Анемии - Алексеева Н.А.
ISBN 5-8232-0243-1
Скачать (прямая ссылка):
Проведенные эксперименты ПОД-I мердили, что образование колоний к легок происходит из ГСК. В пользу ¦того свидетельствуют следующие факты:
1) большинство колоний содержи ГСК, которые способны к само-полдерживанию;
2) ГСК в любой колонии является жмшшпентной и способна образовывать колонии, состоящие из различных типов кроветворных клеток;
Ч при длительном росте в дол-юерочных культурах большинство колоний содержат эритроидные, мне-юндиые и мегакариоцитарные клетки, і ем самым лишний раз свиде-ісльствуя о полииотентности стволо-ІІОІІ клетки.
Исследованиями по изучению хромосомных маркеров при ТКМ установлено, что существует единая ГСК для клеток миелоидного (Эр, іранулоцитьі. моноциты, мсгакарио-, ннгы) и лимфоидного (Т- и В-лим-фопиты) ростков.
Морфологически ГСК неиденти-фннируема. Существенный прогресс и ее изучении наступил в эру появ-ІІСНИЯ МА, позволивших охарактери-ювать се антигенный профиль.
С помощью характеристики поверхностных ЛГ примитивных клеток (11)34) н других поверхностных АГ коммит ировапных клеток различных росткои гемопоэза удалось выделить ісмоноэгичсскую стволовую клетку
у мышей. Для идентификации и селекции клеток, которые экспрессируют ростково-специфические маркеры (lineage- Lin"), используют целый набор МА, количество которых с каждым годом увеличивается. Работами N.Uchida и соавт. (1992), l.Weissman и соавт. (1991, 1992) было установлено, что мышиная ГСК имеет низкий уровень экспрессии Thy-1.1-АГ, не обладает лииейно-специ-фпческими АГ, и имеет следующую антигенную характеристику: Thy-
l.ll°/Lin—/Sea 1+. На сегодняшний день невозможно утверждать, что мышиная ГСК по своей антигенной характеристике идентична таковой человека. Сделать заключение о фенотипе человеческой ГСК возможно лишь при изучении КОЕ в культуре — в колониях обнаруживается большое число бластных элементов, и последние отбираются и многократно культивируются.
Используя эти методы и МА, L.Terstappen и соавт. (1991) определили фенотип этих бласгоь КОЕ как CD34 /CD38—. Содержание этих клеток больше в крови из пуповины (14,72%), чем в костном мозге (8,28%) и периферической крови (0,67%) [Ма-urillo L. ct al.. 1998]. АГ CD34 — это гликопротеии с молекулярной массой
110 килодальтон и его ген располагается на 1-й паре хромосом (lq32-) [Molgaard Н. ct al., 1989J. АГ CD38 также является гликопротеином с молекулярной массой 45 килодальтон и он экспрессируется на клетках всех гемопоэтических ростков. По данным L.Healy и соавт. (1995), молекула CD34+, определяемая на ГСК и клегках-предшественннцах миелопоэза, играет важную роль в адгезии этих элементов к стромаль-ным клеткам костного мозга.
L.Terstappen и соавт. (1991) установили, что при культивировании из одной гемоноэтичсской клетки CD34WCD38 костного мозга человека через 28—34 дня образуются
13
ФИЗИОЛОГ ИЯ ЭРИ !П( >щ >¦> IA
011(111 И И, (.'ОС I НМЩИС И') ПрИМИ І ИИІІІ.ІХ
псюк. Нели культивировать чти .1ІСІКИ I* гсчснис 4 мсс, то после ісрсс.ідок них примиипшых клеток (Гіршую іся ло 5 последовательных сиериций клопом. Для полной ха-)КК герметики человеческих ГСК для юпо-мпелипой селекции можно исто. юна п. AT c-kit, а для негативной еискцин CD33.CD34', являясь АГ п специфическим маркером ГСК и мичок-предшественниц, также экспрессируется па эмбриональных фиб-pol'tniu iax. Плотность этого АГ' про-I реї спино уменьшается по мере диф-фереппироики и сочрснания клеток, и полное їмо дифференцированные к леї ки являются CD34- [Krause D. cl nl.. 1996]. В свою очередь, ком-нпртмсігі CD34' -клеток представляет собой гетерогенную популяцию, и на некоторых ич них наблюдается экспрессия дополнительных антигенных маркеров, которые позволяют отде-ПІІІІ- некоммитироваиные ГСК от к о м м и і ироваппых клеток-предшест-иеннпц |C)lweys J. ct al., 1995]. Было усійііовлено, что CD34^/CD38“клетки жсиресеируют С Г) 71 (рецептор 1ф) на ничком уровне, но по мере шфференциации гемопоэтических Km ни предшественниц экспрессия
• 'П/1 увеличивается [Gross S. et al., 14971
Среди СП34'-клеток можно также выделить две популяции — I ¦ |) i.p.nghi „ CD34dim. Популяция I |) і.Р'їіміи обладает активностью прими і HIHII.Iх I СК, и она способна под-лержиншь и долгосрочных культурах in vitro мпелоиоэч и В-клегочный пимфоцитопоэч. In vivo эта популяции клсгок опосредует репопуляцию миеломопоцитарных клеток, мегака-риопитои, Г- и В-лимфоцнтов [Mur-|.|у 1 el al., 1995]. Поскольку попу-пинпи клеток CD34bri8hi обладает ак-I ивиостмо примитивных гемопоэтических столовых клегок, го она ИИЛИСІСИ мишенью для изучения способное! и этих элементов к самонод-
держпванпю По мнению J.Olwcys и соавт. (1996), примитивные I СК могут быть охарактеризованы как CD34bri*hl/ CD38d,m' / HLA-DR'1"» / CD90- / CD 117' / родословность—/ Rhodamine 123і0.
A.Yin и соавт. (1997) выделили новый АСІЗЗ-АГ, который является трансмембранным АГ стволовых клеток, селективно экспрессирующимся на CD34b”gh| стволовых клетках и на клетках-предшественницах. И споль-чуя МА к АС133-АГ, можно произвести селекцию ГСК из крови и костного мозга для трансплантации [Yin A. et al., 1997]. Как указывают авторы, в культуре клетки CD34+AC133+ дают рост большого числа рачноообрачных колоний КОЕ-ГМ. частично смешанные КОЕ и небольшое количество БОЕ-Э. По данным R.Pettengel и соавт. (1998), популяция АС 133 -клеток более обогащена ранними клетками-предшест-венницами, чем популяция CD34+. АГ АС 133 экспрессируется только на клетках CD34% но не на клегках CD34 [Miraglia С. et al., 1997]. По мнению H.-J.Buhring и соавт. (1998), экспрессия АГ АС1334 отмечается на 99,3—99,8% С D34+-клетках костного мозга, менее, чем на 10% CD 10* -клетках-предшественницах В-лимфоци-тов, и почти на 90% клеток, экспрессирующих рецептор фактора стволовых клеток (CD 117). В го же время среди CD34+ клеток только 30—45% были CD 10' и 55—75% были CD 111\ АС 133ч-клетки обогащены в популяции клеток CD38iow, CD71low и CD 135'. Около 0,2—0,7% АС 133*-к л сто к являются CD34—, и эти клетки имеют следующую фенотипическую характеристику: CD117-HLA—
