Руководство по экспериментальной хирургии - Шалимов С.А.
Скачать (прямая ссылка):
В связи с тем что сенсибилизация животного сывороточными белками приводит, как правило, к поражению сосудистой системы и крайне редко проявляется какой-либо органной патологией, а у собак этим способом не удается воспроизвести и заболевания сосудов, большее распространение получил другой прием: животное сенсибилизируют экстрактами тех органов, тканей или клетками, поражение которых стремятся получить, ибо, как показали A. Kment и соавт. (1976), эти антигены фиксируются в гомологичных органах. Многие авторы сочетают введение антигена с инъекцией адъювантов, в частности адъюванта Фрейнда, но, по нашим данным, по крайней мере у собак, это почти во всех случаях вызывает адъювантную болезнь* весьма отрицательно влияющую на результаты эксперимента, хотя иммунопатологические проявления в исследуемом органе, действительно, выражены более четко.
Кроме того, мы хотели бы подчеркнуть, что сами по себе изменения в органах, полученные подобным путем, вряд ли имеют самостоятельное значение, тем более что они проявляют к тому же явную тенденцию к самоизлечению. Но в сочетании с патологическим процессом, вызванным другими методами, они создают необходимый фон, отягощающий течение заболевания и влияющий на его исход, что безусловно сближает модель с клиникой: у больных в большинстве случаев обнаруживают в сыворотке и тканях противоорганные антитела и иммунные комплексы, роль которых в патологии пока еще до конца не раскрыта.
Для иммунизации в каждом отдельном случае используют водно-солевой антиген соответствующего органа, содержащий оптимальное для данного вида животных количество белка в каждой порции. Требование точной дозировки белка должно соблюдаться неукоснительно, ибо при недостаточном или избыточном количестве будут получены ложноотрицательные результаты. По нашим данным, для собак оптимальная доза белка на одну инъекцию составляет 1,7—2,5 мг/кг. Антиген вводят подкожно, в брюшную полость или в подушечки (мякиши) конечностей. В отличие от моделирования аллергических реакций в данном случае внутривенное введение антигена дает худшие и слабовоспроизводимые результаты. Если предполагается имму-
151
низация двумя и большим числом антигенов, их можно вводить одновременно, но обязательно разными шприцами и в разные участки те та животного.
Кратность введения антигена и промежутки между инъекциями также оказывают определенное влияние на результат эксперимента. По нашим данным, у собак оптимальной схемой является 3—6-кратное введение с интервалом 5—7 дней при увеличении количества белка на 25—50% в каждой очередной порции. Последующее воздействие на орган или учет результатов иммунизации лучше всего проводить в интервале 3—7 дней после последнего введения антигенов. При отсутствии дополнительных воздействий возникшие иммунопатологические проявления прогрессивно уменьшаются по мере увеличения срока наблюдения и спустя 2—3 мес в структурах органа видны лишь остаточные проявления дистрофии или отдельные очаги клеточной пролиферации и метаплазии эпителия.
Для иллюстрации опишем ряд моделей заболеваний, полученных методом иммунизации животных гомологичным алло- и ксеногенным антигеном с адъювантом или без него. Так,
В. И. Русаков и соавт. (1980) получили выраженный панкреатит, иммунизируя животных 3-кратно в течение 5 сут антигенной смесью, состоящей из 50% гомогената поджелудочной желе-зы, 0,6—0,7% полиакриловой кислоты и полного адъюванта Фрейнда23. В. Б. Золотаревский и соавт. (1972), длительно иммунизируя кроликов гомогенатом печени, наблюдали развитие гепатита, в основных морфологических чертах сходного с гепатитом человека. D. Pekovic и соавт. (1977) наблюдали у кроликов развитие пульпита через 23 дня после 3-кратного (с интервалом
6 дней между инъекциями) подкожного или комбинированного внутрибрюшного и подкожного введения 20% суспензии гомологичной пульпы зуба в дозе 0,5 мл/кг в сочетании с полным адъювантом Фрейнда.
А. С. Капланский и соавт. (1961) моделировали у кроликов миокардит с последующим развитием эндокардита, тромбоэндо-кардита и очагового склероза путем иммунизации антигенами сердечной мышцы в сочетании со стрептококковой вакциной и антигеном подкожной соединительной ткани. В. А. Фролов и соавт. (1979) в опытах на морских свинках, Н. А. Терехова-Уварова (1982) — на кроликах, а К. Schenk и соавт. (1974) — на мышах установили, что типичные морфологические признаки миокардита возникают и при иммунизации животных только водносолевыми экстрактами сердечной мышцы, в том числе и в сочетании с адъювантами. Наблюдения, проведенные в нашей лаборатории, показали, что у собак существенные структурные изменения эндо- и миокарда (рис. 54, 55) возникают как при вве-
23 Русаков В. И., Во лощен ко О. И., Чернов В, Н., Тума-с о в А. В, Способ моделирования панкреатита. Авторское свидетельство № 892465. Бюл., № 47, 1981.
152
Рис. 54. Миокардит у собаки, развившийся после введения вакцины БЦЖ-
Окраска гематоксилином и эозином. Х256.
Рис. 55. Эндокардит у собаки, развившийся после введения вакцины БЦЖ~
Окраска гематоксилином и эозином. Х256.
