, то свет в них не смешивается в белый; возникают комбинации красного и зеленого. Основным при этом освещении является примерно одинаковая яркость дополнительных цветов.
Употребление синего и желтого цветов нерационально, так как синий цвет доминировал бы в окраске поля зрения. Метод цветных полудисков пригоден для всех объективов и увеличений.
При этом применяются правила установки освещения по методу светлого поля в проходящем свете.
10.4. ОСВЕЩЕНИЕ КОНТРАСТИРУЮЩИМИ ЦВЕТАМИ ПАДАЮЩИМ СВЕТОМ
Для этого используется преимущественно освещение по методу темного поля.
В качестве объектов пригодны неокрашенные текстильные препараты, кристаллы и объекты, имеющие петли или*«промежутки. Наружные поверхности металлов для этого непригодны. Освещение контрастирующими цветами можно получить различным образом.
"с
1. С несколькими осветителями
Это обычный и лучший метод. Для этой цели отверстие на столике микроскопа необходимо заполнить подходящей плоской стеклянной пластинкой. На нее помещают исследуемый объект.
Рис. 197. Цветные половины дисков (схематически).
1 —¦ красный цвет;
2 — зеленый цвет.
— /
I
Рис. 198. Освещение контрастирующими цветами падающего света от эпиосветителя и проходящего света от зеркала микроскопа.
1 — лучи красного света: 2 — лучи
синего света.
Рис. 199. Освещение контрастирующими цветами падающего света от 2 эпиосветителей и проходящего света от зеркала микроскопа.
1 — лучи красного света; 2 — лучи синего света.
Цветное поле, на котором лежит препарат, возникает при освещении снизу с помощью зеркала микроскопа. Для этого употребляют обычные осветители к микроскопу с установленным цветным фильтром. Освещение препарата по методу темного поля односторонне падающим светом производится с помощью эпиосветителя, с разнообразными конструкциями которых мы познакомились в разделе 7.5 главы 7.
Путь лучей также проходит через цветной фильтр, цвет которого противоположен окраске света, идущего снизу. Некоторые трудности составляет при этом способе освещения регулировка силы света обоих источников, так как эпиосветитель должен давать такой яркий свет, чтобы исключить возможность окраски препарата осветителем микроскопа. В противном случае объект будет иметь ту же окраску, что и поле зрения.
Дальнейшие трудности возникают из-за азимутального эффекта. Если в распоряжении есть второй осветитель, то этого можно избежать. Его ставят под прямым углом к первому эпиосветителю. Цветной фильтр у него должен быть такой же, как и в первом эпиосветителе. Когда цветные фильтры обоих эпиосветителей, установленных под прямым углом друг к другу, различны, например синий и красный, то достигается тот же эффект, что и при употреблении различно окрашенных кольцевых фильтров при освещении контрастирующими цветами в проходящем свете (метод темного поля).