Аффинная хроматография - Аберкромби Д.
ISBN 5-03-000480-7
Скачать (прямая ссылка):
271
Эпихлорогидрин 14, 22, 98, 187, 249
Эпоксиактивированная сефароза 6В 35
Эпоксидактивированная сефароза 52 Эритроциты 255
Эстрадиол-6-карбоксиметилоксим-
БСА, получение 65 Этантиол 62 Этиленгликоль 112 Этилендиамин 79
Эупергит С 16, 33 реакции с амино-АФБК 172
---белком 34, 75, 135
--гемоглобином 138
-- гепарином 151
-- липазой 137
-- меркаптанами 34
— — пепсином 137
-- рибонуклеазой 137
-- трипсином 136
ЭЭДХ 151, 250
ОГЛАВЛЕНИЕ
От переводчика............... 5
Предисловие ................ 7
Авторы.................. 9
Принятые сокращения.......t...... 10
Основы техники безопасности........... IO
Глава 1. Получение матриц и их применение 11
1. Введение............... 11
2. Агароза................ 11
2.1. Структура агарозы............ 12
2.2. Получение поперечно-сшитой агарозы...... 14
2.3. Получение агарозных шариков........ 15
2.4. Методика получения агарозных шариков..... 17
2.5. Свойства суперозы 6В, агарозного геля для высокоэффективной аффинной хроматографии......... 18
2.6. Магнитная агароза (магногель)........ 19
3. Целлюлоза............... 19
3.1. Сферическая целлюлоза. Введение....... 19
3.2. Получение сферической целлюлозы....... 19
3.3. Свойства сферической целлюлозы........ 20
4. Декстран............... 22
5. Полиакриламид.............. 22
6. Трисакрил............... 24
6.1. Получение трисакрилового полимера в форме шариков . 27
6.2. Введение аминогрупп на шарики трисакрила (трисакрил-ЫН2) 27
7. Гидроксиалкилметакрилатные гели........ 28
8. Полиакриламид-агарозные гели......... 29
9. Иммобилизация ферментов на трубках из поливинилацетатэти-
лена................. 29
9.1. Введение.............. 29
9.2. Методы получения реакционноспособных трубок из поливи-нилацетатэтилена............ 30
9.3. Иммобилизация ферментов на поверхности активированных трубок............... 32
10. Эупергит С............... 33
10.1. Реакции эупергита с белком......... 34
10.2. Образование производных эупергита С с низкомолекулярными соединениями........... 34
11. Гранулированный пористый оксид алюминия..... 37
11.1. Введение.............. 37
Оглавление 273
11.2. Получение иммобилизованных смесей (общая методика) 38
11.3. Результаты и обсуждение......... 38
12. Стекло с контролируемым размером пор....... 41
13. Диолсвязанный силикагель........... 42
13.1. Введение.............. 42
13.2. Материалы ............. 43
13.3. Методы.............. 43
13.4. Обсуждение............. 44
13.5. Определение содержания диола в диолсвязанном силикагеле методом периодатного окисления....... 44
Литература............... 4
Глава 2. Методы активации.........48
1. Бромоциан............... 48
1.1. Присоединение вставок к матрицам....... 48
1.2. Метод активации с титрованием........ 49
1.3. Стадия присоединения........... 50
1.4. Другой метод активации.......... 51
2. Методы, основанные на активации оксиранами..... 52
2.1. Введение.............. 52
2.2. Оксирановая активация агарозы........ 53
3. Гидроксисукциниламидосукцинил-агароза....... 55
3.1. Аминирование эпоксиактивированной агарозы до амино-ага-розы............... 55
3.2. Получение N-гидроксисукцинимидного эфира агарозы . . 55
3.3. Активация сукциниламино-агарозы N-гидроксисукцинимидом 56
3.4. Присоединение гемагглютинина из Lens culinaris к активированной агарозе............. 56
4. Триазиновая активация агарозы......... 56
4.1. Замечания.............. 57
4.2. Присоединение этилендиамина или алифатического диамина
к триазинактивированной агарозе ....... 57
4.3. Триазиновая активация фильтровальной бумаги . . . 58
4.4. Присоединение л-аминофенилборной кислоты к триазинактивированной бумаге............ 58
5. Активация агарозы 2,4,6-трифторо-5-хлоропиримидином ... 58
5.1. Методические указания.......... 58
5.2. Присоединение гексаметилендиамина к ФХП-агарозе . . 61
5.3. Присоединение анилина к ФХП-агарозе...... 61
5.4. Присоединение имидазола к ФХП-агарозе..... 62
5.5. Присоединение этантиола к ФХП-агарозе..... 62
5.6. Присоединение глицилглицина/я-аминобензамидина к ФХП-агарозе (биоспецифический адсорбент для трипсина) , . 62
6. Карбонилдиимидазольная активация........ 63
6.1. Активация сефарозы CL 6В карбонилдиимидазолом . . 63
6.2. Присоединение лигандов к активированным матрицам . . 63
6.3. Рекомендованный метод для применения коммерчески до-
ступной КДИ-активированной агарозы...... 64
7. Активация с использованием метода смешанных ангидридов 65
7.1. Получение 17р-эстрадиол-6-(0-карбоксиметнл)оксима — БСА 65
7.2. Получение изохлорокарбонатактивированных матриц . . 65
8. Периодатное окисление........... 66
8.1. Получение аминогексил-агарозы........ 66
8.2. Периодатная активация целлюлозы....... 67
8.3. Получение иммуноадсорбентов с очень низким неспецифическим связыванием с использованием окисленной периодатом поперечно-сшитой сефарозы......... 67
274
Оглавление
8.4. Присоединение антител и антигенов к окисленной с помощью
