Методы анализа молока и молочных продуктов - Инихов Г.С.
Скачать (прямая ссылка):
В пробирку добавляют 0,5—1 мл воды и столько же спирта. Если раствор остается прозрачным, солей свинца нет. Появление мути или осадка указывает на присутствие свинца (PbSO4). В случае появления осадка или мути сернокислый свинец отделяют центрифугированием в пробирке, сливая раствор с осадка в маленькую фарфоровую чашку. Осадок промывают в пробирке 2—3 раза 10 мл разбавленного водой этилового спирта (1:1). После центрифугирования промывные воды сливают в
370
ту же маленькую фарфоровую чашку. В полученном растворе I определяют содержание меди.
Осадок сернокислого свинца в пробирке обрабатывают 1 мл насыщенного уксуснокислого натрия, подкисленного уксусной кислотой до слабокислой реакции по лакмусу, нагревают на водяной бане 5—10 мин, разбавляют 1 мл воды и центрифугируют. Раствор фильтруют в мерный цилиндр емкостью 10 мл. Пробирку и фильтр промывают несколько раз небольшими порциями воды, собирая промывные воды в этот же цилиндр. Раствор в цилиндре доливают водой до 10 мл, хорошо перемешивают. Этот раствор II используется для количественного определения свинца. Для качественного определения берут 5 мл раствора в пробирку, добавляют 3 капли 10%-ного раствора KsCr2O7, хорошо перемешивают. Если раствор остается прозрачным, считают свинец необнаруженным. Появление мути (PbCrO4) указывает на наличие свинца.
Количественное определение свинца. 1 мл раствора Il из цилиндра пипеткой переносят в плоскодонную пробирку— с делением на 10 мл. В три такие же пробирки вносят стандартный раствор свинца (реактив 122, б) в количестве 0,5, 0,75 и 1 мл, что соответствует 0,01, 0,015 и 0,02 мг свинца.
В пробирки с типовым раствором добавляют по 0,1 мл насыщенного раствора уксуснокислого натрия, слабо подкисленного уксусной кислотой. Затем во все пробирки приливают воду до деления в 10 мл и перемешивают. После этого вносят по 3 капли 5%-ного раствора КгСг207, вновь перемешивают и через 10 мин производят сравнение мутности в испытуемом растворе с мутностью типовых растворов.
Если для определения берут больше или меньше 1 мл раствора свинца, то в пробирки добавляют количество уксуснокислого натрия, соответствующее содержанию его в объеме взятого испытуемого раствора. Несоблюдение этого условия приводит к неправильным результатам.
Определение содержания меди. Раствор I выпаривают досуха на водяной бане, охлаждают и добавляют 1—5 капель 20%-ного раствора аммиака. Появление слабо-голубого окрашивания указывает па наличие меди (менее 0,1 мг) во взятой навеске. При более сильном окрашивании добавляют 1—2 мл дистиллированной воды. Если
371
раствор мутнеет, это указывает на присутствие гидрата окиси железа. Тогда добавляют столько же 25% -ного раствора аммиака, как в первый раз, и осадок отделяют центрифугированием, сливая раствор в мерный цилиндр на 10 мл.
Осадок в пробирке промывают 1—2 раза небольшим количеством дистиллированной воды, содержащей 1% аммиака. Промывные воды сливают в тот же цилиндр, доводят до метки дистиллированной водой. Часть или весь раствор в зависимости от качественной реакции на медь переносят в пробирку для колориметрирования с отметкой на 10 мл.
В три такие же пробирки наливают типовой раствор меди (реактив 43, а) в количестве 0,1 мл, 0,3 мл и 0,5 мл (соответствует 0,1; 0,3 и 0,5 мг меди). Во все четыре пробирки добавляют по 2 мл 25% -ного раствора аммиака и дистиллированной воды до объема в 10 мл и, хорошо перемешав, сравнивают интенсивность окраски испытуемого раствора с окраской типовых растворов.
ОБНАРУЖЕНИЕ МОЛОКА. ПОЛУЧЕННОГО ОТ ЖИВОТНЫХ, БОЛЬНЫХ МАСТИТОМ
_ю
V
Рис. 115. Пробирки для центрифу гирования.
Лейкоцитная проба
В центрифужные пробирки (рис. 115) наливают 10 мл профильтрованного через вату молока и, закрыв пробками, центрифугируют 5 мин (1200 об/мин). В молоке здоровых коров обнаруживают только следы желтоватого осадка. Если осадок в пробирке занимает значительный объем, то проба молока подозрительна на воспаление вымени (мастит) и требуется микроскопическое исследование.
Платиновой петлей берут небольшое его количество, делают мазок на покровное стекло, фиксируют и окрашивают как при бактериологических исследованиях.
372
Определение содержания дезоксинуклеиновой кислоты
Теоретическое обоснование. Метод основан на определении дезоксинуклеиновой кислоты (ДНК), содержащейся преимущественно в ядре клеток лейкоцитов.
Методика определения. 4 мл молока отмеривают пипеткой в центрифужную пробирку на 15 мл, добавляют 5 мл насыщенного на холоду раствора KCl. Смешав, центрифугируют 20 мин (2500 об/мин). После охлаждения содержимого пробирки до уплотнения слоя сливок, обезжиренное молоко сливают, задерживая палочкой и оставляя в пробирке слой сливок. Остаток в пробирке промывают два раза 95%-ным горячим этиловым спиртом (70—75°С), центрифугируя по 3 мин каждый раз, удаляя спиртовой раствор.
После этого производят гидролиз ДНК. 4 мл 5%-ного раствора трихлоруксусной кислоты прибавляют к остатку в центрифужной пробирке и, закрыв пробкой, нагревают 15 мин в водяной бане при 90° С. В пробку в качестве холодильника вставляют стеклянную трубку длиной 25—30 см. По охлаждении гидролизат полностью сливают в пробирку, добавляют 2 мл концентрированной HCl и 2 мл свежеприготовленного раствора индола (реактив 98), закрыв пробкой с трубкой-холодильником, нагревают 10 мин в кипящей бане.
