Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Медицина -> Архипов И.А. -> "Антигельминтики: фармакология и применение" -> 47

Антигельминтики: фармакология и применение - Архипов И.А.

Архипов И.А. Антигельминтики: фармакология и применение — Москва, 2009. — 406 c.
ISBN 978-585941-305-8
Скачать (прямая ссылка): antigelmintiki2009.djvu
Предыдущая << 1 .. 41 42 43 44 45 46 < 47 > 48 49 50 51 52 53 .. 168 >> Следующая

Этилацетатный экстракт упаривают в ротационном испарителе досуха при температуре 40-50 °С. Сухой остаток дважды смывают 10 мл ацетонитрила и переносят в другую пробирку с притертой пробкой емкостью 50 мл. В пробирку добавляют 15 мл гексана, содержимое осторожно переворачивают примерно 30 раз. После разделения слоев автоматической пипеткой (5 мл) верхний гексановый слой отсасывают и отбрасывают. Переэкстракцию повторяют трижды, во всех случаях гексановый слой отбрасывают. Нижний ацетонитрильный слой количественно пе-
125
реносят в кругло донную колбу емкостью 25 мл. Органический растворитель отгоняют в ротационном испарителе при температуре 40 °С досуха. В колбу вносят 200 мкл диметилформамида (ДМФА), остаток растворяют и переносят в пробирки Эппендор-фа. Пробы до анализа хранят при - 20 °С.
Хроматографирование полученных экстрактов проводили вышеописанным методом.
Выполнение измерений. Анализ включает не более 10 испытуемых образцов. Перед началом и в конце работы проводят анализ стандартного образца, чтобы убедиться в стабильности работы системы. Объем наносимой на колонку пробы для всех объектов составляет 0,050 мл.
Обработка результатов. Для обработки результатов хроматографирования используется программа «DataBase Biostatistic 4.02 vs». На хроматограммах исследуемых образцов определяют площадь пиков, по времени удерживания соответствующих пикам стандарта албендазола.
По калибровочному графику находят содержание албендазола в объеме инжектируемой пробы испытуемого образца.
25000
20000
---А— Печень
—к— Почки
15000 -
10000 -
5000
0
0
100
200
300
400
6.2. Площадь пика-концентрация (стандартные растворы) Содержание албендазола рассчитывают по формуле
где Ска концентрация албендазола в образце, нг/г; S значение площади пика с хроматограммы (%); К - коэффициент, учитывающий степень извлечения албендазола (получен при постановке модельных опытов с внесением известных количеств албендазола сульфоксида), для печени
- 59,736048, почек - 57,859751; т - масса навески печени или почек
Содержание албендазола сульфоксида определяют пересчетом, исходя из молекулярной массы, по формуле
Мс
с = с ______
^ кс ка ?
М
где Скс - концентрация албендазола сульфоксида в образце, нг/г; Ска -концентрация албендазола в образце, нг/г; Мс - молекулярная масса албендазола сульфоксида (281,3); Ма - молекулярная масса албендазола (265,3)
Фенбендазол. С.В. Русаков, П.П. Диденко, Зуев (2006 ) разработали метод определения остаточных количеств фенбендазола и его метаболита - оксфендазола, который является основным противопаразитарным агентом, в органах и тканях свиней после обработки препаратом Фензол (новая лекарственная форма анти-гельминтика на основе фенбендазола, разработанная ВИГИС, П.П. Диденко).
При разработке методики за основу взяты широко используемые методы экстракции и очистки проб (S. Marriner, J. Bogan 1980; P. Delatour, 1983), параметры хроматографирования были подобраны в процессе работы с учетом особенностей имеющегося хроматографа, хроматографической колонки и реактивов.
Принцип метода. Метод основан на хроматографировании с использованием жидкостного хроматографа высокого давления с ультрафиолетовым детектором, обращеннофазовой колонки и программы Мультихром (версия 1.5), достаточного для анализа количества экстрактов, полученных после экстракции этилацета-том проб плазмы крови, печени, почек, сердца, поджелудочной железы, легких, селезенки, мышечной ткани, жировой ткани, лимфоузлов, матки, тонкого и толстого кишечника, очистки экстрактов в системе «ацетонитрил-гексан» и концентрирования очищенных экстрактов.
Оборудование, посуда, реактивы: стандарт фенбендазола с активностью 99,8 % («Jangsu Jabang Group»); стандарт оксфенда-
127
зола с активностью 95,4 % («Jangsu Jabang Group»); жидкостной хроматограф высокого давления Hewlett Paccard 1090 А с УФ-детектором или аналогичный по техническим характеристикам; хроматографическая обращеннофазовая колонка LUNA С 18 (250 х 4,6 мм) с диаметром сорбента 5 мкм или аналогичная; весы лабораторные, ГОСТ 24104; рН-метр Hanna pH 213; вакуумный ротационный испаритель IKA RV 06 ML 1-В или аналогичный по техническим характеристикам; центрифуга лабораторная ОПН-3 или аналогичная; ультразвуковая ванна Branson В 8510 DTH или аналогичная; встряхиватель Elmi (Шейкер S-3.01) или аналогичный; посуда мерная, лабораторная стеклянная, ГОСТ 1770; вода дистиллированная, ГОСТ 6709; бромид калия 99,0 %, Р0838
(«Sigma»); углекислый аммоний двузамещенный А 9516 («Sigma»); водный раствор аммиака 30 % 22,122-8 («Sigma-Aldrich»); этилацетат х.ч., ГОСТ 22300-76 («Борис-Авогадро»); ацетонитрил, ч.д.а., ТУ 6-09-5497 («Криохром»): гексан, ч., ТУ 6-09-337578 (АО «Мосреактив»).
Подготовка к анализу. Приготовление элюента. 0,05 М раствор углекислого аммония (4,8045 г/1000 мл воды) смешивали с ацетонитрилом в соотношении 65 : 35 и фильтровали через бумажный фильтр непосредственно перед использованием.
Предыдущая << 1 .. 41 42 43 44 45 46 < 47 > 48 49 50 51 52 53 .. 168 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed