Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Химия -> Яровенко В.Л. -> "Справочник по производству спирте. Сырье, технология и технохимконтроль" -> 124

Справочник по производству спирте. Сырье, технология и технохимконтроль - Яровенко В.Л.

Яровенко В.Л., Устинников Б.А., Богданов Ю.П., Громов С.И. Справочник по производству спирте. Сырье, технология и технохимконтроль: Справочник — M.: Легкая и пищевая пром-сть, 1981. — 336 c.
Скачать (прямая ссылка): etanol.djvu
Предыдущая << 1 .. 118 119 120 121 122 123 < 124 > 125 126 127 128 129 130 .. 139 >> Следующая

Приготовление ферментных растворов. Солод измельчают на механической или ручной мельнице и берут навески: 10 г просяного солода и по 5 г ячменного, овсяного и ржаного. Навески количественно переносят в колбы с широким горлом вместимостью 200-250 мл, заливают 10 мл фосфатного буферного раствора с рН 4,8-4,9 и 90 мл дистиллированной воды. Смесь выдерживают в течение 1 ч при температуре 30° С при периодическом перемешивании, затем отфильтровывают. Фильтрат используют в качестве основного раствора, нз которого готовят рабочие растворы в соответствии с данными табл. 91 (общий объем разбавленного раствора 100 мл). Необходимо, чтобы в 10 мл рабочего ферментного раствора содержалось от 10 до 50 мг ячменного, ржаного и овсяного солодов и от 50 до 100 мг просяного солода.

Таблица 91
ДАННЫЕ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ РАБОЧЕГО РАСТВОРА ФЕРМЕНТОВ
AC (предполагаемая), ед. /г
Количество солода, которое должно содержаться в 5 мл рабочего раствора солода, п, мг
Количество основного раствора, необходимое для вторичного разбавления, мл иа 100 мл
Для просяного солода (основной раствор - 10 г на 100 мл)
5-10 30
10-15 30
15-20 10
Для ячменного, овсяного и ржаного солодов (основной раствор-5 г на 100 мл)
15-20 20 8
20-30 10 4
30-50 7,5 3
Проведение испытания. Ферментативная реакция гидролиза крахмала проводится в строго определенных стандартных условиях: температура 30° С, рН среды 4,8-4,9 для солодовых амилаз (с использованием фосфатного буфера), продолжительность 10 мин, концентрация субстрата 1%, объем реакционной смеси 15 мл (10 мл субстрата и 5 мл ферментного раствора).
Для анализа в две пробирки диаметром 18 и длиной 180 мм наливают по 10 мл субстрата и ставят их в ультратермостат или водяную баню с постоянной температурой 30±0,2° С на 5-10 мнн (чтобы растворы приняли необходимую температуру). Затем, не вынимая пробирок из термостата, наливают в первую (контрольную) 5 мл дистиллированной воды, во вторую (опытную) - 5 мл рабочего раствора фермента. Смеси быстро перемешивают и выдерживают в ультратермостате в течение 10 мин, отмечая время по секундомеру. По истечении этого времени из пробирок отбирают по 0,5 мл раствора и переносят их в конические колбочки с предварительно налитыми туда 50 мл рабочего раствора йода и 0,1 н. раствора соляной кислоты. Жидкости взбалтывают, при этом одновременно происходит инактивация фермента и йодокрахмальная реакция. Растворы приобретают следующую окраску: контрольный - сннюю, опытный - фиолетово-бурую различной интенсивности в зависимости от степени гидролиза крахмала.
Непосредственно после смешивания растворов определяют их оптическую плотность на фотоэлектроколориметре ФЭК-Н-57, ФЭК-М или другой марки, применяя кюветы с толщиной рабочего слоя 1 см и красный светофильтр (Л- = 656 им). Колориметрирование проводят против воды по инструкции, приложенной к каждому прибору; показания снимают по красной шкале левого барабана. Получают два значения оптической плотности: D1 - оптическая плотность контрольного раствора, характеризующая количество крахмала, взятого на ферментативную реакцию (значение Di должно быть не менее 0,690); D2 - оптическая плотность опытного раствора, характеризующая количество негндролизованного крахмала и образовавшихся

декстринов, находящихся в реакционной среде. Разница оптических плотностей растворов соответствует количеству гидролизованного субстрата С (в г), которое определяют по уравнению C=O1I(Dj- Di)IDx, где 0,1-количество крахмала, взятое на ферментативную реакцию, г.
Если окажется, что количество гидролизованного крахмала больше 0,07 нли меньше 0,02, анализ повторяют, готовя новый рабочий раствор соответственно из меньшего или большего количества основного раствора. Если количество превращенного в результате ферментативной реакции крахмала находится в указанных пределах, полученные данные используют для определения активности.
Обработка результатов. Амилолитическую активность AC (в ед./г или ед./мл) определяют по специальному уравнению, подставляя в него найденную величину С: AC= (6.889С-0,029388) X XЮОО: п, где 6,889; 0,29388 - коэффициенты, полученные при математической обработке экспериментальных данных путем изучения зависимости между количеством взятого на анализ фермента и степенью гидролиза крахмала (в коэффициенты введен пересчет на 1 ч действия фермента); С - количество гидролизованного крахмала, г, п - количество исследуемого материала в реакционной среде, мг.
Пример. Для определения активности ячменного солода приготовлен основной раствор: 5 г солода на 100 мл дистиллированной воды с фосфатным буфером. Солод хорошего качества, чистый, предположительно имеет высокую активность. По табл. 91 находим количество основного раствора солода, необходимое для приготовления рабочего раствора, - 4 мл. Тогда в 5 мл рабочего раствора солода, который используется для проведения ферментативной реакции, будет содержаться 10 мг солода (я= 10 мг).
В результате анализа получены следующие значения оптических плотностей: D\ = 0,725; D2=0,500. Находим количество гидролизованного крахмала: C = O1I(0,725-0,500)/0,725=0,031 г и определяем AC исследуемого солода: AC= (6,889-0,031 - 0,029388) • 1000/10 = = 18,42 ед./г. В пересчете на абсолютно сухое вещество солода (при влажности солода 38%) AC= 18,42-100/(100-38) =29,70 ед./г.
Предыдущая << 1 .. 118 119 120 121 122 123 < 124 > 125 126 127 128 129 130 .. 139 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed