Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.
Скачать (прямая ссылка):
правляют на препарат. Последний отбрасывает лучи снова в объектив. Для наблюдений служат специальные объективы для освещения падающим светом.
Покровные стекла при этом, как правило, не применяются вследствие вредных отражений лучей от их поверхности и неравномерности поверхности препарата. Только с масляными иммерсиями покровные стекла не оказывают существенного влияния. Сухие объективы с высокой апертурой можно применять лишь в том случае, если они корригированы для наблюдений без покровного стекла. Поэтому такие объективы часто имеют короткую оправу. Для того чтобы их можно было применять для исследований в падающем свете по методу темного поля (см. главу 7, раздел 7.6), их изготовляют с конусообразной головкой, вершиной которой служит фронтальная линза; при такой конструкции объектива его корпус не препятствует ходу лучей падающего сбоку света. Такие объективы называются эпиобъективами. Действительное промежуточное изображение у них отбрасывается в бесконечность, и поэтому над объективом в тубус помещают линзу, вновь соединяющую в тубусе лучи над иллюминатором. Иллюминатор, расположенный по ходу лучей над объективом, обусловливает искажения, которых можно избежать, добившись того, чтобы лучи, строящие изображение, выходили из объектива параллельно друг другу.
Вычисление масштаба изображения этих объективов производится по следующей формуле :
Масштаб __ Фокусное расстояние тубусной линзы в мм
изображения Фокусное расстояние объектива в мм
Оптическая длина тубуса, входящая в формулу для обычных объективов (см. главу 2, раздел 2.3), заменяется здесь фокусным расстоянием тубусной линзы. У эпи-объек-тивов также различают сухие системы и иммерсии. Для того чтобы при установке объекта на резкость не нужно было часто менять высоту находящегося сбоку источника света, целесообразнее всего применять вертикальные иллюминаторы с предметным столиком, перемещающимся по вертикали; таким путем достигается фокусировка. В случае отсутствия эпи-объективов приходится исследовать непокрытый объект с помощью обычных объективов; возникающую при этом сферическую недоисправленность, обусловленную отсутствием покровного стекла, можно выправить с помощью удлинения тубуса.
Из объективов, обычно предназначающихся для работы при освещении проходящим светом по методу светлого поля, можно применять лишь такие, которые имеют незначительный масштаб изображения (до 10-кратного собственного увеличения, с А около 0,30; приблизительно 300-кратное общее уве-
i
V
личенио). Такие объективы обладают большим рабочим расстоянием, и отсутствие покровного стекла в данном случае не так заметно ухудшает изображение.
При применении масляных иммерсий отсутствие покровного стекла, как уже было указано в главе 2 разделе 2.12, практически не имеет значения. Возникающее при этом
незначительное ухудшение изображения может быть исправлено путем применения более густого кедрового масла с показателем преломления 1,52 (вместо обычного 1,515) или же путем вытягивания тубуса. Расстояние, на которое удлиняют тубус, различно для разных иммерсионных объективов; например, для Цейсс-ахромата 90 х с А = 1,25 оно составляет 10 мм, благодаря чему повышается собственное увеличение этого объектива (95 х). При применении сухих объективов тубус должен быть выдвинут -тем дальше, чем больше апертура объектива. Если она превышает 0,65, то сферическая недоисправ-ленность уже не может быть выравнена выдвижением тубуса.
Различают два вида вертикальных иллюминаторов.
1. Системы Наше. Специально приспособлены для низких и средних увеличений. В корпусе иллюминатора находится призма, отклоняющая все лучи и направляющая их вниз под углом 90°. Благодаря этому изображения становятся значительно более яркими. Призма закрывает половину поперечного сечения тубуса, другая же половина остается свободной для лучей, идущих от препарата к глазу. Поскольку половина сечения тубуса оказывается закрытой для лучей, участвующих в построении изображения, соответственно уменьшается и апертура объектива. Ввиду того, что линзы объектива, действующего как конденсор, собирают лучи, освещающие объект, и концентрируют их на препарате, при применении иллюминатора с призмой
Рис. 129. Принцип устройства вертикального осветителя по Наше.
а — коллектор; б — ирисовая диафрагма; в — линза в тубусе; г — призма; д — лучи, освещаю-* • щие объект.
Рис. 130. Вертикальный осветитель по Наше.
р
свет начинает надать косо и только с одной стороны. По этой причине становятся возможными оптические искажения (азимут-эффекты), однако изображения кажутся более контрастными. Благодаря тому, что половина сечения тубуса закрыта призмой, открытая сторона поля зрения часто выглядит завуалированной. Этот недостаток можно устранить, сужая диафрагму поля. Для того чтобы избежать затенения поля зрения, призмы Наше применяют лишь в сочетании с такими объективами, задняя линза которых расположена поблизости от призмы вертикального иллюминатора Наше.
