Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии - Хеншен А.
ISBN 5-03-001337-7
Скачать (прямая ссылка):
по флуоресценции после смешения с буфером или раствором флуорескамина.
Колонка: 250Х ХЗ мм (виутр, диаметр); неподвижная фаза: Si 60, 10 мкм;
элюеит: тетрагидрофу-ран/0,05 М уксусная кислота (2 : 1), объемная
скорость: 0,28 мл/мин; объемная скорость подачи боратного буфера (pH 9,0)
0,85 мл/мин, флуорескамина (30 мг/100 мл ацетонит-рила) 0,43 мл/мнн.
Исходя из зависимостей, представленных на рис. 5.22-5.24, были
подобраны следующие оптимальные условия обнаружения флуорескаминовых
производных нейрогипофизарных гормонов по флуоресценции.
а. Концентрация флуорескамина от 20 до 30 мг/мл ацетонитрила дает
оптимальный флуоресцентный сигнал.
20*
308 Глава 5
б. Для того чтобы содержание органического растворителя было
низким, раствор флуорескамииа следует подавать с малыми объемными
скоростями.
в. Значение pH элюента следует устанавливать в оптимальной области
- от 6 до 8.
Таблица 5.15. Структура аденогипофизарных гормонов
Структура
Название
I : 3 4 5 6 7 8 9 10 II 12 13 14 15 16 17
18 19 20
И-Slt Tyr-Ser-Mel-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-Glj-Lyi-Lys-Arg-
Arg-Pro-Val- АСТН 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34
35 36 37 38 39 (человеческий)
Lvs-Val-Туг-Рго- Asn-Gly-Ala-Glu-Asp-Glu-Ser-Ala-Glu-Ala-Phe-Pro-Leu-
Glu-Phe-OH
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 II 12 13 14 15 16 17
18 19 20
H-Ser-Tyr-Ser-Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys'-Lys-
Arg-Arg-Pro-Val- АСТН 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33
34 35 36 37 38 39 (свиной)
Lys-Val-Tyr-Pro-Asn-Giy-Ala-Glu-Asp-Glu-Leu-Ala-Glu-Ala-Phe-Pro-Leu-
Glu-Phe-OH
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
18 19 20
H-Ser-Tyr-Ser-Met-Glu-Hib-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys*Arg
Xrg-Pro-Val- АСТН 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34
35 36 37 38 39 (овечий)
Lys-Val-Tyr-Pro-Asn-Gly-Ala-Glu-Asp-Glu-Ser-Aia-Gln-Ala-Phe-PrO'Leu-
GlU'Phc-ОН
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
H,C*CO-Ser-Tyr-Ser-Met-Cilu-Hib-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-NH2
a-MSH
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
18
H-Asp-Ser-Gly Pro-Туг-Lys-Mei-GHi-His-Phe-Arg-Trp'Gly-Ser-Pro-Pro-Lys-
Asp-OH p-MSH
(бычий)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 II 12 13 14 15 16 V,
18
И-Asp-Ghi-Gly-Pro-TyM.ys-Mel-Glu His Phe-Arg Trp-Gly-Ser-Pro-Pro-Lys-
Asp-0H p-MSH
(свиной)
1 2 3 4 5 6 7 S 9 10 11 12 13 14 15 16 17
18
H-Ala Glu-Lys-Lvs-Asp-Glu-Gly-Pro-Tvr-Arg-Mei-Glu-His-Plie-Arg-frp-
Gly-Ser- P-MSH
(челооеческий)
Гликопротеии (2 субъединицы; a: 96 аминокислотных остатков; fi: 120
аминокислотных остатков; мол. масса 26 000)
Гликопротеин (2 субъединицы; мол. масса -30 000)
Протеин (198 аминокислотных остатков; мол.
масса ~ 23 000)
Протеин (190 аминокислотных остатков; мол.
масса ~ 22 000)
Гликопротеин (2 субъединицы; а: 96 аминокислотных остатков; (5: 113
аминокислотных остатков; мол. масса 28 500)
ЛГ, ИКСГ (овечий, бычий)
ФСГ
Пролактин (ЛТГ овечий)
Гормон роста (ГР, человеческий)
Тиреотропии (ТСГ, бычий)
Пептидные гормоны 309
П родолжение
I 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
18
H-Glu-Leu-Ala-Gly-Ala-Pro-Pro-Glu-Pro-Ala-Arg-Asp-Pro-Glu-Ala-Pro-
Ala-Glu- р-Липотропин V) 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
32 33 34 35 36 37 38 (свиной)
Gly-Ala-Ala-Ala-Art-AIa-Glu-Leu-Glu-Tyr-Gly-Leu-Val-Ala-Glu-Ala-
GluAla-Ala-Glu-
39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55
56 57 58
Lys-Lys-Asp-Glu-Gly-Pro-Tyr-Lys-Met-Giu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-Ser-Pro-
ProLys- Asp-59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73
74 75 76 77 78
Lys-Arg-Tyr-Gly-Gly-PheMet-Thr-SerGlu-Lys-Ser-Glu-Thr-ProLeu-
Val'Tlir-Leu-Phe-79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91
LyS'Asn-AIa-lie-Vai-Lys-Asn-Aia-His-LyS'Lys-Gly-Gin-NHj
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
18 19 'У-Липотропин
Н-Giu-Leu-Aia-Giy-Aia-Pro-Pro-Giu-Pro-AlaArg-Asp-Pro-Glu-Aia-Pro-
Ala-Giu-Giy- (свиной)
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36
37 38 39
AIa-Aia-Aia-Arg-Aia-Glu-Leu*Giu-Tyr-Gly-Leu-Vai-Aia-Glu-Ala-Gin-Aia-
Aia-Giu-Lys-
40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58
