Методы анализа молока и молочных продуктов - Инихов Г.С.
Скачать (прямая ссылка):
Охлажденный раствор переносят в делительную воронку на 25 мл и один раз промывают, сильно встряхивая с 8 мл чистого хлороформа. Водный раствор отделяют. Раствор в хлороформе центрифугируют (2000 об/мин) до полного просветления его и определяют оптическую плотность при 430 нм в спектрофотометре.
Сравнивая результаты с показаниями стандартных растворов натриевой соли ДНК (реактив 146), находят содержание ДНК в молоке, вычисляют количество лейкоцитов, зная, что 7 мкг ДНК соответствует 1 млн. лейкоцитов в 1 мл молока.
Косвенные методы
Косвенные методы основаны на изменении состава и свойств молока, полученного от коров, больных маститом. Оно имеет пониженную кислотность (15°T и ниже),
373
повышенное pH, пониженное содержание молочного сахара и казеина, повышенное содержание хлора, повышенное хлорсахарное число, повышенную активность катала-зы, пониженное соотношение K/N а.
Бромтимоловая проба. К 5 мл молока в маленькой фарфоровой чашке прибавляют 1 мл 0,2%-ного спиртового раствора (в 60%-ном спирте) бромтимолового синего. Свежее молоко от здоровых животных дает желто-зеленую окраску, от больных маститом — от темно-зеленой до темно-синей. При сильной запущенной форме мастита реакция молока приобретает ярко-желтое окрашивание (pH 5,5).
Для проверки молока из каждого соска вымени коров, подозрительных на заболевание маститом, на кружок фильтровальной бумаги наносят 4 капли раствора бромтимолового синего. На каждое пятно индикатора наносят по капле молока из каждого соска. По изменению окраски, как указано выше, делают заключение о мастите отдельных частей вымени. Бумажки с нанесенным индикатором сохраняют в плотно закрытой банке (предохранять от аммиачного воздуха скотного двора).
Индикатор бромтимоловый синий изменяет окраску от темно-синей (pH 7,5) через зелено-синюю (pH 7,0), желто-зеленую (pH 6,5) до желтой (pH 5,0).
Хлорсахарное число. В молоке здоровых коров хлор-сахарное число не превышает 4. Определяют процентное содержание хлора и молочного сахара, вычисляют соотношение между ними и его умножают на 100.
Каталазное число. Натуральное свежее молоко от здоровых коров имеет каталазное число 2,5—3,0 мл, от коров, больных маститом, — 8—15 мл.
Соотношение K/Na. В сборном натуральном молоке среднее содержание К составляет 1,488 мг/л, Na —
0,501 мг/л, соотношение—^3. В молоке коров, больных
Na
маститом, соотношение — может быть ниже 2.
Ma
Электропроводность молока. В ранней стадии заболевания коров маститом, когда еще при осмотре животных следов болезни не обнаруживается, в молоке заметно повышается содержание солей, что резко изменяет его электропроводность.
374
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКТИВОВ
Дистиллированная вода. Для приготовления реактивов используют только дистиллированную воду, позтому в тексте слово дистиллированная не указывается. В особых случаях пользуются бидистил-лятом. Для приготовления титрованных растворов щелочей, тиосульфата натрия применяют дистиллированную воду, свободную от углекислоты.
Для удаления углекислоты воду в большой колбе кипятят в течение 30 мин, доводя до бурного кипения. Окончив нагревание, колбу закрывают пробкой со вставленной согнутой под острым углом стеклянной трубкой и с насаженной на ней хлоркаль-циевой, наполненной натронной известью, или колбу соединяют резиновой трубкой с промывной склянкой Тищенко, содержащей 20%-ный раствор NaOH. На титрование 250—300 мл свободной от CO2 воды с двумя каплями фенолфталеина не должно идти более 0,2—0,3 мл 0,1 н. NaOH.
Для определения содержания микроэлементов применяют воду, дважды перегнанную в специальном приборе на шлифах из химически устойчивого стекла ТУ. Первые порции дистиллята отбрасывают, воду собирают в полиэтиленовые сосуды с пробками и хранят в них.
Титрованные растворы из фиксанала. Фиксанал представляет собой запаянную ампулу с концентрированным титрованным раствором или точной навеской сухого реактива в таком количестве, что при разведении водой содержимого точно до объема 1 л получают 0,1 н. или 0,01 н. раствор. При разбавлении водой до другого определенного объема можно получить раствор любой нормальности. Обмывают поверхность ампул фиксанала (рис. 116) теплой водой или спиртом, смывают надпись. В мерную калиброванную колбу на 1 л вставляют специальную воронку 2 со стеклянным бойком, заканчивающимся сверху острием. Ампуле дают осторожно упасть в воронку так, чтобы ударом о заостренный конец бойка разбилось тонкое дно углубления ампулы. Приподняв немпого ампулу острым концом второго божа, легким ударом пробивают боковое углубление ампулы. Содержимое вытекает в мерную колбу. Через верхнее отверстие ампулы ополаскивают ее тщательно внутри промывалкой со специальным тонким наконечником. Доливают до метки мерную колбу водой и тщательно перемешивают содержимое.
Содержимое ампул с сухим препаратом переносят в мерную колбу таким же образом. После тщательной промывки ампулы в мерную колбу добавляют до 0,5 объема воды, перемешивают содержп-
Рис. 116. Вскрывание ампулы фиксанала: /— колба; Z — воронка.
375
мое до полного растворения препарата, доводят водой до метки и тщательно перемешивают.
