Методы светорассеяния в анализе дисперсных биологических сред - Лопатин В.Н.
ISBN 5-9221-0547-7
Скачать (прямая ссылка):
Свет источника излучения, пройдя светофильтр, выделяющий узкую область определённого спектрального интервала, через делитель
Фильтр
возбуж-
дения
Регистри-
рующий
прибор
Ослабитель тор Схема
¦луча > -> • ФЭУ ........................................................................\ деления
/
сравнения сигнала
JL:.......xlx......... / ТТТ
Датчики -> Усилители- Синхрон ) Схемы
опорных / формирова / ные управ
напряжений -> тели / детекторы \ ления
У
Рис. 2.3. Структурная схема флуориметра ЛФл-И
луча попадает на исследуемый объект, вызывая его свечение. Излучение люминесценции, прошедшее через модулятор света, выделяется другим светофильтром, выбираемым в зависимости от назначения прибора, но не пропускающим возбуждающее излучение (принцип скрещенных фильтров), направляется на фотоприёмник и далее — на регистрирующее устройство. Часть возбуждающего излучения в делителе луча отделяется стеклянной пластинкой (либо призмой 90 градусов), проходит через ослабитель света и также через модулятор поступает на тот же приёмник излучения для сравнения с основным сигналом. Свет эмиссии и свет канала сравнения подаются на катод ФЭУ попеременно. На выходе приёмника получается последовательность импульсов, разделённая темновыми промежутками, соответствующими фоновому сигналу при неосвещённом катоде. Эта последовательность поступает на схему аналогового деления с разделением сигналов при помощи синхронного детектирования на управляющий, выходной и фоновый сигналы. Управляющий сигнал от канала сравнения поддерживает постоянным выходной сигнал (за счёт изменения коэффициента усиления основного усилителя в блоке деления сигнала) при любых изменениях светового потока источника излучения и коэффициента усиления ФЭУ и электронной схемы. Фоновый сигнал стабилизирует напряжение на выходе схемы, обусловленное темновым током фотоумножителя, за счёт отрицательной обратной связи на вход основного усилителя.
Оптическая схема флуориметра представлена на рис. 2.4.
Свет от лампы 1, сформированный конденсором 2 в слабо расходящийся пучок, проходит светофильтр 3, выделяющий нужную область спектра, нейтральный светофильтр 5 (фильтр ставится при необходимости уменьшения интенсивности возбуждающего излучения, обычно он отсутствует), электромагнитный затвор 6 и входную диафрагму кюветного отделения и поступает на кювету с пробой. В плоскости, проходящей через центр кюветы, свет образует прямоугольное пятно с размерами примерно равными размерам кюветы. Если необходимо повысить облучённость образца, непосредственно за кюветой может располагаться зеркало 19 для возврата излучения, прошедшего пробу. Свет флуоресценции через выходную диафрагму кюветного отделения
16, механический затвор 8 (затвор служит для предотвращения попадания внешнего света на катод ФЭУ и открыт только тогда, когда кюветное отделение вплотную придвинуто к блоку модулятора света), модулятор 11, светофильтр эмиссии 12, диафрагму 17 попадает на катод фотоумножителя 15. Излучение канала сравнения от стеклянной пластинки 4 проходит световод 13, светофильтр (или диафрагму) 14 (набор светофильтров различной оптической плотности служит для изменения общего коэффициента усиления электронной схемы), модулятор 11, световод 20 и через матовое стекло 21 поступает также на катод ФЭУ 15. Три фотодиода 9 и три светодиода 10, расположенные против специальных прорезей обтюратора (на схеме показана только одна пара), генерируют сигналы, необходимые для формирования опорных напряжений синхронного детектора.
9 10
Рис. 2.4. Оптическая схема флуориметра ЛФл-И. 1 — лампа 12 В, 75 Вт; 2 — конденсор; 3 — светофильтр возбуждающего света; 4 — светоделительная пластинка; 5 — нейтральный светофильтр; 6 — электромагнитный затвор; 7, 16, 17 — диафрагмы; 8 — механический затвор; 9 — фотодиод; 10 — светодиод; 11 — модулятор; 12 — светофильтр эмиссии; 13, 20 — световоды; 14 — ослабитель света; 15 — фотоприёмник; 18 — кювета; 19 — зеркало; 21 —
молочное стекло
Технические данные флуориметра ЛФл-И Длина волны возбуждения, нм 390; 450
