Методы анализа молока и молочных продуктов - Инихов Г.С.
Скачать (прямая ссылка):
I — стеклянная пластина; 2 — бортик; 3 — станок; 4 — направляющая; 5 — ручка.
позволяющими сдвигаться стеклянным пластинкам, которые кладут на стол или доску. Высота бортика не должна превышать толщину стеклянных пластин. Стеклянные пластинки (точно 20X?O см) толщиной не менее 4 мм должны плотно входить между бортиками стола. Все 5 листов стекла укладывают последовательно на поверхность стола или доски без промежутков. Перед нанесением сорбента стеклянные пластины тщательно моют, обезжиривают и сушат.
217
Для нанесения тонкого и равномерного по толщине слоя сорбента используют специальный станок из латунного хромированного квадратного бруска, полого внутри. С правой стороны к торцу бруска привинчивается направляющая пластинка. В полости бруска размещается притертая по наружной поверхности трубка, заглушённая по краям. Заглушки трубки, выступающие на 5—8 мм за обрез бруска, имеют бортики, которые фиксируют трубчатый вкладыш цилиндрической полости бруска. Вкладыш легко проворачивается на 180° рукояткой 5, укрепленной сбоку выступа вкладыша. Цилиндр вкладыша имеет окно, соответствующее окну в бруске прибора. Нижняя поверхность бруска, которая при нанесении слоя сорбента соприкасается со стеклом, тщательно отполирована.
Образцы и растворители перед хроматографией необходимо подготовить. Жирные кислоты глицеридов без предварительного омыления переводят в метиловые эфи-ры метгшолом^диэтиловом эфире в_щшсутствии едкого jcajm^/Для "ріїзделения нейтральных липидов и их гидро-лизатов рекомендуют различные растворители и смеси (петролейный эфир (или гексан) + бензол; гексан + + тетралин; петролейный эфир + диэтиловый эфир и др.). В качестве сорбентов при тонкослойной хроматографии используют силикагель в смеси с гипсом и окисью алюминия, окись алюминия, кизельгур (для разделения триглицеридов, кетокислот, жирных кислот применяют кизельгур, который пропитывают высококипящими фракциями нефти).
Сорбент (25 г) насыпают в сухую фарфоровую ступку, подливают 35 мл воды <а растирают до получения однородной массы. Добавляют еще 15 мл воды, непрерывно помешивая кашицу до сметанообразного состояния. Сорбент наносят на приготовленные и уложенные на столе стеклянные пластинки специальным станком, в который сорбент наливают из ступки через верхнее окно. После равномерного распределения сорбента во внутреннем цилиндре его сразу поворачивают за ручку на 180°. Окно цилиндра совпадает с нижним окном бруска станка, который берут за оба конца и равномерно, без прижима проводят по всем пластинам.
Слой сорбента сушат на воздухе под вентилятором в течение 10 мин, затем в сушильном шкафу при 1100C
216
в течение 30 мин. На слой сорбента на расстоянии 15 мм от края пластины карандашом или иглой наносят точки старта. В 10 см от старта отмечают линию фронта. Исследуемое вещество наносят (за один прием 5 мм3) пипеткой емкостью 10 мм6 с делениями через 1 мм3. Лучше в одну точку наносить образец несколько раз.
Затем на расстоянии I см от края наносят эталонную смесь из красителей (масляный желтый, судан красный). Для последующего разделения пластины устанавливают в гнезда стеклянных, герметически закрывающихся камер. На дне камер установлены кюветы с растворителями, в которые пластинку погружают на глубину 5 мм. Разделение проводят при 18—200C в темном помещении. Хроматограммы проявляют, разбрызгивая из тонкой форсунки специальные реактивы. Затем поступают как при проведении распределительной хроматографии на бумаге.
ПОЛЯРИМЕТРИЯ И ПОЛЯРОГРАФИЯ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ САХАРОВ ПОЛЯРИМЕТРИРОВАНИЕМ
Асимметрический углеродный атом в сахарах делает их оптически активными, способными вращать плоскость поляризации. Это свойство является функцией концентрации водных растворов сахара, поэтому, измеряя угол вращения а, можно определить содержание Сахаров.
Характерным показателем каждого оптически активного вещества является его удельное вращение Ja]20D— угол вращения, плоскости поляризации при 20° С для линии D натриевого пламени раствором, содержащим 100 г вещества в 100 мл, когда луч в этом растворе проходит путь, равный 100 мм. Для сахарозы [a]20D равен + 66,5°; лактозы моногидрат +52,5°; лактозы безводной 4-55,3°. Содержание вещества в 100 мл раствора рассчитывают по формуле
а 100
где a — угол вращения, град; [а]20п—удельное вращение анализируемого вещества при температуре 20° С; / — длина 'поляризационной трубки, дм.
219
На рис. 82 приведена схема поляриметра. Луч света поляризуется в неподвижной призме Николя — поляризаторе 1. Вторая (подвижная) призма — анализатор 2 поворачивается около оси прибора с прикрепленным к нему указателем, отмечающим угол его вращения на круговой шкале. Если при пропускании луча света последовательно через две призмы Николя анализатор поставлен так, что плоскость колебания пропускаемых им лучей совпадает с плоскостью колебания поляризованного луча, то лучи полностью проходят через анализатор и в окуляре виден свет. Если анализатор повернуть на 90°, то поляризованный луч не проходит и свет затухает.
Когда между поляризатором и анализатором, находящимися в скрещенном положении (установлено на темноту), помещают трубку 3 с раствором сахара, при наблюдении в окуляр вследствие отклонения поляризованного луча появляется свет. Для достижения снова полной темноты анализатор необходимо повернуть на некоторый угол — угол вращения плоскости поляризации.
