Люминесцентный анализ - Шлезингер М.А.
Скачать (прямая ссылка):
Посмотрите, как изменяется флуоресценция при изменении условий наблюдения: при освещении сверху, сбоку, через линзу, при приближении и удалении от лампы (от светофильтра), при помещении над объектом стеклянной пластинки. Сравните флуоресценцию объектов при их освещении только невидимыми ультрафиолетовыми лучами и в том случае, когда на них попадает видимый сй&г. Как объяснить кажущееся изменение цвета свечения?
Задание 2
Наблюдений изменения флуоресценции в зависимости от концентрации
Приготовьте около, 5 мл 1 % -ного раствора флуоресцеина (растворяйте флуоресцеин в приблизительно*5%-ной щелочи).
Приготовьте из этого раствора ряд растворов с концентрациями, отличающимися'между собой на порядок, т. е. в 10 раз: 1%, 0,1%, 0,01%... до 10~п г/мл (приблизительно). Все растворы готовьте на 5%-ной щелочи.
Сравните флуоресценцию полученных растворов. Одинаково ли изменяется интенсивность свечения при разбавлении концентрированных и разбавленных растворов? Изменяется ли цвет флуоресценции при изменении концентрации раствора? Изменяется ли цвет флуоресценции при разбавлении растворов малой концентрации?
Какова минимальная концентрация раствора, при которой еще заметна его флуоресценция?
Испытайте, одинаково ли себя ведут другие флуоресцирующие вещества, например хинин, родамин, эозин и т. д.
Приведите в связь ваши наблюдения с теми теоретическими данными, какие сообщаются в главе II.
ЗаданиеЗ
Ознакомление со свойствами флуоресцентных индикаторов '
Применяемые реактива: 4-этоксиакридон; 2-нафтиламин; акридин; 4-метилум-белиферон; Р-соль; СС-кислота (в растворах концентрации 0,1%); соляная кислота- 5%-ный раствор; едкий натр - 5%-ный раствор.
*) Указания, как собрать простейшую установку, даны в гл. VII, стр. 116-.
•394
ПРИЛОЖЕНИЯ
В одну пробирку налейте 2-3 мл соляной кислоты, в другую-такой же обьем раствора едкого натра. Добавьте в каждую из пробирок по 1-2 капли раствора индикатора 4-этоксиакридона. Перемешайте содержимое каждой пробирки. Сравните флуоресценцию полученных растворов 4-этоксиакридона в кислой и щелочной среде, наблюдая ее в фильтрованном ультрафиолетовом свете.
Проделайте тот же опыт с каждым из имеющихся индикаторов. Сравните полученные результаты с данными главы VIII.
Задание 4 Титрование окрашенного раствора в присутствии флуоресцентного индикатора
Применяемые реактивы: 4-метилумбеллиферон (0,1%-ный раствор в спирте); соляная кислота (0,1н раствор); едкий натр (0,1н раствор); метиловый фиолетовый (0,1%-ный раствор); фенолфталеин (1%-ный раствор в спирте).
Налейте в коническую колбу пипеткой 25 мл соляной кислоты, добавьте 2- 3 капли 4-метилумбеллиферона и подкрасьте раствор 2 каплями метилового фиолетового. Титруйте раствор в фильтрованном ультрафиолетовом свете раствором едкого натра. За конец титрования принимайте устойчивую сине-фиолетовую флуоресценцию, не исчезающую при перемешивании.
Отметьте количество щелочи, пошедшее на титрование.
Проведите параллельное титрование 25 мл той же кислоты такой же щелочью в обычных условиях в присутствии индикатора фенолфталеина. Сравните результаты титрования в обоих случаях.
Задание 5 Титрование окрашенной жидкости в присутствии хемилюминесцентного индикатора
Применяемые реактивы: Люцигенин (0,1%-ный раствор в воде); соляная кислота (0,1н раствор); едкий натр (0,1н раствор); перекись водорода (5%-ный раствор); прямой коричневый К (0,1%-ный раствор); фенолфталеин (1%-ный раствор в спирте).
Налейте в коническую колбу пипеткой 25 мл соляной кислоты, добавьте 4 капли люцигенина, 4 капли перекиси водорода и подкрасьте раствор "прямым коричневым К". Титруйте в темноте (в темной комнате) раствором едкого натра до появления свечения всего раствора, не исчезающего при перемешивании.
Отметьте количество щелочи, пошедшее на титрование.
Проведите параллельное титрование 25 мл той же кислоты, такой же щелочью в обычных условиях в присутствии индикатора фенолфталеина. .
Сравните результаты титрования с полученными ранее и с данными гл. IX.
Задание 6
Определение чувствительности люминесцентной реакции алюминия с салицилаль-о-аминофенолом *)
Применяемая аппаратура, реактивы и растворы
1. Ртутно-кварцевая лампа или иной источник ультрафиолетового света, снабженный светофильтром УФСЗ, УФС2 или УФС1.
2. 0,01%-ный раствор салицилаль-о-аминофенола в ацетоне.
3. Вода бидистиллят, перегнанная в стеклянной аппаратуре.
4. Фталатный буфер с pH = 5,8-6,0. Его готовят следующим способом; в мерную литровую колбу всыпают 40,836 г предварительно перекристаллизованного и высушенного при температуре 110-115° С в течение 1,5-2,0 часов кислого фталевокислого калия и добавляют приблизительно 700-800 мл дистиллированной воды. После растворения и перемешивания доливают водой до метки, снова перемешивают, отбирают пипеткой в стакан 50 мл этого раствора и нейтрализуют по фенолфталеину приблизительно 1/5 молярным раствором едкого натра. К полученному раствору добавляют
*) Вспомните указания относительно количественного люминесцентного анализа, приведенные в гл. V и VI.
