Жидкостная хроматография при высоких давлениях - Энгельгардт Х.
Скачать (прямая ссылка):
чв
I
©
л 5 н 2 о се О ¦ Я h X
а’я
5Г О со со О и
с
о
Н
3 =
«§ я 3
со X
Я 3
о. ж с л ч и
Й Я
Й ч
о
с
4. ° * сп О и! я я К Ч -о Й vo ч ?
о, н а
С
о
н
s
а
и
•е
и
, •е о к
S СП о cd и
S X и
ч -а <и
ю Ч т
S и S
а н а
С
и
*
О
н
2 о о
го 32 <N
li a о 1 00 s
О О о о 8 о о
<ч 1 <ч 1 <N 1 ООО in ^ 1^1 о so <N 1
о о © — — — О
о о О о
о
о
<N
О
Os
I
О
и
о
ч
<
S.S
§5
U9
S
gz
S
§ ц
2 о е S § * СО
С
о
а
и
s
2
Ч О ч& « о о
* А
-0 г9 §{; н I s
5-f
се Ч Й
5 8.* §§• о
U U t
и я 2
о, а -г С
I
о"
а
VO
а
о
и
о
S ^
¦8.0
XJ
Носители и неподвижные фазы
89
пористых ионообменников, рассчитанная на 1 г насадки, относительно невелика (~10 мкэкв./г). ППМ с успехом используют в тех случаях, когда разделение необходимо провести за короткое время или когда разделяемые соединения слишком сильно удерживаются на обычных пористых материалах. Диаметр частиц ППМ лежит в пределах 25 — 50 мкм. Разделительная способность колонок, заполненных ППМ, чаще всего больше, чем у колонок, заполненных пористыми частицами такого же размера (ср. табл. III. 1). Однако интерес к такого рода материалам ослабевает по мере того, как удается хорошо и воспроизводимо заполнять колонки пористыми частицами диаметром от 5 до 10 мкм.
Ситовые фракции, применяемые для заполнения, должны быть по возможности более узкими. Частицы диаметром более 20 мкм легко классифицировать с помощью сит, причем для частиц диаметром меньше 40 мкм следует предпочесть мокрое просеивание. Частицы диаметром менее 20 мкм можно классифицировать только с помощью воздушного классификатора, причем чистые фракции прежде всего для частиц диаметром менее 10 мкм получают только методом седиментации. Перед применением носители необходимо освободить от очень мелких частиц, образовавшихся при истирании, проводя седиментацию в воде (метаноле или ацетоне для очень маленьких частиц). Это улучшит проницаемость разделительной колонки и, кроме того, предотвратит засорение капилляров, ведущих к детекторам. При использовании относительно широких ситовых фракций обычно наблюдается самая неблагоприятная ситуация. На проницаемость разделительной колонки больше всего влияют самые мелкие частицы ситовой фракции, в то время как на разделительную способность в основном влияют частчцы наибольшего диаметра.
А. Насадки, применяемые в адсорбционной и распределительной хроматографии
В принципе в адсорбционной и распределительной хроматографии в качестве носителей можно использовать все материалы, удельная поверхность которых больше 2 м2/г. У многих поверхностно-пористых материалов, например у зипакса, удельная поверхность очень невелика, поэтому, чтобы разделение было возможно, многие ППМ приходится покрывать разделяющей жидкостью. Для адсорбционной хроматографии такие частицы не пригодны.
В табл. V.1 перечислены важнейшие из имеющихся в продаже ППМ. На частицы ППМ можно нанести примерно 1—2% разделяющей жидкости; при большем содержании этой жидкости частицы склеиваются.
В табл. V.2 приведены физические свойства важнейших из имеющихся в продаже пористых носителей. Эти насадки приемлемы для
90
Глава V
адсорбционной хроматографии (гл. Vi), а после покрытия разделяющей жидкостью и для распределительной хроматографии (см. гл. VII). По-видимому, средний диаметр пор носителей не влияет на их хроматографические свойства, если он находится в пределах 60 - 700А. При одинаковом качестве элюента значение к' данного вещества пробы тем меньше, чем меньше удельная поверхность носителя. Подробное обсуждение свойств неподвижных фаз содержится в гл. VI и VII. Максимальная степень покрытия разделяющей жидкостью в распределительной хроматографии примерно соответствует объему пор твердого тела. Например, на 1 г силикагеля с объемом пор 1 мл/г можно нанести ~ 1 г разделяющей жидкости — так называемое 100%-ное покрытие.
Б. Химически модифицированные носители
Гидроксильные группы на поверхности силикагеля или окиси алюминия определяют адсорбционные свойства и селективность неподвижной фазы. Эти группы можно заменить на органические соединения, хроматографические свойства носителя при этом также изменятся в большей или меньшей степени. Хроматографические свойства химически связанной неподвижной фазы зависят от структуры твердого носителя (его удельной поверхности, объема пор и т. д.). Как правило, химической модификации подвергают только силикагель. Для одного и того же элюента, если специфическое селективное влияние органических групп модификатора отсутствует, значение к' для модифицированной фазы всегда меньше, чем для исходного («голого») силикагеля.
Селективность можно изменить, заменив органический компонент, например вводя функциональные группы в органический остаток, преимущественно в ш-положение к связи с поверхностью силикагеля. Поскольку заместить все гидроксильные (силанольные) группы на поверхности силикагеля практически невозможно, то на селективность фазы дополнительно влияют оставшиеся гидроок сильные группы. Поэтому добиться того, чтобы селективность фазы точно соответствовала свойствам связанного органического остатка, очень трудно.
