Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.
Скачать (прямая ссылка):
Для улучшения контраста в гистологических препаратах, обнаруживающих красную или сине-фиолетовую окраску (гемалаун-эритрозин), при использовании ортохромати-
ческих негативных материалов пригоден желто-зеленый фильтр. Употребляют фильтр Шотта VG4.
При желании сфотографировать гистологический препарат амилоидоза селезенки, окрашенный метилвиолетом, можно усилить контраст между оранжево-красным цветом амилоида и синим цветом остальных тканей путем включения красного фильтра Шотта RG2. Синий цвет будет выглядеть почти черным, а оранжево-красный цвет — ярко светящимся.
При желании контрастно сфотографировать гистологический препарат жировой дистрофии печени, окрашенный Суданом желтым, можно взять синий шоттовский фильтр BG5 или BG7. Желтый цвет окрашенного Суданом объ'екта выглядит черным и хорошо отделяется от среды.
Монохроматические фильтры употребляют для выделения от источника света с линейчатым спектром (кварцевая лампа с парами ртути или современные спектральные лампы) волн желаемой длины (узко ограниченных) и погашения других волн.
Обыкновенные объективы не могут применяться в соединении с монохроматическими фильтрами.
Монохроматические фильтры не применяют в соединении с источником света, имеющим непрерывный спектр (все лампы накаливания).
Монохроматический свет из этих источников света выделяется посредством новых интерференционных фильтров Шотта (Йена).
Серые фильтры (фильтры Шотта NG3 или NG4) включаются на пути осветительных лучей тогда, когда свет так ярок, что ослепляет глаз при взгляде в окуляр.
В микрофотографии эти фильтры (которые лишь ослабляют свет, но не меняют его цвета) применяют во время установки; перед съемкой их отводят с пути лучей для того, чтобы весь световой поток мог воздействовать на фотографический слой.
При употреблении фильтров нужно всегда иметь в виду, что из-за них теряется много света и тем больше, чем плотнее фильтр. Поэтому удлиняют время экспозиции.
18.7. МИКРОФОТОГРАФИЯ В ЕСТЕСТВЕННЫХ ЦВЕТАХ
Изложение способов цветной фотографии не входит в. задачу этой книги.
Есть ряд хороших книг, посвященных этой обла’сти работы, например, Кросс «Цветная фотография» или Опфер-ман «Цветная пленка в твоей камере».
Здесь будет представлено лишь то, на что должно быть обращено особое внимание при цветной микрофотосъемке.
Рекомендуется применение апохроматов, так как лишь эти объективы исправлены дня всех цветов.
Цветные фильтры, за исключением компенсационных фильтров, нельзя применять.
Конденсоры должны быть по возможности ахроматичными. При употреблении обычных конденсоров по краю поля зрения возникнет цветная кайма при условии, что диафрагма поля осветителя открыта не больше, чем допускается методом Кёлера. Раскрытие же диафрагмы вызовет засвечивание изображения.
Апертурная диафрагма конденсора должна быть затянута лишь немногим меньше апертуры объектива.
Как правило, применяют пленки для искусственного света. Обычные осветители к микроскопу дают свет, соответствующий тому, для которого была создана цветная пленка для искусственного света. При употреблении пленки для дневного света на пути световых лучей должен быть введен фильтр Агфа К69 или фильтр Шотта BG34, который имеет сине- фиолетовую окраску и увеличивает время экспозиции в 4 раза.
Так как широта фотографического слоя цветной пленки относительно мала, то рекомендуется всегда применять фотоэлектрический экспонометр. Но он все же не в состоянии дать точные данные, так как измеряет значение яркости всего поля зрения, а не только того участка, который нужен.
В черно-белой фотографии при большой широте пленок и пластинок это не столь важно. Наоборот, при цветной фотографии этот недостаток имеет большое значение. Поэтому предпочтительней пользоваться описанным в разделе 18.9 способом пробных экспозиций. Можно также сделать пробные снимки на черно-белой пленке (Агфа-изопан FF 10/10 дин). Конечно, при этом путем пробы цветной пленки надо прежде всего установить, какому значению экспозиции цветной пленки соответствует правильная экспозиция черно-белой пленки.
Особенно ценна цветная микрофотография при наблюдениях в поляризованном свете, в люминесцентной микроскопии и при изучении хорошо окрашенных срезов.
18-.8. СПЕЦИАЛЬНЫЕ ОБЛАСТИ МИКРОФОТОГРАФИЧЕСКИХ
РАБОТ
18. 8. 1. Получение стереоскопических изображений
Для производства стереоскопических снимков лучше всего годятся камеры больших форматов (камеры с мехами).
При простом микроскопе особенно надежными являются два способа.
Рис. 385. Стереоскопическая камера Дрюнера (схематически).
1 — негатив; 2 — негатив, 3 — объективы.
Рис. 386. Стереоскопическая камера по Дрюнеру с микроскопом для наблюдения (справа), служащим для установки.
1. Оба изображения снимают одновременно одной камерой, насаженной на микроскоп типа Грино, окуляры которого должны быть удалены.
Этот принцип практически осуществлен в камере Дрюнера (рис. 385 и 386). К сожалению, камеры Дрюнера больше не производятся. Поэтому нужно действовать по-другому.
