Практикум по аналитической химии. Анализ пищевых продуктов - Кореиман Я.И.
ISBN 5-89448-184-8
Скачать (прямая ссылка):
Измеряют оптическую плотность А стандартных растворов аминокислот на фотоэлектроколориметре в кювете толщиной слоя 1 см при зеленом светофильтре (к = 530 нм) относительно приготовленных растворов сравнения. Результаты измерений записывают в таблицу.________________
Аминокислота ч с, мг/см' А
Объем пробы, мм'
По полученным данным строят градуировочный график в координатах: оптическая плотность - концентрация раствора. В выбранных пределах концентрации аминокислот график линеен.
Измеряют оптическую плотность исследуемых растворов аминокислот в тех же условиях, что и стандартных. По градуировочному графику находят содержание аминокислот в анализируемой пробе вина.
Лабораторная работа № 82
ОПРЕДЕЛЕНИЕ РАФИНОЗЫ В ПРОДУКТАХ САХАРНОГО ПРОИЗВОДСТВА
Рафиноза содержится в продуктах сахарного производства и негативно влияет на поляриметрическое определение сахарозы. При большом содержании рафинозы в расчетные формулы вводят поправку, учитывающую ее концентрацию и оптическую активность.
Определение рафинозы состоит в непосредственном хроматографировании анализируемого продукта (сироп, меласса) после 378
разбавления. Массовая доля сухих веществ в растворе должна составлять 20,0 %.
Цель работы: определить содержание рафинозы в продуктах сахарного производства методом восходящей хроматографии на бумаге.
Приборы, посуда и реактивы
Хроматографическая камера для восходящей хроматографии (химический стакан высотой 8 -10 см и покровные стекла - 2 шт.).
Рефрактометр РПЛ или его аналог.
Пульверизатор.
Гидрофильная хроматографическая бумага.
Микропипетка вместимостью 0,1 см3.
Мерные пипетки вместимостью 5 и 10 см3 - по 1 шт.
Мерные колбы вместимостью 50 см3 - 4 шт.
Химический стакан вместимостью 100 см3.
Растворитель - смесь н.пропилового спирта, этилацетата и воды в объемном соотношении 7:1:2.
Проявитель - смесь спиртового раствора а-нафтола с массовой долей 1,0 % и фосфорной кислоты в объемном соотношении 9:1.
Стандартный раствор рафинозы с массовой долей 10,0 %.
Сахароза, х.ч.
Хлорид калия, х.ч.
Порядок выполнения работы
Подготовка хроматографической бумаги. Вырезают полоску бумаги длиной 5-6 см, ширина зависит от размера хроматографической камеры. Снизу на расстоянии 1-1,5 см от нижнего края бумаги карандашом отмечают стартовую линию. Вдоль листа проводят линии, расстояние между которыми должно составлять 2 см. В середину каждой полоски наносят каплю раствора.
Пробоподготовка. Анализируемый продукт (сироп, мелассу) разбавляют дистиллированной водой до содержания сухих веществ 20,0 % (контроль по рефрактометру). Из исходного раствора готовят серию стандартных растворов рафинозы с массовой долей 0,5; 1,0; 1,5 и 2,0 %. Все растворы должны содержать
20,0 % сухих веществ и одинаковое количество сахарозы. К стандартным растворам для достижения требуемой концентрации сухих веществ добавляют хлорид калия. Содержание сухих веществ проверяют по рефрактометру.
Хроматографирование. На стартовую линию хроматографической бумаги микропипеткой наносят по 1,00 мм' стандартных растворов рафинозы и анализируемого раствора. Диаметр пятна не должен превышать 2-3 мм, расстояние между пятнами -не менее 2 см. Бумагу подсушивают на воздухе и помещают в камеру для восходящей хроматографии. Камерой может служить химический стакан, который сверху закрывают двумя покровными стеклами (рис. 52). На дно стакана наливают растворитель. Между стеклами вертикально опускают бумагу с нанесенными растворами. Нижний край хроматограммы погружают в растворитель на 1 см. Верхний край бумаги должен выступать над поверхностью стекол, закрывающих камеру.
После смачивания всей бумаги растворитель испаряется с верхнего края хроматограммы, выступающего над стеклами, что приводит к дальнейшему движению растворителя с постоянной скоростью, равной скорости испарения. Разделение рафинозы и сахарозы, содержащейся в анализируемом продукте, достигается за 2 ч. Сахароза сдвигается на край хроматограммы, выступаю-
Рис. 52. Хроматографическая камера: 1 - растворитель; 2 - химический стакан; 3 - покровное стекло; 4 - хроматограмма
2
I/
1
щий из камеры. Там же находятся присутствующие в растворе моносахариды, смешивание которых не влияет на определение рафиыозы.
Полученную хроматограмму высушивают и проявляют, опрыскивая из пульверизатора раствором проявителя. Рафиноза проявляется в виде фиолетовых пятен.
Идентификация и количественное определение рафинозы. Для идентификации рафинозы сопоставляют положение окрашенных пятен стандартных образцов и анализируемого раствора на хроматограмме.
Содержание рафинозы в анализируемой пробе определяют визуальным сравнением интенсивности пятен, полученных при нанесении анализируемого' и стандартных растворов с разными концентрациями.
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ
