Методы культивирования клеток - Вахтин Ю.Б.
Скачать (прямая ссылка):
Финишная стерилизация посуды производится в паровых (описаны выше) или воздушных стерилизаторах. Последние изготовляются в СССР по ГОСТ 22649-83 с полезным объемом стерилизационной камеры от 1 до 1300 л. В работах с клеточными культурами целесообразно использовать электрические воздушные стерилизаторы с горизонтальной прямоугольной стерилизационной камерой. Общепринятой стандартной температурой стерилизации является 180cCdz1Q°C. В отдельных случаях допускается производить стерилизацию при температурах 85, 120 или 160 °С. Для уменьшения перепада температуры по полезному объему воздух в стерилизаторе принудительно циркулирует от встроенных в прибор вентиляторов. Современные воздушные стерилизаторы имеют цифровую индикацию текущей температуры в полезном объеме, систему автоматической блокировки дверей, исключающую как повреждение посуды от теплового удара, так и ожоги обслуживающего персонала, обеспечивают возможность программирования и автоматического выполнения цикла стерилизации по времени и температуре и аварийную сигнализацию.
Приборы для дозирования, разведения и пробоотбора. В практике работ с клеточными культурами весьма часто возникает необходимость массового дозирования, пробоотбора или разведения биологически активных жидкостей. Величина единичной дозы в большинстве случаев лежит в диапазоне от 1 мкл до 10 мл. Предъявляются также весьма жесткие требования к точности и воспроизводимости разовой дозы. Значительно облегчает введение этой технологической операции использование автоматических или полуавтоматических устройств, называемых в различных источниках дозаторы-дшноторы, автоматические пипетки и т. п.
Одним из технических требований к подобным приборам является отсутствие или минимизирование контакта дозируемого раствора с частями конструкции дозатора, что достигается использованием шприцевых дозаторов, перистальтических насосов-дозаторов или путем создания воздушного буфера между разливаемым веществом и активным элементом дозатора. Все части прибора, имеющие контакт (потенциальный или реальный) с дозируемым раствором, должны позволять их паровую или воздушную стерилизации. Очевидной является также необходимость обеспечения хороших эргономических параметров (малая масса, удобная форма рабочих органов и т. п.).
Перечисленные требования в основном удовлетворяются в серийно производимых в СССР приборах подобного назначения. Ниже приводится описание некоторых из них.
Полуавтоматический шприцевый дозатор «Дозатор ДВ» может быть установлен либо на горловине сосуда с разливаемой жидкостью, для чего имеет специальный узел крепления, либо на крышке укладочного ящика. В последнем случае подача дозируемого вещества производится по соединительной трубке, сочленяемой с заборным отверстием дозатора, имеющим специальный штуцер. На воздухозаборное отверстие прибора может быть помещен воздушный фильтр (в комплект поставки не входит). Собственно дозирующий элемент прибора представляет собой стеклянную трубку, в которой перемещается на определенное расстояние поршень из силиконовой резины. Дозатор позволяет паровую стерилизацию без разборки его на составные части. Прибор поставляется в комплекте, состоящем из трех дозаторов, обеспечивающих забор и выдачу единичных доз: от 0.4 до 2 мл (ДВ-2); от 1.0 до 5.0 мл (ДВ-5); от 2.0 до 10.0 мл (ДВ-10). Дискретность задания величины дозы равна 0.1 от величины нижнего значения диапазона дозирования. Например, для дозатора ДВ-2 это будет 0.04 мл. Основная приведенная погрешность дозирования 1 %, сходимость дозирования 0.5 %. Диаметр каждого дозатора не более 60 мм, длина 120 мм, масса не более 0.5 кг, при установке на укладочный ящик его габариты 60X115X210 мм. Приборы выпускаются по ТУ 25-0521.117-85. Код ОКП 42 1592 9880 01.
Автоматический шприцевый дозатор «Дозатрон-3» производит разведение или дозирование одновременно по двум каналам. Может работать как в автоматическом, так и в полуавтоматическом режимах. При работе в автоматическом режиме оператор устанавливает величину единичной дозы по каждому каналу, задает число последовательно выдаваемых доз (циклов дозирования). После подачи команды «пуск» прибор автоматически выполняет дозирование намеченное число раз. В полуавтоматическом режиме команда «пуск», подаваемая с пульта управления или от ножной педали, инициирует выдачу единичной дозы, после чего дозирование прекращается до получения следующей команды. Величина дозы поддерживается равной заданной. В зависимости от типа дозирующего элемента номинальные объемы единичной дозы могут быть
установлены: от 10 до 100 мкл; от 100 до 1000 мкл; от 1000 до 10 000 мкл. Все сменные дозирующие элементы входят в комплект поставки прибора. Величина единичной дозы задается дискретно с шагом, равным 0.01 от наибольшего значения дозы для данного дозирующего элемента. Максимальное значение основной приведенной погрешности дозирования лежит в диапазоне 1—3 % (в зависимости от величины дозы). Сходимость дозирования не более 1 %. При автоматическом режиме работы прибор обеспечивает скорость дозирования до 20 доз в 1 мин при величине дозы в 5000 мкл. Прибор работает при включении в сеть 220 В, 50 Гц, потребляемая мощность не более 75 Вт, уровень шума при работе прибора не более 60 дБ. Дозатор рассчитан на работу с жидкостями, имеющими температуру не более 35 °С и вязкость, близкую к вязкости воды. Все части прибора, контактирующие с разливаемыми жидкостями, могут быть подвергнуты паровой стерилизации. Прибор состоит из двух блоков: блока управления (габариты 337X317Х Х145 мм, масса 10 кг) и блока дозирования (габариты 290Х215Х Х335 мм, масса 8 кг). Прибор выпускается по ТУ 25-05. (Я62.393. 016)-84, код ОКП 42 1592-9885 07.