Методы культивирования клеток - Вахтин Ю.Б.
Скачать (прямая ссылка):
После извлечения корзин с посудой жидкость из них сливается в ванну, остатки жидкости удаляются путем помещения в аналогичные ванны, но заполненные водой, которая автоматически заменяется при помощи сифонного устройства через определенное время. При скорости слива до 10 л/мин смена воды в сосуде емкостью 200 л происходит 1—2 раза в час.
Посуда, очищенная от остатков замачивающего раствора, подвергается мойке, как правило, включающей в себя следующие обязательные операции: предварительное полоскание холодной
или слегка нагретой (до 30—40 °С) водой; мытье горячим (до 96 °С) водным раствором детергента; второе полоскание горячей или теплой водой; финишное полоскание дистиллированной или общелабораторной водой. Необходимо заметить, что выбор температуры воды зависит от термостойкости обрабатываемой посуды и ее способности выдерживать «тепловой удар», т. е. резкий перепад температур при охлаждении или нагреве.
Оптимальным является использование для мытья автоматических
моечных машин различной производительности, выпускаемых рядом фирм («Gilowy», «Netzsch», «Forma Scientific», «Miele», «Hotpack-Heinicke»).
Аналогичная машина типа РЗ-АММ, разработанная в СССР, обеспечивает выполнение следующих технологических операций: предварительное полоскание холодной водой, мойку водным раствором детергента с температурой до 90 °С, повторное полоскание холодной или горячей водой, финишное полоскание дистиллированной водой. Длительность каждой операции выбирается в диапазоне от 1 до 15 мин (в зависимости от степени загрязненности посуды или требований к качеству помывки). Машина может работать в автоматическом и ручном режимах. В первом случае машина сама переходит от одной технологической операции к другой. Длительность операций, установленная заранее, выдерживается также автоматически. В ручном режиме длительность операций и переход от одной операции к другой контролируются и управляются оператором. Оптимальная длительность обработки посуды (полного цикла) примерно 15 мин, из которых финишное полоскание длится
1 мин. Техническая производительность машины в час: чашки ЧБН (Петри) диаметром 100 мм — до 200, колбы емкостью 250 мл — до 100, пробирки диаметром 14 мм — до 2000, пипетки мерные — до 12 600.
Посуда перед мойкой загружается в специальные корзины различной конфигурации, входящие в комплект поставки машины. Тип корзин определяется видом посуды (пипетки, чашки ЧБН и т. п.).
Нагрев водного раствора детергента происходит непосредственно в машине. Температура нагрева задается оператором и поддерживается автоматически. Имеется система аварийной защиты и сигнализации при перегреве или отсутствии раствора.
Дистиллированная горячая и холодная вода подается от внешних источников, обеспечивающих давление на входе в машину для дистиллированной воды не менее 0.5 кг/см2; для холодной и горячей —
4.5 кг/см2. Машина потребляет 30—40 л/мин по каждому виду воды.
Габариты машины РЗ-АММ 1090X660X1040 мм. В рабочем положении машина устанавливается на специальную подставку, входящую в комплект РЗ-АММ. Удобство загрузки и разгрузки машины дополнительно обеспечивается подкатным столиком, также прилагаемым к ней. Масса РЗ-АММ (без подставки и столика) 150 кг, электропитание от сети трехфазного переменного тока 220/380 В, потребляемая мощность— 14 кВА.
В качестве детергента могут использоваться продукты, производимые в СССР (например, тринатрийфосфат). Важно, чтобы они обеспечивали наименьшее количество пены. Необходимо следить за полным растворением детергента в баке машины и очищать от механических примесей подводимую к машине горячую и холодную воду.
После окончания мойки посуда должна быть высушена. Наиболее эффективно этот процесс происходит в сушильных шкафах с принудительной продувкой горячим воздухом.
Сушильные шкафы, выпускаемые в СССР, имеют рабочий объем от 40 до 640 л. Температура сушки задается и автоматически поддерживается в диапазоне от 40 до 120 °С. В современных сушильных шкафах для лабораторной посуды заданная температура поддерживается с точностью до ±3 °С, имеются задатчики времени сушки и системы сигнализации об окончании процесса сушки и аварийной защиты от перегрева. Воздух в полезном объеме сушильного шкафа может рециркулировать или сообщаться с внешней средой. В последнем случае подача воздуха происходит через фильтр.
После сушки посуда готовится к финишной стерилизации: закупоривается ватно-марлевыми пробками, заворачивается в бумагу крафт, алюминиевую фольгу или помещается в специальные металлические контейнеры, что необходимо для обеспечения минимального повторного загрязнения внутренних полостей посуды при ее выемке из финишного стерилизатора. Для укупорки рекомендуется использовать фольгу пищевую гладкую мягкую из алюминия А5 (ГОСТ 745-79) толщиной 0.014 мм, которая поставляется в рулонах шириной от 54 до 420 мм. Учитывая значительную массу рулонов, рекомендуется размещать их на специальных штативах, обеспечивающих надежное крепление и свободное вращение рулона.
