Люминесцентный анализ - Шлезингер М.А.
Скачать (прямая ссылка):
В. В. Козлов [14] предложил для определения следов оружейной смазки экстрагировать их эфиром. Если стрельба производилась из одного оружия, то, сравнивая яркость люминесценции вытяжек, можно устанав
328
ЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ АНАЛИЗ В СУДЕБНОЙ МЕДИЦИНЕ
[ГЛ Х)\
ливать последовательность выстрелов (1-й, 2-й, 3-й). Установление после довательности выстрелов другими методами исследования очень сложно, обычно не столь убедительно, а в большинстве случаев и невозможно.
Особый интерес представляет использование наблюдений люминес ценции для обнаружения следов крови.
В тридцатых годах Шпект [15] рекомендовал использовать для этого хемилюминесценцию гидрозида 3-аминофталевой кислоты, возникающую в присутствии перекиси водорода и ферментов крови. При опрыскивании предметов раствором гидрозида 3-аминофталевой кислоты (1 часть светящегося вещества, 5 частей соды, 15 мл 3%-ной перекиси водорода на 100 мл дистиллированной воды) в темноте наблюдается яркая флуоресценция голубоватого цвета в тех местах, где остались следы крови.
В качестве доказательной пробы на кровь весьма целесообразно применять флуоресцентную реакцию с концентрированной серной кислотой. При действии на частицы крови указанной кислоты возникают глыбки гематопорфирина, обладающего флуоресценцией яркого оранжево-красного цвета. Люминесцентный микроскоп позволяет обнаруживать этим путем микроскопические частицы гематопорфирина (диаметром 7-10 мк). Исключительно большая чувствительность позволяет экономить материал пятен крови для дальнейших исследований - определения вида, группы, типа крови, а также позволяет исследовать застиранные пятна крови на одежде [16].
Некоторые считают, что данная реакция неспецифична для крови, так как красную флуоресценцию имеют и другие вещества. Однако такое соображение неправильно: оно не учитывает хода флуоресцентной реакции; в самом деле, флуоресценция вйачале отсутствует и оранжево-красное свечение появляется только после добавления определенного реактива (серной кислоты); такая реакция строго специфична. У вещества, обладающего способностью светиться красным светом, люминесценция наблюдается без каких-либо дополнительных реакций. Синтетические красители при воздействии концентрированной серной кислотой разрушаются. Соединения, родственные гемоглобину,- дыхательные ферменты, очень сильно распылены в растениях и не дают подобной реакции. Хлорофилл и его производные светятся в ультрафиолетовых лучах карминово-красным цветом, отличающимся от цвета свечения гематопорфирина.
В дополнение к люминесцентной реакции можно проводить микро-спектроскопические исследования флуоресценции гематопорфирина (спектрографические исследования обычно почти невозможны из-за ничтожного количества исследуемого вещества). Гематопорфирин в кислой среде дает полосу свечения 590-650 ммк, в щелочной - 625 - 675 ммк.
Кроме концентрированной серной кислоты, для получения из крови гематопорфирина были предложены и другие реактивы: тиогликолевая кислота [17], гипосульфит натрия в сочетании с ледяной уксусной кисло той и др.
К сожалению, в с у д е б н о-х имической практике люминесцентный анализ еще не завоевал всеобщего признания, ив судебнохимической экспертизе люминесцентные методы анализа пока предложены для обнаружения лишь ограниченного числа веществ.
Костяковой [18] была разработана методика обнаружения в биологическом материале хинина, риванола и акрихина по цвету флуоресценции этих веществ в водных растворах. Методика извлечения хинина, риванола и акрихина из биологического материала довольно проста. Измельченный материал сначала подкисляется щавелевой кислотой и заливается 96°-ным
ГЛ. XXX] ЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ АНАЛИЗ В СУДЕБНОЙ МЕДИЦИНЕ
этиловым спиртом. Затем все алкалоиды извлекаются хлороформом, а из последнего - подкисленной водой (обычный судебно-химический метод). Исследованию под ультрафиолетовыми лучами подвергается только отдельный водный слой.
Хинин люминесцирует голубым светом. Для большей обоснованности результатов исследования желательно проведение дополнительной пробы с бромной водой и последующим подщелачиванием 25%-ным раствором аммиака. При этом хинин начинает светиться желтовато-зеленоватым цветом. Для обнаружения риванола и акрихина следует отлить кислый водный слой в две пробирки, в одну из которых добавляется щелочь. Риванол и акрихин светятся сходным желтовато-зеленоватым цветом. Однако максимум интенсивности свечения наблюдается у риванола в кислой среде, а у акрихина - в щелочной. Чувствительность этих проб порядка 1-10"8-1-10 7 г/мл.
Установив, что у риванола и акрихина яркость пропорциональна концентрации в пределах 1-10 4-1-10 7 г/мл, Костикова предложила количественный метод определения этих веществ путем сравнения анализируемого раствора с эталонами риванола в кислой среде, а акрихина - в щелочной (см. гл. III, стр. 37).
Для судебно-химических токсикологических исследований очень важно устанавливать различие между птомаинами и алколоидами. Бошня-ков [19] рекомендует для этой цели использовать люминесценцию. По его наблюдению растворы 0,5-1,0% солей морфия при облучении ультра фиолетовыми лучами выглядят грязно-зелеными, растворы пантопона - коричневато-зелеными, растворы опия - зеленовато-бурыми, раствор стрихнина -• светло-синим. Растворы птомаинов при облучении выглядят мутными с бледно-голубыми тонами, люминесценция усиливается по мере увеличения концентрации.
