Жидкостная хроматография при высоких давлениях - Энгельгардт Х.
Скачать (прямая ссылка):
Верхняя хроматограмма, на которой при градиентном элюировании почти не видно примесей, получена при использовании гептана, который помимо перегонки был дополнительно очищен адсорбционной фильтрацией через окись алюминия.
При помощи этого метода очистки [1 — 5] не только удаляют полярные примеси, в том числе и воду, но одновременно получают элюенты со значительно лучшим пропусканием в УФ-области. Хлористый метилен и хлороформ, граница пропускания которых лежит вблизи наиболее часто используемой длины волны УФ-детекгора (254 нм), следует почти всегда предварительно очищать этим способом; при этом значительно увеличивается область линейности сигнала.
Очищают растворители методом классической колоночной хроматографии. Колонку с внутренним диаметром 2—5 см, длиной 40—150 см заполняют высокоактивными адсорбентами, например окисью алюминия и силикагелем, и сразу же наливают сверху элюент. Первую часть капающего из колонки растворителя собирают отдельно, так как чаще всего он недостаточно чист, но его
Очистка растворителей
233
t, мин
Рис. XII. 1. Очистка растворителей. Градиентное элюирование без введения
пробы.
Элюент: н-гептан-* хлористый метилен, а — разделительную колонку промывают 15 мнн перегнанным н-гептаном н проводят градиентное промывание до хлористого метилена; 6 — разделительную колонку промывают 15 мин н-гептаном, дополнительно очищенным с помощью адсорбционной фильтрации через окись алюмнння. Колонка: 30 см х 4 мм (внутр.); неподвижная фаза: силикагель меркогель Si 100; F « 4,6 мл/мин; Др = 70 атм.
можно опять налить в верхнюю часть колонки. Средняя и главная фракции вполне пригодны для работы.
Если колонка отработана, то на выходе из нее появляется исходный, содержащий примеси растворитель. Количество очищенного растворителя зависит от активности, т. е. от удельной поверхности адсорбента, полярности растворителя, количества примесей в растворителе и их полярности. Ниже приведены величины, дающие лишь ориентировочные соотношения адсорбента и растворителя. Опытным путем следует стандартизовать то количество примесей в данном элюенте, которое выбранный адсорбент может поглотить. На 100 г окиси алюминия можно очистить примерно 150—600 мл алифатических углеводородов (пенган, гексан, гептан и т. д.). Силика-
234
Глава XII
гель, обладающий большей удельной поверхностью, имеет большую емкость. Наилучшие результаты очистки достигнуты на смешанных колонках, заполненных окисью алюминия и силикагелем [4]. Для регулирования скорости потока на конце колонки следует установить кран, который, однако, должен работать без смазки!
Объем полярных элюентов, например хлористого метилена, хлороформа и т. д., который можно очистить тем же количеством адсорбента, конечно, меньше (200— 400 мл/100 г окиси алюминия). Если проводится очистка уже высушенных элюентов, количество очищенного растворителя можно увеличить.
Элюенты, стоящие в элюотропном раду ниже эфиров уксусной кислоты, таким способом очистить нельзя. Эти элюенты можно высушить с помощью цеолита 3 А, но не очистить. Такие растворители целесообразно хранить над цеолитом, так как из-за большого размера частиц (> 1 мм) молекулярное сиго мало пригодно для проведения процесса очистки в колонках. В высушенных таким способом элюентах могут содержаться мелкие твердые частицы, которые иногда нарушают работу клапанов насоса. Хорошо высушенные элюенты гигроскопичны. Работать с такими растворителями следует в условиях, исключающих возможность попадания в них влаги, и хранить их над свежерегенерированным и высушенным молекулярным ситом.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Wohlleben G., Angew. Chem., 67, 741 (1955).
2. Wohlleben G., Angew. Chem., 68, 752 (1956).
3. Hesse G., Schildknecht H., Angew. Chem., 67, 737 (1955).
4. Hesse G., Engelbrecht B. P., Engelhardt H., Nitsch S., Z. Anal. Chem., 241, 91 (1968).
5. Engelhardt H., in Zief M„ Spieghts R. M. (Eds.), Ultrapurity. New York, Dekker, 1972.
ПРИЛОЖЕНИЕ
Поставщики (состояние на 1977 г.)
Комплектное оборудование поставляют следующие фирмы:
1. Abimed, Analysentechnik Ludwigshafener Str. 26, 4000 Dusseldorf
2. Altex Scientific Corp., Berkeley, Calif., USA
Kontron Technik GmbH Industriegebiet 1, 8051 Eching b. Munchen
3. Applied Research Laboratories GmbH Hans-Bokler-Str. 7, 6078 Neu-Isenburg
4. Bodenseewerk Perkin-Elmer Postfach 1120, 7770 Oberlingen
5. C. Desaga GmbH
Postfach 101969, 6900 Heidelberg 1
6. DuPont de Nemours (Deutschland) GmbH Instrument Products Division
Dieselstr. 18, 6350 Bad Nauheim
7. Hewlett-Packard GmbH Ohmstr. 6, 7500 Karlsruhe
8. ISCO (Instrumentation Specialities Company, Lincoln, Neb., USA)
Colora MeBtechnik GmbH Postfach 1240, 7073 Lorch/Wurtt. 1
9. P. J. Kipp + Zonen Vertriebs-GmbH Wiesenau 5, 6242 Kronberg/Taunus
10. Laboratory Data Control, Riviera Beach, Fla., USA
Latek, Labortechnik-Gerate GmbH Wielandtstr. 21, 6900 Heidelberg
11. Micrometritics Instr. Corp., Norcross, Ga., USA
Coulter Electronics GmbH Hulser Str. 295, 4150 Krefeld
12. Packard GmbH
Hanauer Landstr. 120, 6000 Frankfurt/Main 1
