Жидкостная хроматография при высоких давлениях - Энгельгардт Х.
Скачать (прямая ссылка):
Изменение показателя преломления в элюате можно также определить с помощью интерферометра, но эти приборы очень дороги.
В. Микроадсорбционный детектор
Этот детектор измеряет теплоту сорбции, выделяющуюся при прохождении зоны вещества через неподвижную фазу [6]. Поскольку после сорбции всегда следует десорбция пробы, сопровождающаяся поглощением тепла из элюента, то в идеальном случае положительный и отрицательный эффекты должны чередоваться. Теоретически получают дифференциальную гауссову кривую. Такой детектор в состоянии различать все вещества, но, к сожалению, он до сих пор не лишен некоторых систематических ошибок. Значительным недостатком такого способа детектирования является несимметричность сигнала; десорбционный сигнал менее острый, чем адсорбционный. Часто также площадь десорбционного пика меньше, поэтому при электронном интегрировании не удается получить гауссову кривую, а S-образный сигнал делает невозможным идентифицирование близлежащих пиков. Точное определение времени удерживания (элюирование точек центра тяжести) едва ли возможно. Хотя высота адсорбционного пика и является функцией величины пробы, все же величина сигнала очень легко меняется в результате загрязнения или дезактивирования незначительных количеств адсорбента в измерительной ячейке.
Кроме того, микроадсорбционный детектор чувствителен к колебаниям скорости потока и даже показывает пульсации плохо демпфированного поршневого насоса.
Детекторы
71
В то же время в этом детекторе очень простое измерительное устройство. Термисторы можно поместить в конце колонки, в результате мертвый объем станет едва заметным. К сожалению, температурные колебания при этом плохо компенсируются, поэтому непосредственно за термистором, помещенным в адсорбент, в поток элюента ставят второй термистор, окруженный только стеклянными шариками, компенсирующий колебания температуры элюента и окружающей температуры. Даже при наличии такого устройства мертвый объем минимален. CaN.o собой разумеется, что прибор должен быть хорошо термостатирован, по меньшей мере до ± 0,003°С. Если это условие не выполняется, между колонкой и детектором происходит теплообмен. С помощью такого устройства можно фиксировать изменение температуры в 10 " 4оС. В настоящее время приборы данного типа больше не выпускаются.
Г. Транспортный детектор (пламенно-ионизационный детектор)
При использовании детектора такого типа перед определением пробы летучий элюент удаляется. Для этой цели пробу наносят на транспортное устройство (цепочки, сетки, спирали или проволоки), испаряют элюент, а нелетучую пробу переводят в пламенно-ионизационный детектор. Огромное преимущество данной системы заключается в том, что в идеальном случае можно получить сигнал только от собственно пробы и что поэтому этот сигнал не зависит от вида хроматографического проявления. Химические свойства, температура, пульсации подвижной фазы не влияют на результаты. Разумеется, элюент, а также проба должны отвечать следующему условию: их летучести должны очень сильно различаться, только тогда после испарения элюента на транспортной системе останется достаточный остаток пробы.
Схема детектора этого типа [8] показана на рис. IV.5. Поверхность проволоки из нержавеющей стали тщательно очищают и окисляют, прокаливая проволоку при высокой температуре. После такой обработки покрывают проволоку равномерно даже элюенты с высоким поверхностным натяжением. Обработанную таким образом проволоку протягивают через поток элюента и покрывают пробой и элюентом. В печи для испарения, в которой поддерживается требуемая температура, элюент испаряют и вымывают воздухом. После этого пробу на проволоке транспортируют в окислительную печь и при 600 — 800°С сжигают в токе воздуха. Продукты сгорания из печи отсасывают с помощью струйного насоса, приводимого в действие водородом, и после каталитического превращения в метан определяют в пламенно-ионизационном детекторе (ПИД). Такие операции, как сжигание и превращение в метан, более предпочтительны, чем пиролиз, так как воспроизводимость результатов в первом слу-
72
Глава IV
Рис. IV.5. Схема транспортного детектора (см. текст)
/ — разделительная колонка, 2 — нанесение элюата на проволоку, 3 — камера предварительного испарения, 4 — воздух, 5 — катализатор, б — пламенно-ионнзационный детектор (ПИД), 7 — отсос, 8 — устройство для очистки проволоки, 9 — катушки для проволоки.
чае значительно выше. Транспортировать проволоку длиной 10 км и толщиной 0,12 мм следует, конечно, с постоянной скоростью.
Чувствительность транспортного детектора по сравнению с ПИД применяемым в газовой хроматографии, не очень велика, однако находится в той же концентрационной области, что и чувствительность почти всех детекторов в жидкостной хроматографии, т. е. составляет 1—3 мкг/мл. Если учесть, что на проволоке остается очень незначительное количество пробы, то эта чувствительность отличная. Не следует упускать из виду, что часть пробы при испарении растворителя теряется. При этом различия в летучестях компонентов пробы могут исказить количественный результат. Кроме того, не все сгорающие газы подходят для ПИД. Этот детектор был бы идеальным для жидкостной хроматографии при высоких давлениях, так как с его помощью можно определять свойства собственно пробы, не содержащей элюента, и при этом были бы возможны без особых осложнений разделения с использованием градиентного элюирования.
