Жидкостная хроматография при высоких давлениях - Энгельгардт Х.
Скачать (прямая ссылка):
A10"Na+ + 2НС1 -*¦ > А1 - Cl + NaCl + Н20
Обработанная окись алюминия дает водную суспензию с pH 3, и поэтому ее называют «кислой» окисью алюминия; она является анионным обменником. При осторожной нейтрализации получают «нейтральную» окись алюминия, не проявляющую ни катионо-, ни анионообменных свойств. На такой окиси алюминия (водные суспензии pH 6,8) не наблюдается эффектов, связанных с кислотными или основными поверхностными реакциями. «Нейтральная» окись алюминия не адсорбирует из водных растворов ни метиленовый голубой (адсорбируется «основными» катионными центрами), ни нафтоловый оранжевый (адсорбируется «кислотными» анионообменными центрами). «Нейтральная» окись алюминия предпочтительна для разделения чувствительных веществ в неполярных средах, так как иа поверхности окиси алюминия почти всегда находится адсорбированная вода, в которой растворяются удерживающиеся вещества и при этом вступают в контакт с кислотными или основными поверхностными группами в полярной среде.
Окись алюминия относят к полярным адсорбентам. По хроматографическим свойствам она очень напоминает силикагель, но молекулы ненасыщенных веществ удерживаются на ней, как правило, сильнее. Миогоядерные ароматические соединения на окиси алюминия разделить легче, чем на силикагеле. Осложнения, обусловленные необратимой адсорбцией (хемосорбцией) или рассмотренными выше поверхностными реакциями, при разделении на окиси алюминия наблюдаются чаще, чем на силикагеле.
Адсорбционная хроматография
111
3. Полиамиды
Полиамиды пригодны для разделения соединений, способных образовывать водородные связи (фенолы, хиноны, сахара и т. д.). Величина сорбции зависит от числа пептидных группировок в полимере (например, найлон-4, найлон-6 и найлон-11). Иногда, чтобы уменьшить необратимую адсорбцию, приходится ацетилировать свободные конечные аминогруппы полиамида.
Чистый полиамид для жидкостной хроматографии при высоких давлениях не пригоден. Однако его можно очень легко нанести на непористый или пористый носитель. Такие фазы имеются в продаже.
Наиболее сильная адсорбция на полиамиде происходит из растворителей, не способных к образованию водородных связей. Элюирование проводят с помощью таких растворителей, как спирты, вода или диметилформамид. Полное вытеснение сорбированного вещества возможно только при промывании колонки раствором едкого натра.
4. Адсорбенты, обладающие групповой селективностью
Силикагель, покрытый нитратом серебра, используют в жидкостной хроматографии для селективного отделения насыщенных органических соединений от ненасыщенных. Подобные системы, известные из классической колоночной хроматографии, применимы и в жидкостной хроматографии при высоком давлении. В работах [10, 11] описаны примеры такого разделения (нитрат серебра [10], тринитрофлуоренон [11]).
Селективность модифицированных неподвижных фаз с подходящими функциональными группами аналогична селективности фаз с физическим покрытием [б], но химически связанные фазы имеют ряд преимуществ (см. гл. V) [12].
В. Влияние воды на разделение
Как известно, адсорбированная вода довольно сильно влияет на хроматографические свойства. Из неполярных органических растворителей воду удаляют с помощью окисных адсорбентов, например окиси алюминия и силикагеля. В ряде работ описаны способы стандартизации содержания воды в адсорбентах [9, 13, 14] и способы приведения адсорбентов в равновесие с водой, содержащейся в элюенте при равновесии [9, 15]. Согласно одному из таких методов, к адсорбенту, имеющему определенную активность, добавляют определенное количество воды. Для жидкостной хроматографии при высоких давлениях этот метод малопригоден, так как расход элюента в расчете на грамм адсорбента значительно больше, чем в классической жидкостной хроматографии, и активность адсорбента определяется в основном содержанием воды в элюенте, а не количеством предварительно добавленной воды. Равновесие между водой, растворенной в элюенте, и адсорбированной водой устанавливается быстро. Если колонки заполнены с помощью одного из описанных выше суспензионных методов, активность адсорбента может ь >чисеть от элюента даже в еще большей степени.
112
Глава VI
Рис. VI.4. Влияние содержания воды в элюенте на разделение олигофени-
ленов [16].
Поверхности о-пористый адсорбент перисорб A, А^т 30 мкм; элюент: а - н-гептан, высушенный над молекулярным ситом, 6 - 100 мл насыщенного водой гептана + 200 мл гептана, высушенного над молекулярным ситом, в - насыщенный водой гептан; колонка: 50 см х 2 мм (внутр.); и» 6,2 см/с;
Ар ¦ 56 атм Проба: 1 - бензол; 2 ~ 5 — олнгофенилены.
На рис. IV.4 на примере разделения олигофениленов [16] показано, насколько сильно содержание воды в адсорбенте влияет на разделение. В этом примере оптимальное разделение получают в том случае, когда элюирование проводят смесью, содержащей одну часть
Адсорбционная хроматография
ИЗ
Рис. VI.5. Разделение стероидов на силикагеле [16].
Силикагель: меркогель Si 60; элюент: хлороформ с добавкой 0,5% спирта для стабилизации: а — высушен над молекулярным ситом, 6 - насыщен водой (~ 0,2% Н20); колонка: 200 см х 2 мм (внутр.); F =» 0,75 мл/мни: Ар =» 185 атм.
