Руководство по экспериментальной хирургии - Шалимов С.А.
Скачать (прямая ссылка):
В число обязательных методов исследования крови входят: определение общего числа эритроцитов и лейкоцитов, скорости оседания эритроцитов, цветного показателя, числа тромбоцитов и содержания гемоглобина, а также определение показателей, характеризующих состояние свертывающей и противосверты-вающей систем крови унифицированными методами, и изучение тромбоэластограммы.
Опыт работы показывает, что наиболее информативными методами изучения коагулирующего потенциала крови является:
107
время свертывания крови по Ли—Уайту; время рекальцификации плазмы по Бергергоф и Рока в модификации В. П. Балуды и соавт; толерантность плазмы к гепарину по Сиггу; потребление протромбина по Бринкхаузу в модификации М. С. Мачабели; содержание свободного гепарина крови по Сирмаи в модификации Центрального НИИ гематологии и переливания крови М3 СССР; протромбиновое время по Квику в модификации Б. А. Кудряшова; тромбиновое время по Сирмаи в модификации Центрального НИИ гематологии и переливания крови М3 СССР; концентрация фибриногена по Р. А. Рутберг с модификацией расчета по М. А. Котовщиковой и Б. И. Кузнику; определение фибриногена Б по Кумайну и Лайонсу в модификации Смит; активность фибриназы по Ж. Н. Руказенковой и
С. С. Хнычевой; фибринолитическая активность крови и степень ретракции сгустка по М. А. Котовщиковой и Б. И. Кузнику; тромботест по Фуэнте Ита в модификации М. А. Котовщиковой; число тромбоцитов в мазках крови, окрашенных бриллиантовым крезиловым синим; содержание гемоглобина, исследованное гемиглобинцианидным методом с использованием фотоэлектрокалориметра [Котовщикова М. А. и др., 1961; Балуда В. П. и др., 1962, 1964; Довгялло Г. X. и др., 1969; Балуда В. П., Баркаган 3. С. и др., 1980, и др.]. Все эти методы технически весьма просты и легко доступны для освоения лаборанту со средним образованием.
Однако определение основных показателей коагулограммы этими методами требует довольно значительного времени, поэтому для ориентировки непосредственно во время операции или в ближайшие часы после ее окончания применяют метод тром-боэластографии.
Практика показывает, что для этой цели более всего пригоден четырехканальный тромбоэластограф отечественного производства «Тромб-2». При квалифицированном обслуживании он работает стабильно, дает сравнимые показатели, а техника проведения исследования проста и вполне доступна для лаборанта. Для получения объективных и сопоставимых результатов нужно пользоваться только цельной нестабилизированной кровью, причем время от взятия крови до начала исследования не должно превышать 3 с.
Показатели тромбоэластограммы рассчитывают (рис. 45) по методике, описанной в монографии Г. А. Даштаянца и соавт. (1972).
При расшифровке тромбоэластограммы определяют следующие показатели:
R — время реакции измеряют от начала записи тромбоэластограммы до появления ее амплитуды величиной 1 мм. Для перевода в минуты полученную длину в миллиметрах делят на скорость движения ленты. Это время определяет время образования нитей фибрина, хотя в целом это невидимая фаза свертывания крови.
108
Рис. 45. Расчет элементов тромбоэластограммы. Схема. Объяснения в тексте.
К — тромб оэл астографичес к а я константа тромбина соответствует второй фазе, отражающей неспецифическую бестромбоцитарную зону свертывания крови. Измеряют от конца зоны до амплитуды тромбоэластограммы, равной 20 мм.
Ма — максимальная амплитуда тромбоэластограммы отражает окончание продуктивной фазы свертывания, начало ретракции сгустка и фибринолиза.
t— специфическая константа коагуляции отражает период между окончанием видимого свертывания крови и началом ретракции сгустка.
Т — константа общего времени свертывания крови измеряется от начала записи тромбоэластограммы до ее максимальной амплитуды.
S — биологическая константа уплотнения сгуетка (синерезиса). Синерезис —это спонтанное выделение жидкости из гелей в процессе их уплотнения, измеряется от амплитуды 1 мм до максимальной амплитуды тромбоэластограммы.
Ci — индекс гиперкоагуляции определяют по фор-
г. Ма
муле: ы—В норме он равен 3—7, увеличение свидетельствует о гипер-, а уменьшение — о гипокоагуляции.
Приводим показатели тромбоэластограммы у беспородных собак по А. П. Кабану (1979) —R 2,8—7,5 мин; К 3,5—8,1 мин; t 8,3—16,1 мин; Т 14,8—29,2 мин; S 11,0—21,6 мин; R + K 7,1—» 14,6 мин; R/K 0,53—1,6 мин; Ма 40—60 мм; Е 66,6—2155 ед.; Ci 3,0—7,0 ед.; Ma/S 2,2—4,4 ед.
Следующий этап исследования крови — изучение содержания белка в сыворотке и соотношения белковых фракций. В нашей стране с 1972 г. в качестве основного метода количественного определения общего белка в сыворотке крови предложено поль-
109
зоваться биуретовой реакцией. Метод заключается в следующем. Готовят биуретовый реактив, состоящий из IV2 г сульфата меди и 6 г сегнетовой соли, растворенных в 500 мл воды с добавлением 300 мл 10% раствора едкого натра, свободного от карбоната натрия, и 1 г йодида калия; общий объем раствора доводят дистиллированной водой до 1 л.
К 1 мл исследуемого раствора, содержащего 1—10 мг белка, добавляют 4 мл биуретового реактива, перемешивают и оставляют на 30 мин при комнатной температуре. С помощью ФЭК или спектрофотометра определяют оптическую плотность раствора при длине волны 540—560 нм. Контролем служит проба,, содержащая 4 мл биуретового реактива и воды. Определяют концентрацию белка в пробе по калибровочной кривой, построенной с применением растворов, содержащих известные количества белка.
