Избирательная токсичность. Физико-химические основы терапии - Альберт А.
ISBN 412-26010-7
Скачать (прямая ссылка):
53 эстрогенов, было показано в ранних работах Jensen, Jacobson. (1962) при изучении специфического связывания 17?-[3H]~ эстрадиола с различными тканями. В фаллопиевых трубах существуют места избирательного связывания прогестерона.
Эти комплексы стероид — рецептор образуются в ядрах или проникают в них и связываются с хроматином (в отсутствие белка связывания стероидов не происходит). При этом депрес-сируется кодон ДНК, и на нем начинает синтезироваться мРНК. В цитозоле рибосомы синтезируют по этой мРНК определенный белок. Все это происходит очень быстро, и физиологический ответ на гормон может проявиться уже через час. Известны и другие типичные примеры индукции синтеза характеристичных белков [Cohen, 1966].
Основной андрогенный стероид, дигидротестостерон, избирательно связывается с кислыми белками в андрогензависимых тканях (например, в предстательной железе) [Anderson, Liao,. 1968]. В свою очередь кортикостероиды связываются со специфическими белками в цитоплазме клеток печени и других органов. Эти комплексы проникают в ядра, где связываются с ДНК, что приводит к синтезу специфических мРНК (их образование может быть подавлено актиномицином D), на которых и синтезируются в цитоплазме характеристичные ферменты [Sekeris„ 1971]. По аналогичному механизму осуществляется диуретическое действие альдостерона [Edelman, Bogoroch, Porter, 1963].
2,3,7,8-Тетрахлордибензо-пара-диоксин (2.28а), широко известная примесь в трихлорфеноле, захватывается рецепторными белками в цитозоле печени и переносится в ядро, где он индуцирует цитохром Р-450 и арилгидроксилазу. Эти его свойства не являются вредными, но у некоторых линий мышей диоксин вызывает экспрессию генов, приводящую к дегенерации, делению и дифференциации клеток — так называемую «поддерживающую» патологию. Возможно, в этих процессах участвуют нормальные системы клеточной регуляции, но полной уверенности в этом нет. С аналогичными рецепторами взаимодействует большинство веществ, в молекулах которых имеется плоская поверхность площадью около 0,3X1 нм [Poland, Knutson, 1982]. Диоксин индуцирует также и 6-левулинсинтетазу, фермент, определяющий скорость биосинтеза порфиринов. Степень токсичности диоксина для человека точно не установлена, возможно, что ее сильно преувеличивают. Однако учитывая его высокую токсичность для некоторых линий мышей, диоксин в настоящее время считают наиболее токсичным из всех низкомолекулярных соединений [Whitlock, Israel, 1964].
О
аҐ^Ґ Y4Ici
о
Диоксин (2.28а)
54 Е. Специальные рецепторы для антибиотиков. Использование в медицинской практике антибиотиков — в 1941 г. пенициллина, а в последующие 8 лет левомицетина и тетрациклинов, открыло новые перопективы для химиотерапии. Было установлено, что и для антибиотиков существуют рецепторы. От обычных синтетических лекарственных веществ большинство антибиотиков отличается сложным стереохимическим строением. При взаимодействии с живой материей именно это свойство делает терапевтическое применение антибиотиков столь эффективным, но, к сожалению, не всегда избирательным.
Ж. Нерецепторное действие. Мишенью для. лекарственного вещества может быть не только рецептор. В клинической практике для лечения отравлений неорганическими соединениями обычно применяют хелатирующие агенты, например унитиол (11.23) при отравлениях препаратами мышьяка, сурьмы, ртути и золота и тетацин-кальций (11.27) при отравлениях соединениями свинца (разд. 11.6). Так как эти металль; в норме в организме не встречаются, их нельзя рассматривать как рецепторы.
3. Выделение молекул, содержащих рецепторы. Если рецептор расположен на макромолекуле, то его выделение в чистом виде так же невозможно, как и выделение активного центра фермента. Как указывается в разд. 2.1, в действительности многие рецепторы — активные центры ферментов. Поэтому, за исключением случаев, когда рецептор является малой молекулой (разд. 2.3), задача сводится к выделению и очистке макромолекулы, содержащей рецептор. Для этого гомогенизированную ткань инкубируют с меченым агонистом или антагонистом природного лиганда (например, нейромедиатора). Если связь данного лиганда с рецептором прочна, он может служить индикатором при очистке и концентрировании рецепторной молекулы. На последних стадиях очистки этот лиганд можно заменить другим, менее прочно связывающимся с рецептором, или же удалить его диализом или аффинной хроматографией.
Для изучения рецепторов используют и молекулярные зонды. Они представляют собой малые молекулы с каким-либо выраженным и измеряемым физическим свойством — флюоресценцией, поглощением в видимой области. Необходимым условием является изменение физических характеристик при адсорбции на рецепторе. Применяют также ядерный магнитный и электронный парамагнитный резонансы, последний с использованием нитроксидных радикалов. Энергия изучения флюоресцентного зонда зависит от полярности места связывания и может передаваться от атомов, входящих в связывающее место, к молекуле зонда и изменять параметры ее флюоресценции. Для холинорецептора флюоресцентным зондом служит перхлорат триметиламмоний этиламида 1-диметиламинонафталин-5-суль-фокислоты. Возможность его использования для идентифика-дии и анализа рецептора подтверждается тем, что он конку-
