Руководство по экспериментальной хирургии - Шалимов С.А.
Скачать (прямая ссылка):
А. А. Дюжиков и соавт. (1977) 20 разработали следующую методику моделирования облитерирующего эндартериита с использованием активной реакции Артюса: 0,9—1,0 г внутренней оболочки аорты вносят в 4—5 мл изотонического раствора хлорида натрия и добавляют 8,3 мг трипсина; доливая 3,8% раствор буры, доводят его pH до 8,0; полученную смесь инкубируют 3 ч при +32°С, периодически контролируя и поддерживая pH раствора на исходном уровне; в течение 30 мин выдерживают смесь при +60°С, центрифугируют 30 мин при 15 000 об/мин и надоса-дочную жидкость смешивают с равным объемом адъюванта Фрейнда (ланолиновое и вазелиновое масло, смешанные в соотношении 1:2 с добавлением 20 мг/мл сухой вакцины БЦЖ). На задние конечности животного на весь период сенсибилизации накладывают эластичные манжеты, сжимающие их при давлении? 25 мм рт. ст. и создающие застойную венозную гиперемию. Сразу после наложения манжет в мякиши всех 4 конечностей вводят полученный антиген в дозе 0,5—0,7 мл/кг (всего), повторяют инъекцию через 7 дней, а еще через 3 дня такое же количество антигена вводят интраабдоминально в качестве разрешающей дозы. Заболевание развивается, по данным авторов, через 20— 30 дней после наложения манжет и первой инъекции антигена.
При моделировании пассивной реакции Артюса подопытному животному вводят в определенных количествах соответствующие преципитирующие антитела внутривенно, а разрешающую дозу
20 Дюжиков А. А., Поляк А. И., С и з я к и н а Л. П., 3 а х а р ч е н-к о Е. П. Способ моделирования облитерирующего эндартериита. Авторское-свидетельство № 679207, 1979, Бюл., № 30.
10*
14?
внутрикожно (прямая реакция) или антитела вводят внутрикож-но, а разрешающую дозу — внутривенно (обратная реакция). Преимущество пассивной реакции Артюса в возможности7более точной дозировки антител и антигена. Поэтому в ряде случаев ее используют и в диагностических целях, когда антитела и разрешающую дозу аллергена вводят внутрикожно21.
В качестве примера использования пассивной реакции Артюса для моделирования заболеваний приводим данные G. Freitag и соавт. (1974), наблюдавших развитие у подопытных животных иммунного инсулина после введения им антисыворотки к инсулину, содержащей в высоком титре противоинсулиновые преци-нитирующие антитела.
Достаточно близка по способу воспроизведения к реакции Артюса, но отличается от нее по механизмам развития реакция Санарелли — Швартцманна. Известны две формы этой реакции: генерализованная описана Г. Санарелли (1923) и местная — Г. Швартцманном (1928). Поскольку при развитии местного феномена могут наблюдаться как общие, так и местные проявления, в 1932 г. обе эти реакции были объединены под общим названием «феномен Санарелли — Швартцманна22, но с учетом того, что в деталях патофизиология локальных и общих проявлений феномена все же отличается [Kesztyus L. et al., 1974].
Принято считать, как полагал и сам Г. Швартцманн, что возникновение этого феномена не связано с реакциями гипер-чувствительности и вообще не имеет отношения к проявлениям иммунитета. Возможно, это действительно так, ибо, как известно, реакция возникает, если разрешающую дозу антигена, представляющего собой взвесь грамотрицательных бактерий, среду, где они культивировались, или липополисахарид, входящий в состав их оболочки, ввести животному спустя всего 24 ч после однократной предварительной инъекции того же антигена, что есть еще в фазе иммунологического распознавания.
Патогенез феномена Санарелли — Швартцманна до конца не раскрыт. Тем не менее установлено, что в основных проявлениях он сходен с клиникой эндотоксинового или септического шока, наблюдающегося при гнойно-септических заболеваниях, вызванных грамотрицательными бактериями. Учитывая, что в обоих случаях в основе поражения лежит ДВС [Юрлов В. М., 1968; Персианинов Л, С. и др., 1970; Ярошенко И. Ф., 1970; Каныни-на Н. Ф., 1972], а удельный вес гнойно-септических заболеваний и послеоперационных осложнений в хирургической клинике возрастает, эти исследования должны проводиться в лабораториях экспериментальной хирургии. Методы моделирования этого синдрома приведены в главе 2-й.
21 Иммунология. Справочник. — Киев: Наукова думка, 1981, с. 93.
22 Ц и т. :п о Юрлов В. М. Синдром Санарелли — Швартцмана в клинике внутренних болезней. — В кн.: Патология свертывания крови в терапии. Куйбышев, 1968, с. 175—181.
148
Для воспроизведения локального феномена Санарелли — Швартцманна, сначала антиген (например, 0,1—0,2 мл фильтрата бактериальной культуры) вводят внутрикожно, а через 24— 48 ч — знутривенно (в дозе 0,1—0,5 мл/кг) однократно. На месте внутрикожной инъекции появляются инфильтрат и воспалительная реакция, в течение нескольких часов переходящая в некроз, сопровождающийся кровоизлияниями в окружающих тканях.
Однако у гнотобионтов локальный феномен не воспроизводится [Чахава О. В. и др., 1975]. Последнее обстоятельство все же позволяет усомниться в справедливости мнения о его неиммунной природе.
В качестве примера использования локального феномена Санарелли— Швартцманна для моделирования заболеваний приводим описание модели острого тромбофлебита, предложенной А. И. Михневым (1975).
