Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы - Зайцев С.В.
ISBN 5-211-02349-8
Скачать (прямая ссылка):
систем, по нашему мнению, является именно отношение [R]o/K (Зайцев с соавт., 1986а; Зайцев, 1987; Зайцеь с соавт., 1987).
1.8. КОНСЕРВАТИВНОСТЬ В РЕЦЕПТОРНО-ФЕРМЕНТНЫХ СИСТЕМАХ
Важным свойством рецепторно-ферментных систем является их консервативность в отношении концентраций ряда параметров. Выше мы уже говорили о различных механизмах инактивации и регуляции системы усиления сигнала, приводящих в конце концов к возвращению концентрации вторичных посредников к исходной. Однако консервативность рецепторно-ферментных систем выходит за рамки поддержания одной клеткой концентраций ряда метаболитов.
Изучение рецепторно-ферментных систем одного типа у людей и отдельных животных позволило установить наличие консервативности совсем другого рода.
1. Исследование параметров опиоидных рецепторов ([R]o и К) мозга отдельных животных, подвергшихся наркотизации (животным длительное время вводили морфин), показало, что при значительной вариации индивидуальных параметров [R]o и К отмечалось относительное постоянство (с точностью до 30%) их отношения [R]o/K (Зайцев с соавт., 1986а).
2. Проведенное нами (Шевченко с соавт., 1988) исследование количественных зависимостей скорости и степени агрегации тромбоцитов от концентрации PGE показало, что значения Ю50 (концентрации PGEi, при которой наблюдается 50%-е ингибирование агрегации) для тромбоцитов разных индивидуумов различны: в наших экспериментах они изменялись в пределах 17-100 нМ PGEi. Значения параметров связывания PGEi с рецепторами тромбоцитов тоже резко отличались. Однако число молекул PGEi, специфически связавшихся с одним тромбоцитом при концентрации PGE], равной IC50, оказалось практически постоянной величиной для тромбоцитов разных индивидуумов: 10±2 молекулы PGEi на тромбоцит (рис. 1.5).
Полученные результаты можно объяснить, если полагать, что несмотря на различия параметров [R]o и К у разных людей или отдельных животных, количественные характеристики пострецеп-
10
«а
* -to1? v *-ч с сг
. 1
0 2
_J______________I_I__L.
М 80
list}, нМ
Рис. 1.5. Зависимость количества молекул PGEi, связанных с одним тромбоцитом (В) при концентра ции простагландина PGEi, равной 1С5о> от IC50, определенных для скорости агрегации (1) и степени агрегации (2) (по данным работы Шевченко и др., 1988)
торных -репьев клеточного ответа консервативны, т.е. мало отличаются друг от друга внутри данной группы индивидуумов или данной группы животных. При этом поскольку для опиоидных рецепторов животных имеет место феномен “резерва'1 рецепторов (Chavkin, Goldstein, 1984), то, как уже говорилось в предыдущем разделе, клеточный ответ определяется отношением [R]0/K. Следовательно, при постоянстве этого параметра у различных животных при данной фиксированной дозе наркотического соединения степень заселенности опиоидных рецепторов у разных животных будет близкой. С другой стороны, “избыточные” рецепторы для PGE на тромбоцитах отсутствуют (Шевченко с соавт., 1988). Следовательно, в етом случае заселенность рецепторов определяется как их концентрацией, так и сродством к лиганду. Помимо этого, как мы видим, в тромбоцитах имеет место адаптация рецепторного аппар&га человека к индивидуальной концентрации простаноида.
II. ДИСКРИМИНАЦИЯ МЕХАНИЗМОВ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПАРАМЕТРОВ КОМПЛЕКСООБРАЗОВАНИЯ В СИСТЕМАХ С ГЕТЕРОГЕННОСТЬЮ РЕЦЕПТОРОВ
При количественном изучении взаимодействия лигандов с центрами связывания ключевыми проблемами являются дискриминация моделей процессов комплексообразования, а также определение значений параметров модели, адекватно описывающей процесс, и оценка их качества.
Процесс комплексообразования лиганда L с рецепторами Ri описывает следующая схема:
L + Ri^LRi, (2.1)
где LR, - комплекс лиганда с i-рецептором. В условиях равновесия процесс (2.1) с физико-химической точки зрения может быть охарактеризован параметром Kj:
[L] • [Ri] [LRi]
В случае если К; зависит от концентрации лиганд-рецепторных комплексов LRi, в процессе комплексообразования лиганда с рецепторами имеют место кооперативные взаимодействия. При независимости Ki от LRi, параметр Ki соответствует константе диссоциации лиганд-рецепторного комплекса. Последнее в свою очередь позволяет описать процесс комплексообразования лиганда L с рецепторами Rj выражением, аналогичным уравнению Ленг-мюра в теории адсорбции или уравнению Михаэлиса-Ментен в ферментативной кинетике:
= (2'2) где [Rj]0 - общая концентрация рецепторов Ri в системе.
(2.1а)
