Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Химия -> Энгельгардт Х. -> "Жидкостная хроматография при высоких давлениях " -> 80

Жидкостная хроматография при высоких давлениях - Энгельгардт Х.

Энгельгардт Х. Жидкостная хроматография при высоких давлениях — М.: Мир, 1980. — 250 c.
Скачать (прямая ссылка): jidkostnayahromatografiya1980.djvu
Предыдущая << 1 .. 74 75 76 77 78 79 < 80 > 81 82 83 84 85 86 .. 94 >> Следующая

Si - сн2 - сн2 - сн2 - О - сн2 -сн - сн2 - ОН
I
он
Фазы такого типа, например гликофаза или диол, выпускаются на продажу. Эпоксидную группу можно с помощью вода перевести в гликольную или обработать другими нуклеофильными соединениями, например аминами, спиртами и т. д. [21]. Однако даже подобные фазы еще могут адсорбировать необратимо некоторые белки и ферменты [20].
Неподвижные фазы характеризуют по границам исключения и по калибровочной кривой. Калибровочная кривая представляет собой зависимость логарифма среднемассового значения молекулярной массы Mw от объема элюирования Ve (см. рис. IX.1). На калибровочной кривой имеется линейный участок, соответствующий оптимальной области применения данной фазы. Однако вид подобных характеристических кривых зависит от типа используемого полимера, поэтому хроматографисты пытаются получить универсальную калибровочную кривую. Была установлена зависимость диаметра вращения клубка полимера от средней молекулярной массы. Определенные таким образом радиусы были использованы для характеристики материала носителей [6, 8 -10].
Распределение пор по размерам у органических полимеров отличается от такового для силикагеля. Для органических гелей характерны сравнительно широкое распределение пор по размерам, начиная с малых диаметров, и очень острая верхняя граница исключения. У силикагелей распределение пор по размерам более или менее узкое и симметричное относительно среднего диаметра пор. Последовательно соединяя несколько колонок, заполненных силикагелями с различным диамётром пор, можно получить систему, перекрывающую всю область применения ситовой хроматографии.
14 Заказ 825
210
Глава IX
Г. Применение ситовой хроматографии
Для ситовой хроматографии справедливы все закономерности колоночной хроматографии. Удвоение длины колонки приводит к удвоению объема элюирования. Для того чтобы объем пор и разделительная способность были достаточными, колонка должна быть длинной. Поэтому необходимо по возможности устранить все причины, вызывающие размывание полос. Разделение на неподвижных фазах с малым размером частиц дает значительно лучшие результаты. Вязкость элюента должна быть как можно меньше (большие коэффициенты диффузии). По этой причине, а также потому, что с увеличением температуры растворимость полимеров повышается, в ситовой хроматографии разделение проводят при более высоких температурах, иногда лишь немного меньших, чем точка кипения элюента. Появление пузырьков газа в детекторе можно предотвратить, создавая небольшое избыточное давление (1 -2 атм) в ячейке.
Специфика применения ситовой хроматографии рассматривается в ряде монографий [3—6]. Мы же лишь продемонстрируем на отдельных примерах возможности скоростной ситовой хроматографии. Во многих случаях при анализе очень сложных смесей ситовая хроматография может служить хорошим методом предварительного разделения и отделения высокомолекулярных примесей. Как сообщают авторы работы [18], при использовании жестких гелей при высоких линейных скоростях (> 1 мм/с) очень большие молекулы (например, с Mw = 7 • 106) могут разрушаться под действием срезывающей силы.
1. Определение молекулярно-массового распределения полимеров
Главной областью применения ситовой хроматографии остается определение молекулярно-массового распределения полимеров. При этом предполагается, что молекулы пробы не адсорбируются на поверхности носителя и что между «стоящим» и движущимся элюентом моментально устанавливается равновесное распределение молекул пробы [11].
С помощью соответствующих стандартных полимеров, например полистирола, с узким молекулярно-массовым распределением получают калибровочную кривую. Если при проведении расчетов принимают, что гидродинамический радиус молекулы пропорционален логарифму молекулярной массы и граничной вязкости (индекс Штау-дингера, истинная вязкость) [г|], то результаты молекулярно-массового распределения линейных полимеров, отличающихся по химическому составу, вполне совпадают [8]. При молекулярной массе примерно 50000 [12] точность определения молекулярных масс составляет примерно 5%. Иногда результаты менее удовлетвори-
Ситовая хроматография
211
Рис. IX.2. Ситовая хроматография дисперсий полиметилметакрилатов [10].
Неподвижная фаза: меркогель Si 3500; элюент: вода; колонка 160 см х 9 мм (внутр.); F — • 8 мл/ч. В пике 1070 А содержатся также частицы большего размера.
тельны, так как не всегда полимеры ведут себя таким образом, как это описывает изложенная здесь простая модель, тем не менее качественную картину состава или молекулярно-массового распределения пробы полимера получают всегда. Калибровочную кривую для определяемого полимера следует проверить, с этой целью проводят независимое определение молекулярной массы. При замене распределительной колонки и особенно при замене носителя всегда следует вновь проверить калибровочную кривую по стандартам, так как получить, например, два образца силикагеля с полностью идентичным распределением пор практически невозможно.
Поскольку пористая структура жестких силикагелей при смене элюентов не меняется, то не наблюдаются и изменения селективности разделительной системы, если только геометрия растворенных полимерных молекул не зависит от вида растворителя.
Предыдущая << 1 .. 74 75 76 77 78 79 < 80 > 81 82 83 84 85 86 .. 94 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed