Методы анализа молока и молочных продуктов - Инихов Г.С.
Скачать (прямая ссылка):
По полученным данным вычерчивают калибровочный график, откладывая по оси ординат найденное значение оптической плотности, по оси абсцисс — соответствующие количества витамина А в интернациональных единицах. Калибровочный график должен представлять собой прямую линию. Если в каком-либо месте ее наблюдается изгиб к оси абсцисс, то следует составить новый график.
Пробы молока готовят как при определении содержания витамина А в молоке визуальным методом, вплоть до растворения неомыляемого осадка молока (из эфирной вытяжки) в хлороформе. Затем фотоэлектроколори-метрирование ведут, как указано при установлении оптической плотности для калибровочного графика. Концентрация витамина А в хлороформенном растворе для колориметрирования должна быть такой, чтобы отсчет был в пределах 40—65 делений шкалы, поэтому количество хлороформа для растворения витамина регулируют.
Зная оптическую плотность исследуемого раствора, находят по калибровочному графику соответствующее содержание витамина А в 1 мл молока. Количество витамина А в 1 г молока рассчитывают по формуле
где а — количество витамина А в 1 мл молока по калибровочному графику, и. е.; g — навеска молока, г; Ъ — количество раствора, взятого на реакцию, мл; V—объем исследуемого раствора с учетом всех его разведений, мл.
Содержание витамина А в мкг в 1 г молока определяют по той же формуле, но полученный результат умножают на 0,3 (коэффициент пересчета интернациональных единиц в мкг).
Количество витамина А в 1 г молока можно вычислить по формуле
1 :9.
X =
д^-0,3-100 ?¦-1000
ДІ/-0.3
мг %.
124
Определение содержания витамина PP в молоке
(по В. Иосиковой)
В коническую колбу с пришлифованной пробкой емкостью 400—500 мл, соединенную с обратным холодильником, отмеривают 20 мл молока, прибавляют 100 мл 1 н. раствора HCl, нагревают на кипящей водяной бане 1 ч. Раствор охлаждают и нейтрализуют 20%-ным раствором NaOH до pH 6,5 по универсальной индикаторной бумажке, затем прибавляют при перемешивании 100 мл 96%-ного этилового спирта. Осадок отфильтровывают на воронке Бюхнера с отсасыванием. Прозрачный фильтрат обрабатывают 2 г асканита (адсорбента никотиновой кислоты), встряхивая 3 мин.
Асканит отфильтровывают на маленькой воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Фильтр с асканитом ¦переносят в колбу, в которой обрабатывали раствор, и злюируют (извлекают) из него никотиновую кислоту встряхиванием с 25 мл 1 н. раствора NaOH 3 мин. Смесь переносят в центрифужную пробирку и центрифугируют. Объем центрифугата измеряют мерным цилиндром, переносят без потерь в стакан и обрабатывают водным раствором сернокислого цинка (1:1).
Полученную густую массу обрабатывают сернокислым цинком до pH 6,5 (по универсальной индикаторной бумажке). Затем фильтруют через маленькую воронку Бюхнера с отсасыванием. Фильтрат количественно сливают в колбу, и окисляют при нагревании 1 н. раствором KMnO4 (реактив 7), добавляя его по каплям до получения прозрачного раствора (обычно 4—6 капель). Содержимое колбы охлаждают и центрифугируют. Жидкость сливают в стаканчик и обрабатывают до нейтральной реакции по фенолфталеину кристаллическим трифосфатом калия KsPO4, затем доводят разбавленной 1 н. HCl до pH 6,0 и фильтруют с отсасыванием на воронке Бюхнера в колбочку. Объем центрифугата измеряют.
К 5 мл полученной вытяжки и соответственно к 5 мл стандартного раствора (реактив 70), содержащего 10 мкг никотиновой кислоты, предварительно подогретых до 60—70е С, приливают по 2 мл роданбромидного (реактив 71) раствора и по 7 мл спиртового раствора анилина (реактив 72). Через 30 мин—1 ч смесь фильтруют через бумажный фильтр и колориметрируют в
125
электрофотоколориметре со светофильтром 440 нм, применяя контроль в виде разбавленного водой спирта (1:1), или в колориметре КОЛ-1М.
Содержание никотиновой кислоты рассчитывают по формуле
для.колориметра КОЛ-IM
25V1Zi-IO-IOO 51/jfc
X =---=-— мг %;
(71/¦5A1-IOOO GVh1
где 25—-количество щелочи, взятое для извлечения никотиновой кислоты, мл; G— навеска молока, г; Vi— объем центрифугата после обработки сернокислым цинком, мл; V — объем центрифугата после отделения асканита, мл; h — высота столба стандартного раствора никотиновой кислоты, мм; 5 — количество молока, взятое для реакции, мл; 10 — содержание никотиновой кислоты в стандартном растворе, мкг; Zi1 — высота столба испытуемого раствора, мм; 100 — пересчет в 7о"> Ю00 — пересчет в мг;
для электрофотоколориметра
25V1h1-IO-IOO 5V1h1
X =-=- мг %;
GV -5/? -1000 GVn
где щ — показание шкалы оптической плотности для испытуемого раствора; п — показание шкалы оптической плотности для стандартного раствора.
Определение содержания витамина D в молочном жире
В коническую колбу емкостью 200 мл (с притертой пробкой), снабженную обратным холодильником в виде длинной трубки, отвешивают 10 г молочного жира, приливают 40 мл 96% -його этилового спирта, 8 мл 50% -ного водного раствора КОН. Колбу помещают в водяную баню, нагретую до 85—90° С на 45—50 мин. По окончании омыления, когда мыльный раствор просветлится, содержимое колбы переносят в делительную воронку (емкостью 300 мл). Колбу промывают водой, сливая ее в ту же делительную воронку. Раствор экстрагируют 3 раза диэтиловым эфиром, на первое экстрагирование 50 мл эфира, а на два последующих по 25 мл.
