Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Химия -> Рафаэль Р. -> "Успехи огранической химии, Том 1" -> 57

Успехи огранической химии, Том 1 - Рафаэль Р.

Рафаэль Р., Тейлор Э., Уайнберг Г. Успехи огранической химии, Том 1. Под редакцией Кнунянца И.Л. — М.: Издательство иностранной литературы, 1963. — 397 c.
Скачать (прямая ссылка): uoc1.djv
Предыдущая << 1 .. 51 52 53 54 55 56 < 57 > 58 59 60 61 62 63 .. 136 >> Следующая


Возможны и другие типы связей, приводящие к образованию полипептидов трехмерной структуры, но их существование не получило еще экспериментального подтверждения. Так, имеются основанные на реакции Гофмана данные [170, 183] о наличии связей между полипептидными цепями инсулина, глиадина и химотрипсина за счет аминогрупп и «-карбоксильных групп изоглутаминового или изоаспарагинового остатка. В случае инсулина существование подобных связей

-СО - —СО COOH

CH-NH

OCl-

CH-NH

Гидролиз

CH-NH2

(СН2)„

(CH2),

(CH2),

CONH1, NH2

и = 1, остаток аспарагина п = 2, остаток глутамина

п

1, а, ?-диаминопро-пионовая кислота

NH.

12

П

2, а, т-диамино-масляная кислота

Номенклатура и типы полипептидных цепей

169

CONH2 I

CH-NH- ОС1-

I -

(СНг)„

NH,

CH-NH-

(СН2)„ I

—СО —со

п = 1, остаток изоаспарагииа п = 2, остаток изоглутамина

CHO

(CH2)„ + 2NH3 COOH

п = 2, ?-формилпропионовая кислота

и = 1,

?-формилуксусная кислота

CHO+CO2 • I

CO3

не было подтверждено [269]. Однако при реакции Гофмана с полипептидом из В. subUlis были получены кристаллические производные ?-формилпропионовой кислоты [48], что согласуется с наличием связей полиглутаминовой кислоты в !-положении, и незначительные количества а, 7-диаминомасляной кислоты. Поскольку синтетический поли-/-глутамин легко дает последнее соединение [47], был сделан вывод, что природный поли-гі-пептид, вероятно, содержит лишь ч-глутами-новые связи; это подтверждается проведенной в последнее время работой [59].

Наличие в полипептидах необычных типов связей свидетельствует о существовании биологического механизма их образования, а также о том, что они могут присутствовать в" белках. Трудности исследования белков делают маловероятным обнаружение одиночного аминокислотного остатка, например є-аминогруппьі лизина, участвующего в образовании необычного типа связи. Однако для низкомолекулярных полипептидов, например бацитрацина А и полимиксина В, имеются данные, свидетельствующие о наличии связей необычного типа. Так, в бацитрацине А є-аминогруппа лизина и ?-карбоксильная группа аспарагиновой кислоты участвуют в образовании пептидной связи, приводящей к появлению

C2H5 CH3

\ / CH

уЪ—CH2

мч2-CH—с I

4V-CH-CONH-

170

Селективное расщепление белков

в молекуле цикла [145, 205]. Имеются также данные [206, 337] о пониженной реакционной способности а-аминогруппы изо-лейцинового остатка и — SH-группы в соседних остатках, что, по-видимому, объясняется образованием тиазолинового цикла (I). В полимиксине Bi цепь разветвляется за Счет аминогрупп а, і-диаминомасляной кислоты [144].

РАЗЪЕДИНЕНИЕ ПОЛИПЕПТИДНЫХ ЦЕПЕЙ .

Разрыв "мостиков между полипептидными цепями, образующими белок, по-видимому, является наиболее селективным методом расщепления и необходимым предварительным этапом разделения полипёптидных цепей.

Окисление дисульфидных связей

Связи —S—S— легко окисляются до групп —SO3H под действием многих окислителей, но побочные реакции в меньшей степени протекают при использовании надкислот, например надмуравьиной и надуксусной кислот.

Надмуравьиная кислота, легко образующаяся при взаимодействии муравьиной кислоты и перекиси водорода [322], ,была использована Сэнджером [263] для разъединения полипёптидных цепей инсулина. Все аминокислотные остатки гли^ цильной цепи окисленного инсулина были выделены в-сте-хиометрических количествах [149] в результате обработки лейцинаминопептидазой, что свидетельствует об /-конфигурации и отсутствии рацемизации при окислении. Надмуравьиная кислота в последнее время использовалась при изучении многих полипептидов и белков, причем ни в одном случае не наблюдалось разрыва пептидной связи. Помимо цистина и цистеина изменения под действием надмуравьиной кислоты претерпевают только метионин* превращающийся в сульфон [150] с выходом 90%, и триптофан, который поглощает три атома кислорода J322]. Белки, содержащие триптофан (например лизоцим), при окислении надмуравьиной кислотой темнеют* но «и/ в лизоциме [319], ни в папаине [179] пептидные связи не разрываются. При окислении в определенных условиях может происходить потеря тирозина [150], а в присутствии хлорид-ионов тирозин частично превращается в 3-хлортирозин и реже в 3,5-дихлортирозин [315]. При соблюдении особых мер предосторожности, не допускающих создания высоких концентраций перекиси водорода и хлорид-ионов, удается избежать образования хлорпроизводных тирозина [222, 315].

Разъединение полипептидных цепей 171

При использовании надмуравьиной кислоты в качестве окислителя выход [157, 179, 185, 316] цистеиновой кислоты из цистеина, цистина и белков с известным содержанием- чистина не количественный (90 ±. 2%) ."[276], причем данные о побочных продуктах реакции окисления отсутствуют. В ин: сулине для разъединения полипептидных цепей необходимо окислить два дисульфидных мостика между цистеиновыми остатками различных цепей, т. е. максимальный выход составит 0,9X0,9, или 81% разъединенных цепей с сульфогруп-пами. При учете окисления внутрицепочечного дисульфидного мостика максимальный выход разъединенных и полностью окисленных цепей будет еще ниже. В этой связи необходимо указать, что данные о почти количественном выходе разъединенных цепей инсулина [240] нельзя считать надежными [316].
Предыдущая << 1 .. 51 52 53 54 55 56 < 57 > 58 59 60 61 62 63 .. 136 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed