Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Аппельт Г. -> "Введение в методы микроскопического исследования" -> 38

Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.

Аппельт Г. Введение в методы микроскопического исследования — МЕДГИЗ, 1959. — 429 c.
Скачать (прямая ссылка): vvedenievmetodimikro1959.djv
Предыдущая << 1 .. 32 33 34 35 36 37 < 38 > 39 40 41 42 43 44 .. 120 >> Следующая

Субмикроны, сталкиваясь с еще меньшими, невидимыми, но находящимися в постоянном движении молекулами, в свою очередь движутся в различных направлениях (броуновское движение). Лучи падают на объект то с одной его стороны, то с другой, освещая его то в продольном, то в поперечном направлении. Поэтому сила дифрагирующего света различна. В зависимости от угла падения лучей объект на короткое время может быть и совсем не видим. Все эти процессы представляются наблюдателю как сверкание отдельных частиц.
Возникает вопрос, где же лежит нижняя граница ультрамикроскопического видения. Имеющиеся в нашем распоряжении средства по-
зволяют отнести к субмикронам частицы с диаметром около
4 m/i. Здесь мы уже приближаемся к размерам молекул органических веществ.
Для того чтобы субмикроны стали видимыми, необходим ряд условий.
а) Видимость субмикронов зависит от силы света, применяющегося для освещения. Если предположить, что речь идет о шаровидных субмикронах, то отсюда следует,
Рис. 119. Освещение по методу темного поля при применении кардиоид-конденсора (Народное предприятие Карл Цейсс в Йене). Лучи проходят, минуя объектив.
что по мере уменьшения радиуса субмикрона сила света дифракционной фигуры уменьшается пропорционально шестой степени этого радиуса. Следовательно, субмикрон, радиус которого вдвое меньше соседнего, излучает при одинаковом освещении только х/64 его света. Отсюда становится ясным, что в ультрамикроскопии нужно применять источники света особой яркости, так как видимость зависит здесь главным образом от освещения и в меньшей степени — от апертуры объектива.
б) Дифракция света тем сильнее, чем больше отличается показатель преломления объекта от показателя преломления среды, в которую он заключен. С этой точки зрения
наилучшим объектом для исследований являются коллоидные растворы золота.
в) Освещение монохроматическим светом выявляет различную дифракцию лучей на объекте. При синем свете дифракция сильнее, чем при красном. По Зидентопфу (1912), потеря интенсивности дифрагированного света обратно пропорциональна четвертой степени длины волны излучаемого света. Поэтому красный луч с длиной волны 700 m/j, вызывает более слабую дифракцию, чем фиолетовый луч той же силы, но с длиной волны 400 mju. По Зидентопфу, при освещении красным светом 'диф-
фрагирует в
9 раз
Рис. 120. Принцип устройства уль-тра^онденсора для всестороннего освещения (схематично).
— объект; о — лучи, освещающие объект; в — зеркало.
Рис. 121. Ультрамикроскопия с плоскопараллельной кюветой на столике микроскопа (одностороннее освещение).
а — объектив микроскопа; б — покровное стекло; в — плоскопараллельная кювета; г — столик микроскопа; д — жидкость; е — сильно затянутая диафрагма; ж — зпи-лампа; з — коллектор.
/700\\
Uoo/ "
меньше света, чем при освещении фиолетовым.
При точном знании показателей преломления субмикронов и среды, в которую они заключены, можно делать вывод о том, какова истинная величина этих частичек. Этот метод был описан еще в 1903 г. Зиден-топфом и Зигмонди (1903), а позже — Ласки (1917) и Эренхафтом (1914). Для определения размеров субмикронов служат различия цветов дифракционных дисков. Подобным образом исследуют, например,коллоидные растворы золота. Чем меньше диаметр субмикрйна, тем больше приближается окраска дифракционной фигуры к фиолетовой части спектра.
Как производят ульт-рамикроскопические наблюдения?
1. С помощью кар-диоид-конденсора, позволяющего проводить ультрамикроскопические исследования жидкостей при освещении по методу темного поля (см. рис. 119).
2. С помощью специальных конденсоров темного поля (ультраконденсоров), служащих для наблюдения жидкостей и газов. Они сконструированы по принципу кар-диоидконденсоров и содержат вделанную внутрь камеру, в которую помещают объект. Рис. 120 поясняет устройство этих конденсоров.
Их устанавливают на столике микроскопа после удаления обычных конденсоров. При исследовании газов камеру закрывают, а при наблюдении жидкости погружают в нее объектив. При помощи системы трубок, жидкости и газы в случае необходимости можно пропускать также и через камеру.
Как быть, если в распоряжении нет ни кардиоид-, ни ультраконденсора ?
В этом случае применяют плоскопараллельную кювету, которую устанавливают на столике микроскопа и освещают перпендикулярно падающим светом по типу «щелевого ультрамикроскопа» Зидентопфа и Зигмонди. Отверстие диафрагмы поля лампы, расположенной вблизи кюветы, сильно сужают, и оно действует как щель. Кювету накрывают покровным стеклом, нижняя поверхность которого омывается жидкостью. В закрытой плоскопараллельной кювете можно исследовать также газы и дым; этим способом успешно изучают, например, табачный дым.
МИКРОСКОПИЯ В ПАДАЮЩЕМ СВЕТЕ ПРИ ИССЛЕДОВАНИЯХ ПО МЕТОДАМ СВЕТЛОГО И ТЕМНОГО ПОЛЕЙ
7.1. ЧТО ОЗНАЧАЕТ ПОНЯТИЕ «МИКРОСКОПИЯ В ПАДАЮЩЕМ
СВЕТЕ » ?
Предыдущая << 1 .. 32 33 34 35 36 37 < 38 > 39 40 41 42 43 44 .. 120 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed