Справочник по производству спирте. Сырье, технология и технохимконтроль - Яровенко В.Л.
Скачать (прямая ссылка):
Приготовление 0,1 н. раствора соляной кислоты. 8,2 мл соляной кислоты (d=l,19) наливают в мерную колбу
№
вместимостью 1000 мл и доводят объем дистиллированной водой до метки.
Приготовление растворов йода. Для приготовления основного раствора 0,5 г йода по ГОСТ 4159-64 и 5 г йодида калия по ГОСТ 4232-74 растворяют в бюксе с притертой крышкой в малом количестве воды. Содержимое осторожно перемешивают при плотно закрытой крышке бюксы. Раствор после полного растворения йода переносят в мерную колбу с притертой пробкой вместимостью 200 мл, а объем доводят дистиллированной водой до метки. Основной раствор хранят в темноте и используют в течение 1 мес.
Для приготовления рабочего раствора йода 2 мл основного раствора разводят 0,1 н. раствором соляной кислоты в мерной колбе вместимостью 100 мл. Перед употреблением рабочего раствора проверяют его оптическую плотность, пользуясь светофильтром с максимумом светопропускания при Я,= 453 нм и кюветами с толщиной поглощающего свет слоя 1 см. Оптическая плотность раствора йода должна быть равна 0,160±0,01 при определении на ФЭК-Н-57 и ФЭК-М и 220±0,01-на ФЭК-56М, ФЭК.-56 и ФЭК-60. В случае отклонения оптической плотности раствора от этой величины ее приводят к необходимой, добавляя несколько капель кислоты или основного раствора йода.
Приготовление растворов из ферментных препаратов. Для приготовления основного раствора 0,1 г исследуемого препарата взвешивают в стаканчике вместимостью 25- 30 мл. Навеску тщательно растирают стеклянной палочкой с небольшим количеством воды, количественно"іереносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают и при необходимости фильтруют. Раствор ферментного препарата может храниться в течение 1 сут при температуре от 2 до 6 С.
Для приготовления рабочего раствора ферментного препарата основной раствор разбавляют так, чтобы в 5 мл содержалось количество фермента, достаточное для гидролиза в принятых условиях 20-70% крахмала. Количество основного раствора препарата, которое необходимо взять для приготовления рабочего раствора фермента, находят по табл. 86.
Таблица 86
ДАННЫЕ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ РАБОЧЕГО РАСТВОРА ФЕРМЕНТА
Амилолитическая активность (АС) препарата (предполагаемая), ед./г
Количество препарата в 5 мл рабочего раствора, мг
Количество основного раствора, необходимое для вторичного разбавления, мл
Общий объем разбавленного раствора, мл
20-80 5,0 50,0 50,0 81-150 2,0 20,0 50,0 151-300 1,0 10,0 50,0 301-700 0,5 5,0 50,0 701-1200 0,25 10,0 200,0 1201-2500 0,125 5,0 200,0 2501-5000 0,05 2,0 200,0 Свыше 5000 0,025 ЬО 200,0
Приготовление растворов из культуры гриба (вытяжка). Для приготовления основного раствора 5 г исследуемой культуры гриба, предварительно растертой в ступке, взвешивают в стаканчике вместимостью 50 мл, переносят в коническую колбу вместимостью 250 мл, добавляют 90 мл дистиллированной воды и 10 мл ацетатного буфера с рН 4,7. Смесь выдерживают в течение 1 ч в термостате при температуре 30° С, периодически перемешивая, и затем фильтруют. Фильтрат используют в качестве основного раствора. Вытяжку можно хранить в течение 1 сут при температуре от 2 до 6° С.
Рабочий раствор культуры гриба готовят из основного раствора, разбавляя его в зависимости от активности исследуемой культуры гриба. Количество основного раствора культуры гриба, которое необходимо взять для приготовления рабочего раствора, находят по табл. 87.
Таблица 87
ДАННЫЕ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ РАБОЧЕГО РАСТВОРА КУЛЬТУРЫ ГРИБА
Амилолитическая активность (АС) культуры гриба (предполагаемая), ед./г
Количество культуры гриба в 1 мл рабочего раствора, мг
Количество основного раствора, необходимое для вторичного разбавления, мл
Общий объем разбавленного раствора, мл
5-15 37,5 15 100
16-50 10,0 4 100
51-100 • 2,5 1 100
101-150 1,25 1 200
151-300 0,625 0,5 200
Проведение испытания. В две пробирки (контрольную и опытную) наливают по 10 мл I %-ного раствора крахмала и ставят в ультратермостат или водяную баню с температурой 30± ±0,2° С на 5-10 мин. Затем, не вынимая пробирок из термостата, наливают в контрольную пробирку 5 мл дистиллированной воды, а в опытную-5 мл ферментного раствора. Смеси быстро перемешивают и выдерживают в термостате в течение 10 мин (по секундомеру).
Через 10 мин из пробирок с реакционными смесями отбирают по 0,5 мл раствора и переносят их в колбы с предварительно налитыми туда 50 мл рабочего раствора йода. Содержимое колб перемешивают. Полученные растворы приобретают следующую окраску: контрольный - синюю, опытный - фиолетово-коричневую различной интенсивности в зависимости от количества негидролизоваиного крахмала.
Непосредственно после смешивания растворов определяют на фотоэлектроколориметре их оптическую плотность при 656 HM, пользуясь кюветами с толщиной поглощающего свет слоя 1 см. Контрольным раствором при колориметрировании исследуемых растворов является дистиллированная вода.
Оптическая плотность контрольного раствора Di соответствует количеству исходного крахмала-субстрата. Оптическая плотность опытного раствора Z)2 соответствует количеству крахмала, оставше
