Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Медицина -> Венгеров Ю.Я. -> "Инфекционные болезни национальное руководство" -> 45

Инфекционные болезни национальное руководство - Венгеров Ю.Я.

Венгеров Ю.Я. Инфекционные болезни национальное руководство — ГЕОТАР Медиа , 2009. — 1049 c.
ISBN 978-5-9704-1000-4
Скачать (прямая ссылка): infecionniyebolezni2009.djvu
Предыдущая << 1 .. 39 40 41 42 43 44 < 45 > 46 47 48 49 50 51 .. 637 >> Следующая

Внесение биологического субстрата, содержащего антиген (ф), инкубация
3 Отмывка
? ? ?
5 Отмывка
? ? ?
Внесение меченных ферментом антител (^|), инкубация
Добавление субстрата/хромогена (светлые кружки),
ферментативная реакция — активация (тёмные кружки)
7 Фотометрирование субстрата
Х=492 нм ОФД Х=449 нм 5-АС
¦ ¦ ¦
і ¦ І
Отмывка
і I
¦ ¦ ¦
5 Отмывка
О • • •
Антиген (ф) связан с твёрдой фазой на дне лунки полистиролового планшета
Внесение содержащей антитела ( J\) сыворотки крови больного, инкубация
Внесение меченной ферментом антиглобулиновой сыворотки (^), инкубация
Добавление субстрата/хромогена (светлые кружки), ферментативная реакция — активация субстрата (тёмные кружки)
-I_______________1 1 J___________і і і 1-і.
ГО
Фотометрирование - определение 7 положительного результата
"'А Б
Рис. 5-18. Схема проведения иммуноферментного анализа. С дг — концентрация антигена, АГ — антиген, ИФА — иммуноферментный анализ. А — схема проведения прямого твердофазного ИФА (сэндвич-метод), определение антител в биологическом субстрате. Концентрация антигена в клиническом материале прямо пропорциональна интенсивности окрашивания лунки полистиролового планшета. Б — схема проведения прямого твердофазного ИФА (антиглобулиновый метод), определение антител в сыворотке крови больного.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
YYYYY
;
Антитела (Y) иммобилизированы на твёрдой фазе — на дне лунки полистиролового планшета
Внесение биологического субстрата, содержащего антиген (ф), и меченного ферментом антигена (J), инкубация
Антиген (^) иммобилизирован на твёрдой фазе — на дне лунки полистиролового планшета
Внесение исследуемой сыворотки крови больного (А) и меченных ферментом антител (X )> инкубация
3 Отмывка
Антиген, находящийся в биологическом субстрате, конкурируя с конъюгатом, занял большинство связей иммобилизированных антител
3 Отмывка
Антитела сыворотки крови больного, конкурируя с конъюгатом, образуют комплекс «антнген-антнтело»
о о о
Добавление субстрата/хромогена (светлые кружки); ферментативная реакция — активация субстрата (тёмные кружки)
о о о о
о о о о 0 ° Добавление субстрата/хромогена
о (светлые кружки); ферментативная реакция — активация субстрата (тёмные кружки)
0 0 и
5
^ Фотометрирование - концентрация антигена в клиническом материале обратно пропорциональна интенсивности окрашивания лунки полистиролового планшета
В
Рис. 5-18. Окончание. В — схема проведения конкурентного ИФА, определение антигена в биологическом субстрате определение антител в сыворотке крови больного.
Фотометрирование - концентрация антигена в клиническом материале обратно пропорциональна интенсивности окрашивания лунки полистиролового планшета Г
Г-
• схема проведения конкурентного ИФА,
со
со
ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
84 МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
Таблица 5-4. Четырёхпольная таблица для расчёта клинических характеристик диагностического теста
Скрининговый тест Результат Болезнь Всего
присутствует отсутствует
Положительный а ь a+b
Отрицательный с d c+d
Всего а+с b+d a+b+c+d
Примечание: а — число истинно положительных результатов; b — число ложноположительных результатов; с — число ложноотрицательных результатов; d — число истинно отрицательных результатов.
Скрининг — это не диагностическая процедура, поэтому необходимо использование подтверждающих тестов.
Иммунный блоттннг
ИБ используют для типирования бактериальных и вирусных антигенов, а также для выявления антител к отдельным антигенным детерминантам возбудителя. ИБ применяют в качестве верифицирующего теста, например, при диагностике ВИЧ-инфекции.
В основе метода — электрофоретическое разделение анализируемого материала в зависимости от молекулярной массы с последующим переносом его на твёрдый носитель. Выпускаемые для практики здравоохранения тест-системы для ИБ содержат полоски-реплики, на которых уже фиксированы антигены ВИЧ. На полоску-реплику наносят исследуемую сыворотку крови, инкубируют её для образования комплекса «антиген-антитело», который визуализируют по принципу ИФА с использованием конъюгата (меченные ферментом антивидовые антитела к иммуноглобулинам человека) и субстрата-хромогена. При наличии в исследуемой сыворотке крови антител к ВИЧ на полоске-реплике в определённых зонах, соответствующих отдельным антигенам, появляются окрашенные полосы (рис. 5-19).
Предыдущая << 1 .. 39 40 41 42 43 44 < 45 > 46 47 48 49 50 51 .. 637 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed