Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Химия -> Энгельгардт Х. -> "Жидкостная хроматография при высоких давлениях " -> 22

Жидкостная хроматография при высоких давлениях - Энгельгардт Х.

Энгельгардт Х. Жидкостная хроматография при высоких давлениях — М.: Мир, 1980. — 250 c.
Скачать (прямая ссылка): jidkostnayahromatografiya1980.djvu
Предыдущая << 1 .. 16 17 18 19 20 21 < 22 > 23 24 25 26 27 28 .. 94 >> Следующая

Ротаметры, обычно используемые в газовой хроматографии, в жидкостной хроматографии из-за большого различия в вязкостях подвижной фазы и из-за ее сильной температурной зависимости требуют для каждой температуры и каждого растворителя специальной тщательной калибровки, поэтому в ЖХ их применяют очень редко.
3. Сборник фракций
Устройства для сбора отдельных фракций, необходимых только для того, чтобы можно было определить растворенные составные части пробы, в аналитической жидкостной хроматографии при высоком давлении больше почти не нужны, так как чувствительность детекторов достаточна. Только в особых случаях (например, при измерении радиоактивности и др.) собирают отдельные фракции либо имеющие постоянный объем, либо собранные за определенный промежуток времени. Для препаративных работ, когда размер пробы превышает 100 мг, конечно, подходит коллектор фракций. В этом случае должна иметься возможность (так же как в препаративной газовой хроматографии) управлять сборником фракций с помощью самописца. Тогда число фракций, необходимых для проведения всей работы, значительно уменьшается. Наряду с пробоотборниками, известными из классической колоночной хроматографии, в продаже имеются приборы меньших размеров (на 10 — 20 фракций), выпускаемые специально для жидкостной хроматографии при высоких давлениях.
И. Регистрирующее устройство
Записывают хроматограммы с помощью компенсационного самописца, который должен быть связан с детектором. Время пробега должно составлять 0,25 или 0,5 с для того, чтобы при наличии очень быстро появляющихся пиков не наблюдалось нарушения хроматограмм. Времена элюирования могут различаться очень сильно, поэтому скорость движения ленты самописца должна легко регулироваться. Как и газовые хроматографы, жидкостные хроматографы могут быть подсоединены к интеграторам и небольшим вычислительным машинам.
Аппаратура для жидкостной хроматографии
57
К. Аппаратура для градиентного элюирования
Состав элюента в жидкостной хроматографии имеет решающее значение. Проводя элюирование смесями различного состава, можно за короткое время элюировать из колонки в виде острых хорошо разделенных пиков не только легко элюируемые выбранным элюен-том соединения, но и те компоненты пробы, которые таким элюен-том постоянного состава элюировались бы с трудом. Градиентное элюирование позволяет значительно сократить продолжительность анализа и существенно улучшить его чувствительность. Разумеется, разрешение в большинстве случаев становится хуже. Все эти вопросы подробно обсуждаются в разд. VI.3.4, здесь же мы только рассмотрим, какая аппаратура применяется при градиентном элюировании.
Большинство используемых в настоящее время детекторов фиксирует также изменение состава элюента. Далее мы на этом вопросе остановимся, а пока только отметим, что даже при использовании дифференциальных,устройств и сравнительной колонки, идентичной соответствующей разделительной колонке, дрейф нулевой линии полностью не исключается. Едва ли даже возможно заполнить две разделительные колонки таким образом, чтобы гидродинамическое сопротивление их было полностью идентичным.
При проведении градиентного элюирования встает вопрос о том, как осуществить смешивание элюентов. Проще всего проводить смешивание элюентов в той части прибора, где давление низкое. Для этого можно использовать устройства, известные из классической жидкостной хроматографии [21, 24]. Подача раствора может осуществляться с помощью поршневого насоса с коротким ходом поршня. Однако длинный путь между камерой смешения и разделительной колонкой и возможное смешивание в насосе и демпфирующем устройстве могут служить причиной плохой воспроизводимости результатов разделения. В работе [20] описан автоматический аппарат с 20 форсосудами для смешивания при низком давлении. Составление смесей для градиентного элюирования при высоких давлениях требует больших затрат. Обычно используют для каждого компонента собственную систему подачи. Решающее значение имеют геометрия камеры смешения и то, как через нее протекает раствор, так как в разделительную колонку должна поступать уже готовая смесь. Объем каналов, соединяющих камеру смешения и разделительную колонку, должен быть минимально возможным и между ними не должно быть никаких ответвлений, промываемых элюентом.
В большинстве выпускаемых приборов имеется устройство для градиентного элюирования. Самое простое устройство такого типа — это система из двух поршневых насосов с длинным ходом поршня, скорость подачи которых меняется противоположним образом. При этом либо оба насоса вместе подают растворители в камеру для
58
Глава III
смешения, либо один насос подает растворители в цилиндр другого, который при этом выполняет роль камеры смешения, в нем же осуществляется дополнительное перемешивание с помощью магнитной мешалки.
Градиентное элюирование можно проводить и в установках с одним насосом, если это насос постоянного давления. Второй более сильно элюирующий компонент помещают в накопительную петлю. С помощью подходящего распределительного вентиля с разделительной колонкой или расположенной перед ней камерой смешения соединяют либо непосредственно насос, либо накопительную петлю. В результате чего и достигается градиент концентраций в элюирующей смеси. Смешивание обоих «пробкоподобных» потоков элюентов должно быть очень хорошим.
Предыдущая << 1 .. 16 17 18 19 20 21 < 22 > 23 24 25 26 27 28 .. 94 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed