Аллергические болезни: диагностика и лечение - Паттерсон Р.
ISBN 5-9231-0011-8
Скачать (прямая ссылка):
4—4567
97
синдрома. Определённую роль в значимости отдельных аллергенных фракций при развитии сенсибилизации может играть и скорость их высвобождения из пыльцевых зёрен [9, 10].
Методы сбора аллергенных частиц
Для больных, сенсибилизированных к аэроаллергенам, а также для врачей важное значение имеют сведения о содержании в воздухе аллергенных частиц в определённом регионе в конкретный день сезона. Больные, информированные о сроках появления пыльцы амброзии или спор грибов рода Altemaria, могут предупреждать обострение заболевания. Для идентификации и определения количества частиц в воздухе применяют различные методы сбора и подсчёта;
Покровное стекло или любую другую прозрачную поверхность с нанесённым на неё клейким веществом оставляют на воздухе, а затем под микроскопом подсчитывают осевшие и прилипшие пыльцевые частицы и споры. Для уменьшения вероятности ошибок, вызванных различиями в размерах частиц, скоростью ветра и дождём, используют различные приспособления. Подсчёт спор грибов проводят также с использованием культуральной техники. Более подробно о методах сбора и подсчёта можно прочитать в специальных обзорах [11-13]. Несмотря на внедрение различных иммунологических методов идентификации и количественного анализа, методом выбора остаётся микроскопическое исследование аэроаллергенов. Основными типами приборов для сбора и подсчёта частиц являются гравитационные, волюметрические и всасывающие коллекторы.
Гравиметрические сборники
Первыми для оценки количества пыльцы в воздухе начали применять гравиметрические приборы. Их преимуществом является простота использования и невысокая стоимость. Прототипом этих устройств является прибор Дюрама (Durham), состоящий из пары параллельных круговых пластинок по 7,5 см в диаметре. Подготовленное предметное стекло помещают на 24 ч на подставку в 2,5 см над нижней пластинкой. Затем препарат окрашивают (применяют, как правило, спиртовой раствор основного фуксина), под микроскопом идентифицируют и подсчитывают пыльцевые зёрна и споры грибов. Краситель увеличивает размеры пыльцевых зёрен и окрашивает их в красный цвет. Подсчитывают число зёрен на 1 см2 поверхности. Другая методика заключается в подсчёте числа зёрен пыльцы на покровном стекле размерм 22x22 мм) с последующим умножением на коэффициент 4,84, что отражает содержание частиц в 1 см2. Этот метод скорее качественный, чем количественный, так как, во-первых, результат зависит от скорости ветра и места расположения прибора, во-вторых, практически невозможно определить объём исследуемого воздуха. Таким образом, несмотря на исторические заслуги приборов этого типа в аэробиологии, их используют всё реже.
Сборники пыльцы ударного типа
Наиболее распространёнными устройствами для сбора и анализа пыльцы являются вращающиеся коллекторы ударного типа. Принцип их действия заключается в том, что скорость ветра всегда превышает скорость гравитационного
98
оседания частиц. Переносимые ветром частицы небольшого размера под действием инерционной силы сталкиваются в приборе с липкой поверхностью. Если диаметр этой поверхности мал (от одного до нескольких миллиметров), то возникающие небольшие завихрения отклоняют частицы. Таким образом, наименьшие из атакуемых поверхностей имеют наибольшую вероятность попадания на них частиц.
Вращающийся сборник частиц состоит их двух вертикальных собирающихся рычагов, поднятых на крестовину и вращаемых вертикальной осью мотора. Скорость вращения приближается к нескольким тысячам оборотов в минуту и почти не зависит от скорости ветра. Пластичные собирающиеся поверхности покрыты слоем липкого силикона. Эти сборники частиц обычно работают в прерывистом режиме (от 20 до 60 с каждые 10 мин) до заполнения. Одна из используемых моделей приведена на рис. 6-1 (см. на вклейке). Этот прибор обладает более чем 90% эффективностью при улавливании частиц пыльцы диаметром около 20 мкм.
Сборники пыльцы всасывающего типа
Всасывающие приборы используют для втягивания воздушных образцов вакуумный насос. Приборы этого типа чаще применяют для учёта частиц малого размера, таких, как споры плесневых грибов, хотя они подходят и для улавливания пыльцы. На захватывание частиц различных размеров существенное влияние оказывают направление и скорость ветра. Так, если скорость ветра ниже, чем создаваемая при всасывании в сборник, частицы мельчайшего размера собираются в концентрациях, превышающих их содержание в окружающем воздухе. При больших скоростях ветра происходит обратное. Спороуловитель Хирста (Hirst) — всасывающий сборник частиц с часовым механизмом, в котором липкий слой движется вдоль всасывающего отверстия, что даёт возможность различать суточные вариации содержания. Ветер ориентирует прибор по направлению потока. Спороуловитель Буркхарда (Burkhard) собирает частицы на липкий слой барабана, делающего полный поворот вокруг всасывающего отверстия за одну неделю. Оба варианта споровых ловушек предназначены для нежизнеспособного материала, они удобны для улавливания частиц самого различного размера.
