Люминесцентный анализ - Шлезингер М.А.
Скачать (прямая ссылка):
Пикок использовал наблюдения флуоресценции для выяснения путей удаления веществ из кровяного русла. Для этого он внутривенно впрыскивал флуоресцеин мышам, которых затем по истечении часа и более умерщвлял. Эти опыты показали, пишет Пикок, что и печень, и почки выделяют флуоресцентный краситель, однако флуоресцеин, выделяемый печенью, с желчью попадает в кишечник, отсюда быстро реабсорби-руется и снова попадает в кровь. Поэтому в конечном счете флуоресцеин удаляется из крови путем выделения его почками.
Введение в организм флуоресцентных веществ нашло в настоящее время применение в клинической практике. Инъекция флуоресцентных /красителей использована для изучения циркуляции крови [2, 3, 4]: определяют время после впрыскивания (например, флуоресцеина), по истечении которого под ультрафиолетовыми лучами обнаруживается зеленоватая флуоресценция губ, век или других участков поверхности тела [2]. В сороковых годах этот же прием начали использовать в хирургии, в част? ности при пересадках кожных лоскутов; появление флоуресценции у пересаженной кожи после введения больному флуоресцеина доказывает, что между телом больного и пересаженной кожей установилось крово обращение [5]. Яблонский [6] считает, что введение в кровяное русло флуоресцеина (флуоресцеиновая проба) позволяет в ранние сроки после операции выявлять нарушения кровообращения в кожных лоскутах, а это дает возможность предотвращать некроз лоскутов в местах с нарушенным питанием. Богданова [7] применила внутрикожное введение 0,2 мл раствора уранина (натриевой соли флуоресцеина) для исследования проницаемости капилляров кожи. Флуоресцеиновая проба была поставлена у 120 больных различными дерматозами; обследования проводились до, во время и после лечения. В результате установлено, что длительность
294 ЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ АНАЛИЗ В БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЕ [ГЛ. XVI
флуоресценции кожи колеблется в пределах от 102 минут (у здоровых) до 24 минут (у больных отеком).
В [8] описано внутривенное введение флуоресцеина *) при операциях желчного пузыря и желчных протоков. Авторы предварительно исследовали, как быстро после введения флуоресцеина изменяется его содержание в крови, желчи и моче, и пришли к выводу, что через 4-5 часов после введения флуоресцеина желчь содержит значительное количество красителя; в работе указывается, что в ультрафиолетовом свете внешние печеночные протоки всего лучше видны именно через такие промежутки времени. На основании опыта проведенных операций авторы считают, что при закупорках внешне-печеночных протоков желчи польза от применения флуоресцеина при операциях лишь ограниченная.
За последние годы обнаружено селективное накопление в опухолях таких люминесцентных веществ, как порфирины, акридиновый оранжевый, акрихин, флуоресцеин (натриевая соль). Установлено, что после одноразового внутривенного введения флуоресцеина у здорового человека краситель выделяется полностью за 50-70 часов, у больного злокачественной опухолью флуоресценция обнаруживается еще и через 2000 часов; это время значительно сокращается, если применять вместо флуоресцеина акрихин [9].
Накопление в злокачественных опухолях вводимых флуоресцентных веществ пытаются использовать для целей диагностики. В Институте грудной хирургии Академии медицинских наук больные раком легкого принимали флуоресцеин (1 г в щелочном растворе) за 3,5-4 часа до операции; благодаря этому на операционном столе при освещении ультрафиолетовыми лучами у оперируемого выявлялась граница между светящейся пораженной тканью и здоровой частью легкого: непораженные опухолью ткани флуоресцировали серовато-голубым светом, а раковые опухоли - желтовато-коричневым [10]. При операции требуется большая освещенность оперируемого органа ультрафиолетовым светом. Карякиным совместно с Пентюриным разработан необходимый для этого осветитель (см. гл. VII, стр. 116). .
Люминесцентно-флуоресцеиновый метод детально разработан и с успехом применяется в нейрохирургии [11]. Метод позволяет определять границы злокачественной опухоли в мозгу и контролировать радикальность ее удаления. Специальные исследования посвящены изучению флуоресцентных красителей (флуорохромов), пригодных для диагностики опухолей центральной нервной системы [12].
При операции гортани применено внутривенное введение раствора риванола **) для усиления контраста в цвете люминесценции между злокачественной опухолью и здоровой тканью [13].
Флуоресцентные красители - флуорохромы - находят широкое применение при использовании наблюдений под микроскопом для диагностических делей.
Разработаны люминесцентно-гистологические методы диагностики рака глотки и гортани [14], а также женских половых органов [15] - см. главу XVIII, посвященную люминесцентной микроскопии в биологии и медицине.
*) Использовались продажные ампулы со стерильным раствором флуоресцеина в двууглекислой соде.
**) Риванол, как известно, относится к числу ярко флуоресцирующих веществ.
2]
НАБЛЮДЕНИЕ СОБСТВЕННОЙ ЛЮМИНЕСЦЕНЦИИ
295
Со времени первых опытов по применению в медицине рассматриваемого приема люминесцентного анализа прошло не более 20 лет; надо думать, что в дальнейшем будут найдены новые возможности его использования.
