Практикум по аналитической химии. Анализ пищевых продуктов - Кореиман Я.И.
ISBN 5-89448-184-8
Скачать (прямая ссылка):
роксида натрия со скоростью 1-2 капли/мин. Анионообменник тщательно промывают дистиллированной водой (200-300 см3) до нейтральной реакции по универсальной индикаторной бумаге. Подготовленная колонка применяется для сорбции анионов органических кислот.
Колонку, заполненную катионитом КУ-2, переводят в активную Н-форму аналогично, смолу регенерируют раствором НС1. Промывают колонку дистиллированной водой до нейтральной реакции по универсальной индикаторной бумаге. Подготовленная колонка применяется для перевода кислых и нейтральных солей в свободные кислоты.
Подготовка хроматографической бумаги. Вырезают 2 полосы бумаги длиной 40 см, ширина зависит от размеров хроматографической камеры. Снизу на расстоянии 3 см от нижнего края бумаги карандашом проводят стартовую линию. На расстоянии 3 см от левого края отмечают первую точку для нанесения пробы, расстояние между точками нанесения пробы на хроматограмму должно составлять 3 см.
Пробоподготовки. Массу навески хлеба (60±0,01) г растирают в фарфоровой ступке с небольшим объемом дистиллированной воды и количественно переносят в мерную колбу. Раствор доводят почти до метки, колбу закрывают пробкой. Кислоты экстрагируют на вибросмесителе 30 мин. Раствор доводят до метки и перемешивают. После отстаивания экстракт центрифугируют 5 мин.
Для получения кислот в свободном виде 50,00 см3 центрифу-гата пропускают через колонку с анионитом со скоростью 1 см3/мин. Кислоты элюируют раствором NaOH. Элюат, содержащий натриевые соли органических кислот, пропускают через колонку с катионитом. Кислоты элюируют дистиллированной водой до нейтральной реакции по универсальной индикаторной бумаге. Элюат выпаривают на водяной бане до объема 3-5 см3.
Хромитогрифировиние. На стартовую линию хроматографической бумаги микропипеткой наносят по 30,00 мм3 стандартных растворов кислот и анализируемого раствора. Диаметр пятна не должен превышать 2-3 мм, расстояние между пятнами - не менее 3 см. Для количественного определения на вторую полосу 372
бумаги наносят стандартные растворы кислот с разной концентрацией (по 3-4 образца). Бумагу подсушивают на воздухе и помещают в камеру для восходящей хроматографии (рис. 50). Нижние края хроматограмм опускают в растворитель на 1-1,5 см.
Рис. 50. Камера для восходящей хроматографии: 1 - пробка; 2 - крючок; 3 -стеклянный сосуд; 4 - полоска бумаги;
5 - растворитель
После высушивания органические кислоты проявляют спиртовым раствором бромфенолового синего, для этого хроматограммы опрыскивают из пульверизатора. Кислоты проявляются в виде желтых пятен на синем фоне, располагаясь на хроматограммах в такой последовательности: щавелевая, винная, лимонная, яблочная, молочная.
Идентификация. Качественный состав смеси кислот в анализируемом растворе устанавливают, сопоставляя положение на хроматограмме окрашенных пятен стандартных образцов и анализируемой смеси. Для большей точности определения рассчитывают коэффициенты подвижности Rf для стандартных образцов кислот и кислот в исследуемом растворе. Результаты заносят в таблицу. Сопоставляя значения Rf для соответствующих кислот, делают вывод о наличии тех или иных компонентов в анализируемой пробе.
Количественное определение органических кислот основано на зависимости площади пятна от концентрации кислот в пробе. По второй хроматограмме измеряют площади пятен кислот с известной концентрацией. Для этого переснимают пятна на кальку, которую затем накладывают на миллиметровую бумагу. Рассчитав площади поверхности пятен (S, мм2) и зная массовую долю кислот в стандартных растворах (со, %), строят градуировочный график S = f (lg со) для каждой кислоты. Растворы хроматографируют на одной полосе бумаги в постоянных условиях,
поэтому площади поверхности пятен пропорциональны логарифму концентрации кислот.
Измеряют площадь пятна органической кислоты на исследуемой хроматограмме и по градуировочному графику находят ее содержание в анализируемом продукте.
Лабораторная работа № 81 ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНОКИСЛОТ В ВИНЕ
Вино характеризуется значительным содержанием азотистых веществ - белков и продуктов их распада (аминокислоты, амины). Являясь питательными веществами для дрожжей, аминокислоты обусловливают возможность сбраживания сусла. Производство некоторых вин (шампанское, херес) связано с применением дрожжей (вторичное брожение). Кроме того, аминокислоты существенно влияют на стойкость вин, вызывают "белковое помутнение". Количество азотистых веществ, в частности, аминокислот в вине - важный показатель стойкости вин.
Определение основано на предварительной сорбции аминокислот на катионите, элюировании раствором аммиака и последующем хроматографировании элюата.
Цель работы: освоить пробоподготовку к анализу и определить содержание аминокислот в вине методом нисходящей хроматографии на бумаге.
Приборы, посуда и реактивы
Хроматографическая камера для нисходящей хроматографии.
Сушильный шкаф.
Фотоэлектроколориметр.
