Справочник по производству спирте. Сырье, технология и технохимконтроль - Яровенко В.Л.
Скачать (прямая ссылка):
Определение общей осахаривающей активности (ОСп). Метод основан на определении скорости ферментативной реакции гидролиза крахмала, которую устанавливают по изменению угла вращения плоскости поляризации субстрата. Это изменение происходит в результате ферментативного гидролиза крахмала до низкомолекулярных углеводов.
Поляриметрический метод определения OCn основан на зависимости удельного вращения плоскости поляризации раствора субстрата от количества единиц активности фермента, взятых для проведения реакции.
Приготовление 2%-ного раствора крахмала (субстрат), 1 н. раствора соляной кислоты, фосфатного буферного раствора с рН 4,8-4,9, ферментных растворов - как и при определении AC солода.
Приготовление осадителей. 30%-ный раствор сульфата цинка-30 г ZnSO4 по ГОСТ 4174-69 растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе на 100 мл; 15%-иый раствор гексацна-ноферроата калия-15 г K4[Fe(CN)6] •3H2O растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе иа 100 мл.
Проведение испытания. Ферментативную реакцию проводят в строго определенных условиях: температура 50° С; рН 4,8- 4,9 (фосфатный буфер для солодов); продолжительность 30 мин. объем реакционной смеси 30 мл (20 мл субстрата и 10 мл ферментного раствора). Анализ проводят в пробирках диаметром 18 и длиной 180 мм. В опытную пробирку наливают 20 мл субстрата и ставят в ультратермостат (или водяную баню) с постоянной температурой 50±0,2°С на 5-10 мин. Затем в пробирку наливают 10 м~ рабочего ферментного раствора, перемешивают и оставляют стоять в термостате ровно 30 мин. По истечении этого времени пробирку вынимают из термостата, добавляют 1 мл 1 н. раствора соляиоґї кислоты для инактивирования ферментов. Для осаждения белков и осветления гидролнзата приливают 1 мл 30%-ного раствора сульфата цинка и через некоторое время 1 мл 15%-ного раствора гекса-циано-(П)-ферроата калия.
В контрольную пробирку наливают последовательно 10 мл ферментного раствора, 1 мл 1 н. раствора соляной кислоты, по 1 мл оса-дителей и 20 мл субстрата.
/ Содержимое пробирок перемешивают и фильтруют. В полученных фильтратах определяют поляризацию иа визуальном или автоматическом поляриметре в трубке длиной 2 дм. Получают два значения поляризации: Як - контрольного раствора н IJ0 - опытного раствора. Разность между значениями вращения плоскости поляризации контрольного и опытного растворов (Я"-Я0) показывает величину снижения поляризации ДЯ.
Значение ДЯ для визуального поляриметра должно быть не менее 0,2 и не более 2,5°, для автоматического поляриметра - не менее 0,1 и не более 1°.
Обработка результатов. Общую осахаривающую способность OCn солодов (в ед./г) рассчитывают по следующим уравнениям:
для автоматического поляриметра' OCn= (0,0777 ДЯ+0,0104) >' ХЮ00 : п;
для визуального OCn= (0,050 ДЯ + 0,0114) • 1000 : л, где 0,0777: 0,050; 0,0104; 0,0114 - коэффициенты, выведенные на основании экспериментальных данных путем изучения зависимости между количеством взятого на анализ фермента и снижением оптического вращения крахмала;
ДЯ - измеренное снижение вращения плоскости поляризации, равное Пк-Я0;
1000 - коэффициент пересчета в граммы;
л- количество солода, содержащееся в реакционной среде, мг.
В коэффициенты введен пересчет на 1 ч действия фермента.
Пример. Для расчета общей осахаривающей активности ячменного солода приготовлен его основной раствор - 5 г на 100 мл. Основной раствор разбавлен в 20 раз. Следовательно, количество солода, взятое на анализ, л=5-5-10-1000/(100-100) =25 мг.
Прн измерении удельного вращения растворов на визуальном поляриметре получены следующие значения поляризации: Як=14,1°: Яо= 12,6°; следовательно, ДЯ= 14,1-12,6= 1,5°.
Общая осахаривающая активность OCn составит (0,050-1,5 - +0,0114)-100:25,0 = 3,45 ед./г.
В пересчете на абсолютно сухое вещество (при влажности солс-да43%) OCn = 3,45-100/(100-43)=6,05 ед./г.
Глава 2
КОНТРОЛЬ ПРОМЕЖУТОЧНЫХ ПРОДУКТОВ
ПРОИЗВОДСТВА
Промежуточными продуктами спиртового производства являются разваренная масса (предварительно измельченное и прошедшее тепловую обработку сырье), осахаренная масса (обработанная источниками амилолитических ферментов разваренная масса; в результате ферментативного гидролиза крахмала до сбраживаемых Сахаров получается сусло) и бражка (бродящее или сброженное сусло с дрожжами).
Пробы полупродуктов спиртового производства отбирают специальными пробоотборниками или через краники. Порядок отбора проб полупродуктов устанавливается в соответствии с требованиями технологической инструкции.
РАЗВАРЕННАЯ МАССА
Качество разваривания крахмалистого сырья определяется визуально по цвету, запаху и путем промывания водой пробы разваренной массы (1 л) на металлическом сите. Проба отбирается через пробоотборник на выдувной линии. После промывания водой дробина, оставшаяся на сите, не должна содержать крахмалистых кусочков, полусырых зерен. При наличии их на сите качество разваривания оценивается как неудовлетворительное.
По цвету разваренная масса характеризуется как нормально разваренная (окрашивание желто-коричневое), недоваренная или слабо разваренная (окрашивание с преобладанием более светлых тонов с белым отливом), переваренная (окрашивание с преобладанием темных тонов - коричневых, черных).
