Воспаление руководство для врачей - Серов В.В.
ISBN 5-25-02111-5
Скачать (прямая ссылка):
Чрезмерное повышение скорости ингибирования тромбина ATIII в присутствии каталитических количеств гепарина обусловлено связыванием этого полианиона с остатками лизина, аргинина и пролина, формирующими гепаринсвязывающий домен в антитромбине III [Liu С.-S., Chan J.-Y., 1987].
Для эффективного ингибирования тромбина КГ требуется в 10 раз больше гепарина, чем в случае с ATIII. Механизм и последствия связывания гепарина различны, так как связывание гепарина с кофактором не ведет к конформационному сдвигу в ингибиторе и является одностадийным процессом [Киреева Е. Г., Струкова С. М., 1987].
Дерматан-сульфат, входящий в состав гликозаминогликанов интимы сосудов, примерно в 1300 раз повышает скорость ингибирования фермента КГ, но не ATIII. В участке повреждения эндотелия эту реакцию могут ускорять фибробласты и гладкомышечные клетки благодаря экспрессии дерматан-сульфата на их поверхности [McGuire Е. A., Tollefsen D. М., 1987]. Молекулярной основой действия дерматан-сульфата служит специфическая олигосахаридная последовательность. Химотрипсин и катепсин G лейкоцитов также
73
ингибируются КГ, но реакция не ускоряется под влиянием гепарина или другого ГАГ.
Источником гепариноподобных ГАГ служат лаброцйты и клетки эндотелия. Последние синтезируют гепариноподобные ГАГ, содержащие критический пентасахарид, и экспрессируют их на поверхность клеток. Обнаружено около 50 тыс. участков на клетку, связывающих ATIII [Rosenberg R. D., Bauer К. А., 1987]. В создание этих участков вносят вклад и лаброцйты. Меченый гепарин, введенный внутривенно животным, депонируется лаброцитами, а при активации ПСС тромбином секретируется в кровоток и обнаруживается как в жидкой фазе, так и на люминальной поверхности сосудистой стенки [Умарова Б. А. и др., 1989]. По-видимому, освободившиеся из эндотелия или лаброцитов гепариноподобные ГАГ отвечают за активацию ATIII на поверхности эндотелия в участке его повреждения и образования прокоагулянтных протеаз. Нетром-богенность эндотелиального монослоя обусловлена в основном синтезируемыми этими клетками гепариноподобными ГАГ.
Биохимический уровень регуляции тромбообразования нарушается при воспалении вследствие повреждения серпинов, вызванного их протеолизом или окислением продуктами, секретируемыми патогенными бактериями или активированными лейкоцитами [Carrell R. W. et al., 1987 ]. Токсические метаболиты кислорода и эластаза нейтрофилов — важнейшие продукты, освобождаемые активированными лейкоцитами в очаге воспаления. Радикалы кислорода быстро окисляют метионин реактивного участка (аі-ИП) в метионина сульфоксид. Хотя в реактивном участке АТІІІ нет метионина, ингибитор инактивируется при окислении метаболитами кислорода, вызывающими изменение третичной структуры белков [Stief Т. W. et al.,
1988]. Окисленный аі-ИП теряет способность инактивировать эла-стазу нейтрофилов, которая разрушает соединительную ткань и подавляет ингибиторы протеиназ, включая ATII1 и С-1-ингибитор.
Ограниченный протеолиз пептидных связей эластазой или ме-таллопротеиназой бактерий вблизи реактивного участка АТІІІ приводит к изменению нативной «стрессированной» конформации ингибитора в «релаксированную» форму и полной его инактивации [Carrel R. W., Owen М. С., 1985]. Таким образом, при воспалении возникает дисбаланс между сериновыми протеиназами и их ингибиторами вследствие протеолиза ингибиторов, а также их окисления — специфического (по реактивному участку сі-ИП) или неспецифического, обусловленного нарушением нативной структуры белка. Массивная активация нейтрофилов при септицемии и эндотоксемии и нарушение механизмов регуляции протеиназ приводят к шоку и активации протеолитических систем, что проявляется в диссеминированном внутрисосудистом свертывании, освобождении кининов, активации системы комплемента и в конце концов к шоковому легкому.
Важную роль в качестве противовоспалительного фактора вне кровеносного русла, в органах и тканях, может играть низкомолекулярный продукт ограниченного протеолиза in vivo интер-а-инги-
74
битора трипсина — кислотостабильный ингибитор протеиназ, преимущественно эластазы и кининогеназы [Оглобина О. Г., 1988].
Менее 25% антитромбинового потенциала крови обеспечивает высокомолекулярный тетрамер а2-М, блокирующий активность тромбина, калликреина, плазмина и активатора плазминогена. Особенностью ингибирования аг-М является экспозиция специальной структуры при образовании его комплекса с протеиназой, которая «узнается» высокоаффинными рецепторами клеток макрофагально-моноцитарной системы, обеспечивающей клиренс комплекса, что свидетельствует о важной роли этой реакции в очаге скопления лейкоцитов и активных протеаз при воспалении [Веремеенко К. Н. и др., 1987; Straight Е. I. et al., 1988].
В регуляцию тромбообразования активно включается также протеин С, проявляющий антикоагулянтную и непрямую фибриноли-тическую активность [Esmon С; Т., 1987; Strickland D. К., Kessler
С. М., 1987]. Протеин С — витамин К-зависимый белок протромбинового комплекса плазмы — циркулирует в крови в форме двух-' цепочечного предшественника, активируемого тромбином. Способность тромбина активировать протеин С повышается при связывании его с тромбомодулином, мембранным белком эндотелия кровеносных и лимфатических сосудов всех органов, кроме головного мозга. Тромбомодулин образует с тромбином стехиометрический комплекс, который увеличивает скорость активации протеина С на три порядка в присутствии Са +. Тромбин, связанный с тромбомодулином, теряет способность свертывать фибриноген, активировать фактор V, индуцировать агрегацию тромбоцитов, но блокируется антитромбином III, что объясняется взаимодействием тромбомодулина с центром узнавания в молекуле тромбина и доступностью активного центра фермента для ингибитора.
