Гирудотерапия - Савинова В.А.
ISBN 5-225-04793-9
Скачать (прямая ссылка):
Гистаминоподобное вещество содержится в секрете слюнных желез пиявок. В месте приставления пиявок наблюдается типичная воспалительная реакция. Очевидно, такое проявление местного действия секрета пиявок можно отнести на счет гистаминоподобного вещества.
В 1884 г., как указывалось выше, из экстракта пиявок Хайкрафт впервые выделил вещество, замедляющее свертывание крови, позднее названное гирудином. До открытия гепарина экстракты из головной части пиявок широко использовались в качестве антикоагулянта. В опытах in vitro и in vivo было показано, что гирудин, будучи специфическим ингибитором фермента тромбина, образует с тромбином неактивный прочный нековалентный стехиометрический комплекс с константой диссоциации 6,3 х 10-13 М. Исключительно высокая специфичность гирудина по отношению к тромбину выгодно отличает его от других природных ингибиторов этого фермента: антитромбина III, гепарина и а2-макроглобулина. По сравнению с рядом синтетических ингибиторов тромбина гирудин представляет собой идеальный ингибитор этого фермента.
Ингибирование активности тромбина, проявляющееся в замедлении или полном блокировании свертывания фибрино-
19
2
гена,— не единственная функция гирудина. В его присутствии замедляется реакция активации тромбином факторов свертывания V, VIII, XIII. Гирудин препятствует реакции высвобождения и агрегации тромбоцитов, ингибируя связывание тромбина кровяными пластинками. Гирудин вызывает диссоциацию комплекса тромбина со специфическими белками — рецепторами на тромбоцитах, так как у тромбина сродство к гирудину выше, чем к высокоаффинным рецепторам на тромбоцитах. Он лишает тромбин способности повышать антикоагу-ляционный и фибринолитический потенциалы крови при внутривенном введении крысам. Препараты гирудина не токсичны.
Поскольку трудности, связанные с выделением этого препарата из пиявок в достаточных количествах, препятствуют его использованию в медицине, в настоящее время делают попытки получения гирудина методами генной инженерии. Уже проводят клинико-фармакологические испытания высо-коочищенных препаратов гирудина. При внутривенном или подкожном одноразовом его введении здоровым людям (в дозе 1000 ATU/кг) через 24 ч 50% ингибитора выводится с мочой в активной форме. Наблюдается увеличение тромбиново-го, частичного тромбопластинового и протромбинового времени плазмы крови. Эти показатели системы свертывания крови нормализуются по мере выведения гирудина из организма. Количество тромбоцитов, уровень фибриногена и фиб-ринолитическая активность плазмы не изменяются. Не отмечено влияния гирудина на кровяное давление, частоту сердцебиений и дыхания.
При выделении гирудина из цельных медицинских пиявок ему сопутствует неактивный компонент из туловищ пиявок, названный псевдогирудином. В отличие от гирудина, содержащего на N-конце молекулы изолейцина, псевдогирудин на N-конце имеет валин; Молекулярная масса псевдогирудина
5000 D.
Бделлины — ингибиторы трипсина и плазмина, впервые были обнаружены в 1969 г. в коммерческих препаратах гирудина, которые обладали способностью ингибировать амидоли-тическую активность плазмина и трипсина. Они представляют собой полипептиды с молекулярной массой 7000 (группа А) и 5600 (группа В) D. Бделлины ингибируют амидолитическую активность трипсина, плазмина, а также акрозина, образуя с этими ферментами неактивный эквимолярный комплекс.
Эглины впервые обнаружены в составе коммерческих препаратов гирудина наряду с бделлинами. Они представляют группу полипептидов с молекулярной массой 6600—6800 D. Эглины ингибируют а-химотрипсин, субтилизин и нейтральные протеазы гранулоцитов человека — эластазу и катепсин G — и образуют с этими протеазами прочные комплексы с
20
константами диссоциации около (2—3) • 10"10 М. При некоторых патологических состояниях (ревматоидный артрит, подагра, эмфизема легкого и др.) наблюдается повышение активности катепсинов в тканях, что связано с высвобождением ферментов из лизосом. Эластаза и катепсин G относятся к группе сериновых протеаз, активных в нейтральной среде. Эластаза, гидролизующая эластин, и катепсин G выделены из полиморфно-ядерных лейкоцитов, макрофагов и др. Они расщепляют протеогликаны, коллаген и ряд других белков. Ингибиторы этих протеаз способны снижать воспалительный ответ. Биологическая ценность этих ингибиторов зависит от их способности блокировать активность лейкоцитарных протеаз, выделяемых при воспалениях.
Эглины получены в чистом виде, их состав и физико-химические свойства достаточно хорошо изучены. В первичной структуре эглина С насчитывается 70 аминокислотных остатков, их особенность заключается в отсутствии дисульфидных связей и остатков метионина, изолейцина и триптофана.
Дестабилаза, є-(у-С1у)-Ьу$-изопептидаза, впервые была обнаружена в составе секрета слюнных желез Hirudo medicinalis в 1986 г. Фермент проявляет фибринолитическую (тромболи-тическую) активность посредством гидролиза изопептидных связей, образуемых при стабилизации фибрина в присутствии фактора XIII свертывания крови, обусловливая нетрадиционный механизм фибринолиза.
