Справочник по производству спирте. Сырье, технология и технохимконтроль - Яровенко В.Л.
Скачать (прямая ссылка):
Количество Количество Количество 0,1 н. раство- Единицы 0,1 н. раство- Единицы 0,J н. раство- Единицы ра тиосульфа- ОС (е) ра тиосульфа- ОС(е) ра тиосуль- ОС (е) та, мл та, мл фата, мл
0,1 5,0 2,1 118,9 4,1 273,8 0,2 10,0 2,2 125,5 4,2 283,2 0,3 15,0 2,3 132,1 4,3 292,8 0,4 20,0 2,4 138,9 4,4 302,7 0,5 25,5 2,5 145,8 4,5 312,8 0,6 30,8 2,6 152,8 4,6 323,1 0,7 36,2 2,7 159,9 4,7 333,6 0,8 41,6 2,8 167,1 4,8 344,4 0,9 47,0 2,9 174,5 4,9 355,5 1,0 52,6 3,0 181,9 5,0 366,9 1,1 58,2 3,1 189,5 5,1 378,6 1,2 63,9 3,2 197,2 5,2 390,6 1,3 69,7 3.3 205,1 5,3 402,9 1,4 75,5 3,4 313,1 5,4 415,6 1,5 81,5 3,5 221,3 5,5 428,8 1,6 87,6 3,6 229,6 5,6 442,3 1,7 93,6 3,7 238,1 5,7 456,2 1,8 99,8 3,8 246,8 5,8 470,6 1,9 106,1 3,9 255,6 5,9 485,0 2,0 112,5 4,0 264,6 6,0 501,2 где е-количество единиц активности в микроэквивалентах глюко-зндкых связей, найденное по табл. 88 в соответствии с результатами титрования (разность результатов титрований контрольного и опытного растворов, мл 0,1 н. раствора тиосульфата); (К- О) -разность результатов титрований контрольного и опытного растворов 0,1 н. раствором тиосульфата, мл; т - количество ферментного препарата, введенного в реакцию, г; /-время гидролиза, мин; 50 - коэффициент пересчета на микроэквивалент глюкозидных связей.
Расхождение результатов титрований контрольного и опытного растворов не должно превышать 6,0 мл 0,1 и. раствора тиосульфата
(1 мл 0,1 н. раствора тиосульфата соответствует для данного количества субстрата гидролизу 4% глюкозидных связей). Если оно меньше 0,5 мл или больше 6,0 ил, то определение повторяют с большим или меньшим количеством препарата.
Осахариваиие крахмала до 25% гидролиза глюкозидных связей протекает как реакция нулевого порядка.
Осахаривающую активность ОС (в ед./г) в культурах и препаратах Bacillus subtilis определяют по формуле OC=ei/(mr), где е\-количество единиц активности (в микроэквивалентах глюкозидных связей), найденное по табл. 89 в соответствии с результатами титрования.
Таблица 89
ПЕРЕВОД КОЛИЧЕСТВА 0,1 и. РАСТВОРА ТИОСУЛЬФАТА В ЕДИНИЦЫ OC
Количество 0,1Н. раствора тиосульфата, мл
Единицы ОС (микро-эквиваленты глюко-аидкых связей, <¦,)
Количество 0,1 н. раствора тиосульфата, мл
Единицы ОС (мик-роэквивалеиты глюкозидных связей, fi)
0,9 45,0 2,6 169,7 1,0 52,1 2,7 180,9 1,1 58,7 2,8 192,3 1,2 63,3 2,9 209,9 1,3 67,8 3,0 226,1 1,4 74,7 3,1 250,6 1,5 81,4 3,2 278,2 1,6 85,9 3,3 312,1 1.7 92,7 3,4 366,2 1,8 99,6 3,5 452,3 1,9 107,5 3,6 517,9 2,0 113,1 3,7 585,7 2,1 119,9 3,8 662,7 2,2 128,8 3,9 740,3 2,3 138,0 4,0 811,9 2,4 150,3 4,1 891,6 2,5 158,3 4,2 968,1 Определение мальтазной активности (MC). Метод основан на гидролизе мальтозы исследуемым ферментом с последующим иодо-метрическим определением образующейся глюкозы.
Мальтазная активность характеризует способность ферментного препарата катализировать расщепление дисахарида мальтозы до глюкозы и выражается числом единиц мальтозы в 1 г препарата.
За единицу мальтазной активности принято такое количество фермента, которое за 1 ч при 30° С катализирует расщепление 1 г мальтозы до глюкозы при степени гидролиза 30%.
Приготовление основных растворов фермент-ного.препарат а. Основные растворы готовят из ферментных препаратов, культуры гриба и сиропа.
В первом случае 0,1 г исследуемого препарата взвешивают иа аналитических весах в стаканчике вместимостью 25-30 мл. Навеску тщательно растирают стеклянной палочкой с небольшим количеством дистиллированной воды, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают и при необходимости фильтруют. Раствор ферментного препарата может храниться в течение 1 сут при температуре от 2 до -40C
Во втором случае 1 г тонко измельченной воздушно-сухой культуры гриба заливают 100 мл дистиллированной воды и выдерживают при комнатной температуре при периодическом перемешивании в течение 1 ч.
Раствор фильтруют через сухой бумажный фильтр.
В третьем случае 10 г сиропа (относительная плотность 1,2) количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают - получают разведение 1 : 100.
Приготовление 1 % -ного раствора мальтозы (субстрат). 1,05 г х. ч. мальтозы (моногидрата) растворяют в дистиллированной воде, добавляют 10 мл ацетатного буферного раствора с рН 4,7 и доводят объем водой до метки в мерной колбе вместимостью 100 мл.
Приготовление 1 н. ацетатного буферного раствора с рН 4,7; 1 % -ного раствора крахмала (субстрата); 0,1 н. раствора тиосульфата натрия, раствора серной кислоты !:4; 0,1 и. раствора гндроксида натрия или калия; 1 н. раствора соляной кислоты- как и в предыдущих методах определения AC и ОС.
Приготовление 0,1 н. раствора йода. 25 г йодида калия растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 мл в минимальном количестве дистиллированной воды (2-3 мл) и добавляют 12,7 г металлического йода. После полного растворения йода объем доводят до метки дистиллированной водой. Раствор хранят в темном месте в склянке из темного стекла с притертой пробкой. Титр ие устанавливают, но проверяют по тиосульфату - поправка должна быть от 0,95 до 1,05.
