Оксредметрия - Захарьевский М.С.
Скачать (прямая ссылка):
лизиса не повышает величины окислительного потенциала, й потенциал фагированных культур почти не отличается от контрольных, несмотря на большое различие в численности микроорганизмов. Еще резче проявляется поступление в среду восстановителей при лизисе бактериальной культуры после добавления лизоцима Фемминга [23]. Добавление лизоцима к аэрированной культуре М. lysodeicticus, содержащей растворенный кислород, сопровождается немедленным растворением клеток и падением потенциала примерно па 200 мв от первоначального значения. Через небольшой промежуток времени после растворения клеток наблюдается сильное (на несколько десятых вольта по сравнению с исходным) повышение потенциала, соответствующее окислению восстановителей, поступивших в среду при растворении клеток.
Иначе меняется окислительный потенциал в процессе пеиициллинового бактериостаза, который не сопровождается лизисом клеток. Остановка роста культуры в этом случае не сопровождается падением потенциала. Нами показано [33], что при бактсрио-стазе культуры золотистого стафилококка уменьшение численности микроорганизмов приводит к повышению потенциала (окислительного напряжения). Уменьшение численности микроорганизмов за счет фаголизиса не повышает величины потенциала, как это
имеет место в случае пенициллипового о.чктерпоп.чча. На рис. 32 представлен один из наиболее типичных опытов одновременного определения изменений окислиіельного напряжения (т. е. потенциала по отношению к водородному электроду при том же рН) в культуре золотпетою плфплококка (бульон мясопептонный с глюкозой) как при іі.-і.чмчіііі фаголизиса, так и в случае пенициллішоїин о Гшк іеріюс і ачл. Аналогичные результаты получены с бульоном Хошшгер.ч.
Рис. 32 показывает, что, по крайней морг, и первые 5-—6 н роста наблюдается различие между величиной окислительного напряжения при наличии пактгриогіл мі н гаковой же в случае феномена фаголизиса, мни пилимою роста пе наблюдалось в обоих случаях.
Ход кривых потенциала (окнслншії.ііоі о напряжения) может зависеть как от химического рішіичпи восстановителей, поступающих в среду, тик и от рмчлшпш в концентрации
Время измерения, ч
Рис. 32. Изменение окислительного напряжения в процессе пеиициллинового бактериостаза и фаголизиса культуры золотистого стафилококка:
I - іі:імсіК'ііИ[! окислительно го-напряжения и присутствии 33 гн. пенициллина в 1 мл; 'J — іпмоиопн' окислительного напряжения фагнрованной культури г KHHi од. фага п 1 мл;
Я ¦ MJMl'lirillll' ПКтЛІПТЛЬНОГО
памріиігпіія і.пптролі.поіі культури.
/ одних и тех же восстановителей. Если в результате фаголи-зиса биохимизм культуры сдвигается в сторону поступления в среду более восстановленных продуктов, то задержка подъема потенциала после лизиса культуры, обладающей более сильно выраженными восстановительными свойствами, должна быть больше, чем у культуры золотистого стафилококка. (Золотистый стафилококк не относится к сильно восстанавливающим культурам, его окислительное напряжение не падает ниже 200—250 мв).
Если задержка в подъеме потенциала зависит от увеличения концентрации одних и тех же восстановителей при лизисе, то задержка подъема потенциала у культуры с более сильно восстанавливающими свойствами может быть и меньше, чем у культуры золотистого стафилококка. Согласно Хыоитту [23] культуры коли-бактерий и золотистого стафилококка показывают аналогичный ход кривых потенциала. Поэтому нами [33] были измерены значения окислительного - напряжения в процессе фаголизиса культуры Вас. proteus vulgaris, которая является более восстанавливающей по сравнению с золотистым стафилококком.
В случае фаголизиса Вас. proteus vulgaris кривая окислительного напряжения является почти зеркальным отражением кривой роста и прекращение жизнедеятельности микроорганизмов, вызывает немедленно соответствующий подъем окислительного напряжения. Отсутствие задержки в подъеме потенциала при фаголизисе культуры Вас. proteus vulgaris позволяет отнести различие в ходе кривых изменений окислительного напряжения при фаголизисе и бактерио-стазе культуры золотистого стафилококка за счет различия в окислительно-восстановительной емкости в этих процессах.
При изучении пеиициллинового бактериостаза культуры золотистого стафилококка нами в 1948 г. было установлено [33], что кривая роста является зеркальным отображением кривой изменений окислительного напряжения и что в условиях опыта в период логарифмической фазы роста произведение величины окислительного напряжения на логарифм концентрации бактерий есть величина постоянная. Величина этого произведения как при наличии пенициллина, так и при отсутствии его оказалась равной в среднем 3000±300. По изменению величин окислительного напряжения можно судить об изменении концентрации бактерий. Логарифм концентрации бактерий может в данном случае быть найден путем деления 3000 на величину окислительного напряжения в данный момент времени.
Наличие бактериостатического действия, определяемое по различию в росте культуры, обычно не может быть установлено ранее чем через 18 ч как в случае метода сериальных
